巴比妥類(lèi)藥物的分析

1、第五章 巴比妥類(lèi)藥物的分析第五章 巴比妥類(lèi)藥物的分析基本要求1、掌握本類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)。2、掌握典型藥物苯巴比妥、司可巴比妥鈉、硫噴妥鈉的法定鑒別和含量測(cè)定方法（包括原 理、方法和計(jì)算）。3、熟悉本類(lèi)藥物的特殊雜質(zhì)檢查和其他定量分析方法。4、了解生物樣品中本類(lèi)藥物的測(cè)定方法。學(xué)習(xí)要點(diǎn)、典型藥物的鑒別、檢查和含量測(cè)定典型藥物化學(xué)鑒別特殊雜質(zhì)檢查含量測(cè)定苯巴比妥銀鹽反應(yīng)（白色J ）、銅鹽反應(yīng)（紫色或紫色J ）、NaNO2-H2SO4反應(yīng)（橙黃色）、 甲醛-硫酸反應(yīng)（玫瑰紅色環(huán)）酸度、溶液的澄清度、 中性或堿性物質(zhì)原料：銀量法制劑：銀量法司可巴比妥鈉銀鹽、銅鹽反應(yīng)（同上）、 烯丙基反應(yīng)（使碘褪

2、色）、 測(cè)定衍生物熔點(diǎn)、Na+反應(yīng)溶液的澄清度、 中性或堿性物質(zhì)原料：溴量法膠囊：溴量法硫噴妥鈉銀鹽、銅鹽反應(yīng)（同上）、硫元素反應(yīng)（堿性下與鉛生成白色J，加熱，產(chǎn)生黑色PbSj ）、測(cè)定衍生物熔點(diǎn)、Na+反應(yīng)紫外法注:（1）銀鹽反應(yīng)和銅鹽反應(yīng)一一為含丙二酰脲結(jié)構(gòu)藥物的反應(yīng)，巴比妥類(lèi)藥物與硝酸銀反應(yīng) 產(chǎn)生白色與硫酸銅-吡啶反應(yīng)，產(chǎn)生紫色（ 區(qū)別：硫噴妥鈉的銅鹽反應(yīng)結(jié)果為綠色）。（2）制備衍生物測(cè)定熔點(diǎn)：是利用巴比妥類(lèi)藥物的鈉鹽易溶于水，而其游離酸難溶于水的 性質(zhì)。在鈉鹽中加酸使巴比妥類(lèi)游離析岀，過(guò)濾、干燥后測(cè)定熔點(diǎn)。（3） 苯巴比妥的銀量法 在碳酸鈉溶液中用硝酸銀滴定，以電位滴定法指示終點(diǎn)。硝酸

3、 銀與苯巴比妥的 摩爾比為1: 1。（4）司可巴比妥鈉的溴量法司可巴比妥鈉分子中含有一個(gè)雙鍵，可與溴（或碘）發(fā)生加成反應(yīng)，1個(gè)雙鍵消耗1分子Br2 （或I2 ），所以滴定劑與被測(cè)物的摩爾比為1:1、巴比妥類(lèi)藥物的紫外性質(zhì)巴比妥類(lèi)藥物具弱酸性，在不同堿性條件下可發(fā)生不同程度的電離，具有不同的紫外吸收特征。在酸性條件下不電離，無(wú)紫外吸收。而含硫巴比妥在酸性、堿性條件下均有紫外吸收, 據(jù)此可以區(qū)別。內(nèi)容第一節(jié)基本結(jié)構(gòu)與特征-NH3 5,巨取代巴比妥2C0S)2-硫代巴比突1 /1品-取代巴比妥2CC-NH代表性藥物：1、 苯巴比妥 (Phenobarbital)2、司可巴比妥鈉 (Secobarbi

4、tal sodium )3、硫噴妥鈉(Thiopental sodium )4、巴比妥、異戊巴比妥、戊巴比妥( barbital ，Amobarbital ， pento barbital )一、弱酸性-與強(qiáng)堿成鹽rJrH N NHonH c o/az1 2RROHON c/ CNOex'>吐 2R;aoil二、水解反應(yīng)與堿液共沸t NH fH叫*zc= 0 4- 51WH CHCOON&+ 2NH；N廠/H三、與重金屬離子反應(yīng)與鉆、銅t 有色J,與銀、汞t白色Jr 廠 co nWr/ cc-nhCO-N-|P、 Vo +h+CO-NH/MuSC>4 二2U*SI四

5、、紫外吸收光譜特征（一）、硫代巴比妥的紫外吸收（二）、5 , 5-取代巴比妥的紫外吸收特征220240 255280nm五、顯微結(jié)晶（一）、藥物本身的晶形1、巴比妥一一長(zhǎng)方形結(jié)晶2、苯巴比妥球形->-> 花瓣?duì)罱Y(jié)晶（二）、反應(yīng)產(chǎn)物的晶形1、巴比妥與銅-吡啶形成十字形紫色結(jié)晶2、苯巴比妥形成淺紫色不規(guī)則或菱形結(jié)晶其他巴比妥類(lèi)與銅-吡啶不形成結(jié)晶，可區(qū)別第二節(jié)鑒別試驗(yàn)、丙二酰脲試驗(yàn)：（一）、巴比妥類(lèi) + Na 2CO TS+過(guò)量AgNO 白色J2+（二）、巴比妥類(lèi)+吡啶溶液+ Cu - 紫色（J）（含硫巴比妥類(lèi)為綠色，可與之區(qū)別）、鈉鹽的鑒別試驗(yàn)：（鈉離子的焰色反應(yīng)）（一）、在無(wú)色火焰

6、中燃燒，呈現(xiàn)黃色火焰。三、取代基試驗(yàn)（一）、苯環(huán)取代基反應(yīng)：1、硝化反應(yīng)2、亞硝酸鈉-硫酸反應(yīng)3、硫酸-甲醛反應(yīng)苯巴比妥+ KNO3+H2SQ 黃色苯巴比妥+ NaNO2+fSO 橙黃色苯巴比妥+甲醛+ H2SO 玫瑰紅色4、硫元素反應(yīng)：、硫噴妥鈉+NaOH+Pb+ 白色J（2）、加熱PbSj（黑色）5、與香草醛反應(yīng)：2戊巴比妥+香草醛0H橇工色（二）、不飽和取代基（烯丙基）反應(yīng)：1、司可巴比妥鈉 + I 2 （ B2）碘（溴）褪色2、或在堿性溶液中與高錳酸鉀反應(yīng)，使后者褪色CHj oNSr2KMnO4(Brj第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查一、苯巴比妥的特殊雜質(zhì)（一）、酸度（二）、溶液的澄清度（三）、中性

7、或堿性物質(zhì)控制酸性雜質(zhì)苯丙二酰脲，利用其酸性較苯巴比妥強(qiáng)，能使甲基橙顯紅色， 規(guī)定一定量供試品溶液加甲基橙后不得顯紅色。利用雜質(zhì)苯巴比妥酸在醇中溶解度小，觀察苯巴比妥乙醇溶液的澄清度。要求溶液澄清。司可巴比妥鈉也作此項(xiàng)檢查，但溶劑為水控制合成副產(chǎn)物或分解產(chǎn)物。利用這類(lèi)雜質(zhì)不溶于氫氧化鈉試液而溶于醚，而苯巴比妥溶于氫氧化鈉試液的性質(zhì)差別，將他們分離提取，揮干乙醚，稱(chēng)重殘?jiān)亓?，確定是否超過(guò)限量。（司可巴比妥鈉也有此檢查）第四節(jié)含量測(cè)定一、銀量法（一）、原理：在碳酸鈉溶液中巴比妥類(lèi)與硝酸銀首先生成可溶性一銀鹽，繼續(xù)滴定, 過(guò)量的銀離子就和巴比妥類(lèi)的一銀鹽形成難溶性二銀鹽沉淀，使溶液變渾濁而指示終點(diǎn)

8、。R嚴(yán) zcxcON34 ASNO 4 N OjR 2C 0N H/COCOON a 44 N jHCOjCONa * A5NO3COhl，CONR1x 嚴(yán)、COr3 coh7（二）、方法的改進(jìn)1、以甲醇替代水-丙酮為溶劑，2、電位法替代目視法指示終點(diǎn)，克服了溫度變化影響和目視法的主觀性?xún)A向（三）、注意事項(xiàng)1、無(wú)水碳酸鈉需新鮮配制，銀電極使用前用硝酸浸洗，再用水洗凈。（四）、應(yīng)用：苯巴比妥、異戊巴比妥等采用該法。二、溴量法（一）、原理：司可巴比妥鈉含有不飽和雙鍵，可與溴定量發(fā)生加成反應(yīng)，中國(guó)藥典采用 剩余溴量法測(cè)定原料和其膠囊的含量。（二） 、方法：KBrQ + 5KBr + HCI f 3B

9、“（標(biāo)準(zhǔn)液 1）（三） 、巴比妥類(lèi)+Br2 （定量過(guò)量）f加成物（四）、Br2 （剩余）+KI （過(guò)量） f I 2（五）、丨2 +2Na2S2C3 （標(biāo)準(zhǔn)液 2）f 2Nal+Na2S4O6（六）、同時(shí)做空白試驗(yàn)（七）、計(jì)算：、ImoIBr相當(dāng)于 M/2司可巴比妥鈉（2）、M=260.27（3）、所以 T=M 樣品/2 X mol / L 標(biāo)準(zhǔn)液 =13.01（V 空白 -V 樣品）X FX T）/（W（mg） X 100%F=C 實(shí)際 /C 理論三、紫外分光光度法（一）、直接紫外分光光度法（注射用硫噴妥鈉（1）、取相當(dāng)于硫噴妥鈉0.25g，用水稀釋至 500ml，再用0.4%氫氧化鈉溶液稀

10、釋至5ug/ml。另取硫噴妥為對(duì)照品，用0.4%氫氧化鈉溶液稀釋至約5ug/ml。分別測(cè)定吸收度，計(jì)算人曰含量、取樣量中硫噴妥鈉的mg數(shù)=（A樣/A對(duì)）X CM 1.091 X 50（3）、1.091=硫噴妥鈉分子量/硫噴妥分子量、50= （500 X 100） /1000（二）、提取分離后紫外分光光度法（苯巴比妥鈉）（1）、酸化：苯巴比妥鈉加水使溶解+ HCl f析岀沉淀（2）、提?。撼恋?氯仿f苯巴比妥，蒸發(fā)至近干f殘?jiān)?）、堿化：殘?jiān)?醇+ pH10溶液f測(cè)定溶液（發(fā)生一級(jí)電離）、測(cè)定：入240nm處測(cè)定吸收度，以苯巴比妥為對(duì)照。四、差示分光光度法（一） 、原理：利用被測(cè)物在兩種不同溶

11、液中吸收光譜發(fā)生了特征性變化，而共存干擾物在該兩種溶液中未引起光譜變化，測(cè)定兩種溶液的吸收度差值（ A值），根據(jù)A與被測(cè)物濃度C的線性關(guān)系進(jìn)行定量測(cè)定。（二）、特點(diǎn)：簡(jiǎn)便、直觀，具備一般分光光度法直接讀數(shù)的優(yōu)點(diǎn)，無(wú)需事先分離，又能 消除干擾；提供一個(gè)近似理想的參比溶液。（三）、方法：（1）、取供試品一定量，做成溶液，分成2等分（2）、1份+酸f 一定體積（測(cè)定）f A測(cè)（3）、另1份+堿 f 同樣體積 （參比）f A參（4）、A 測(cè)A 參= A 樣（5）、干擾物在兩種溶液中吸收光譜無(wú)變化，即A雜=0,（6）、 A樣只與樣品濃度C呈線性關(guān)系。（7）、另取對(duì)照品同法操作，得A對(duì)，按標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法計(jì)算含

12、量。（四）、巴比妥類(lèi)藥物的差示光譜容容窖 y 71-71-71 1013性 phph酸k 240run無(wú) h max220240260280nm1、 A240= A pH10 - 酸性，2、 A260=A pH13- A pH103、方法：（1）、樣品、對(duì)照-> 同樣操作，/ A樣、/ A標(biāo)（2）、計(jì)算：（/ A樣/ / A標(biāo)）X C標(biāo)=C樣（3）、注意：不同pH溶液中被測(cè)物的濃度必須相等4、作業(yè):（1）、根據(jù)巴比妥類(lèi)藥物在不同pH條件下的光譜圖，設(shè)計(jì)差示光譜的幾種組合。（2）、差示光譜的目的？應(yīng)用范圍？（3）、舉例見(jiàn)教材：復(fù)方苯巴比妥散、血清中巴比妥類(lèi)藥物的測(cè)定五、酸堿滴定法（一）、醇

13、-水混合溶劑中，用氫氧化鈉溶液滴定，以麝香草酚酞為指示劑 （增加溶解度，防止滴定過(guò)程中產(chǎn)生的弱酸鹽水解而影響終點(diǎn)觀察）（二）、在膠束水溶液中，用氫氧化鈉溶液滴定，以麝香草酚酞為指示劑（在表面活性劑的膠束水溶液中巴比妥類(lèi)藥物酸性增強(qiáng)，使終點(diǎn)明顯）（三） 、非水溶液滴定：在非水溶劑“二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿等”中，用甲醇鈉-甲 醇溶液等滴定（非水酸量法）（四）、非水堿量法一一在酸性溶劑中用高氯酸滴定劑滴定弱堿性藥物。1、常用溶劑一一冰醋酸；2、 滴定劑高氯酸滴定液；3、 指示劑結(jié)晶紫；（五）、非水酸量法一一在堿性溶劑中用甲醇鈉滴定劑滴定弱酸性藥物。1、常用溶劑：乙二胺、二甲基甲酰胺；2、滴定劑：甲

14、醇鈉滴定液。（六）、非水堿量法1、原理：BH+ A +HCIO4T BH+ CIO4+HA2、 滴定劑：HCI04-冰HAc溶液3、非水溶劑：根據(jù)被測(cè)物的堿性強(qiáng)弱，常用的非水溶劑有冰醋酸、醋酐、兩者混合物。4、溫度影響：(1) 、標(biāo)準(zhǔn)液須注明標(biāo)定時(shí)溫度，(2) 、標(biāo)定與測(cè)定溫度不一致，須校正(溫差 10C)或重新標(biāo)定(溫差10 °C)(3) 、 N測(cè)=N 標(biāo)/1+0.0011(t 測(cè)-t 標(biāo))5、指示劑終點(diǎn)顏色一一由電位法確定V ( ml)E (mv)01507.002367.102477.20;2637.252787.303057.353807.4040821 體積 (ml)電位計(jì) 讀數(shù)E(y)A EAVA EAVv ( 1DAV)V20刁007.1