生物制品生產(chǎn)檢定用動物細(xì)胞基質(zhì)制備及檢定規(guī)程

1、編輯ppt生物制品生產(chǎn)檢定用動物細(xì)胞基質(zhì)制備及檢定規(guī)程（中國藥典2015版） 質(zhì)量部 編輯ppt生物制品生產(chǎn)檢定用動物細(xì)胞基質(zhì)制備及檢生物制品生產(chǎn)檢定用動物細(xì)胞基質(zhì)制備及檢定規(guī)程定規(guī)程編輯ppt細(xì)胞基質(zhì)的概念 生產(chǎn)非重組制品所用的細(xì)胞基質(zhì)，系指來源于未經(jīng)修飾的用于制備其主細(xì)胞庫的細(xì)胞系/株和原代細(xì)胞。生產(chǎn)重組制品的細(xì)胞基質(zhì)，系指含所需序列的、從單個前體細(xì)胞克隆的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。生產(chǎn)雜交瘤制品的細(xì)胞基質(zhì)，系指通過親本骨髓瘤細(xì)胞系與另一親本細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞系。編輯ppt細(xì)胞系/株歷史資料具體化2010版要求如采用已建株的細(xì)胞系如采用已建株的細(xì)胞系/株，應(yīng)從具有一定資質(zhì)的株，應(yīng)從具有一定資質(zhì)的細(xì)胞保藏

2、中心獲取細(xì)胞，且應(yīng)提供該細(xì)胞在保藏細(xì)胞保藏中心獲取細(xì)胞，且應(yīng)提供該細(xì)胞在保藏中心的詳細(xì)傳代過程，包括培養(yǎng)過程中所使用的中心的詳細(xì)傳代過程，包括培養(yǎng)過程中所使用的原材料的相關(guān)信息，具有細(xì)胞來源的證明資料原材料的相關(guān)信息，具有細(xì)胞來源的證明資料 。2015版要求如采用已建株的細(xì)胞系/株，應(yīng)具有細(xì)胞來源的證明資料。應(yīng)從能夠提供初始細(xì)胞歷史及其溯源性書面證明材料的機(jī)構(gòu)獲得，且應(yīng)提供該細(xì)胞在該機(jī)構(gòu)的詳細(xì)傳代記錄，包括培養(yǎng)過程中所使用的原材料的相關(guān)信息，如種類、來源、批號、生產(chǎn)日期及有效期、制備或使用方法、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢測結(jié)果等。編輯ppt細(xì)胞培養(yǎng)操作要求（新增）u 細(xì)胞來源的供體u 原材料的選擇u 細(xì)胞培

3、養(yǎng)的體系u 細(xì)胞收獲及傳代體外培養(yǎng)細(xì)胞齡的計算 二倍體細(xì)胞齡以細(xì)胞群體倍增水平計算，也可以每個培養(yǎng)容器細(xì)胞群體細(xì)胞數(shù)為基礎(chǔ)，每增加一倍作為一世代粗略估算，即1瓶細(xì)胞傳2瓶(1:2分種率)，再長滿瓶為1世代；1瓶傳4瓶(1:4分鐘率)為2世代；1瓶傳8瓶(1:8分種率)則為3世代。生產(chǎn)用細(xì)胞齡限制在細(xì)胞壽命期限的前2/3內(nèi)。連續(xù)傳代細(xì)胞系的細(xì)胞齡可以群體倍增水平計算，也可以按照固定的傳代比率進(jìn)行傳代，每傳一次為一代。（傳代細(xì)胞系則以一定稀釋倍數(shù)進(jìn)行傳代）u 細(xì)胞系的建立u 細(xì)胞凍存u 人員編輯ppt細(xì)胞庫管理2010版細(xì)胞庫為三級管理，即原始細(xì)胞庫、主細(xì)胞庫及工作細(xì)胞庫。如為引進(jìn)的細(xì)胞，可采用

4、主細(xì)胞庫和工作細(xì)胞庫組成的二級細(xì)胞庫管理。在某些特殊情況下，也可使用MCB一級庫，但須得到國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門的批準(zhǔn)。2015版三級細(xì)胞路管理包括細(xì)胞種子、主細(xì)胞庫（MCB）及工作細(xì)胞庫(WCB)。在某些特殊情況下，也可以采取細(xì)胞種子及MCB二級管理，但須得到國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門的批準(zhǔn)。編輯ppt細(xì)胞活力要求的變化 為保證細(xì)胞凍存后仍具有良好的活力，凍存前的細(xì)胞活力應(yīng)不低于90%。 凍存后應(yīng)取一定量的可代表凍存全過程的凍存管復(fù)蘇細(xì)胞，復(fù)蘇后細(xì)胞的活力應(yīng)不低于80%。編輯ppt細(xì)胞檢定項(xiàng)目要求細(xì)胞檢定項(xiàng)目要求編輯ppt生物制品生產(chǎn)檢定用動物細(xì)胞基質(zhì)制備及檢定規(guī)程一、對生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)總的要求二

5、、連續(xù)傳代細(xì)胞系的特殊要求三、人二倍細(xì)胞株的特殊要求四、重組細(xì)胞的特殊要求五、原代細(xì)胞的要求六、檢定用細(xì)胞的要求附錄1：逆轉(zhuǎn)錄酶活性檢查法附錄2：成瘤性檢查法附錄3：致瘤性檢查法編輯ppt一、對生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)總的要求 （一）細(xì)胞系/株歷史資料 （二）細(xì)胞培養(yǎng)操作要求 （三）細(xì)胞庫 1、細(xì)胞庫的建立 2、細(xì)胞庫的管理 （四）細(xì)胞檢定 （五）生產(chǎn)細(xì)胞培養(yǎng)編輯ppt（三）細(xì)胞庫 1、細(xì)胞庫的建立 三細(xì)胞庫管理包括細(xì)胞種子、主細(xì)胞庫（MCB）及工作細(xì)胞庫（WCB）。在某種情況下，也可采用細(xì)胞種子及MCB二級管理，但須得到國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門的批準(zhǔn)。 2、細(xì)胞庫的管理 非生產(chǎn)用細(xì)胞應(yīng)與生產(chǎn)用細(xì)胞嚴(yán)格分

6、開存放。 凍存前的細(xì)胞活力應(yīng)不低于90%，凍存后應(yīng)取一定量的可代表凍存全過程的凍存管復(fù)蘇細(xì)胞，復(fù)蘇后細(xì)胞的活力應(yīng)不低于80%。編輯ppt（四）細(xì)胞檢定 細(xì)胞檢定主要包括以下幾個方面：細(xì)胞鑒別、細(xì)菌、真菌檢查、分支桿菌檢查、支原體檢查、外源因子和內(nèi)源因子的檢查、成瘤性/致瘤性檢查等。必要時還須進(jìn)行細(xì)胞生長特性、細(xì)胞染色體檢查、細(xì)胞均一性及穩(wěn)定性檢查。 細(xì)胞庫建立后應(yīng)至少對MCB細(xì)胞及生產(chǎn)終末細(xì)胞（EOPC）進(jìn)行一次全面檢定。編輯ppt細(xì)胞檢定項(xiàng)目要求細(xì)胞檢定項(xiàng)目要求編輯ppt二、連續(xù)傳代細(xì)胞系的特殊要求 1、用于生產(chǎn)的細(xì)胞代次 用于生產(chǎn)的傳代細(xì)胞系，代次應(yīng)有一定限制。用于生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞最高限

7、定代次須經(jīng)批準(zhǔn)。 2、生產(chǎn)過程中的細(xì)胞檢查（同前）編輯ppt三、人二倍細(xì)胞株的特殊要求 1、染色體檢查 2、無菌檢查 3、支原體檢查 4、病毒檢查 5、成瘤性檢查 6、生產(chǎn)過程中的細(xì)胞檢查（1）染色體檢查（2）細(xì)胞鑒別實(shí)驗(yàn)（3）無菌檢查（4）支原體檢查（5）對照細(xì)胞外源病毒因子檢測編輯ppt四、重組細(xì)胞的特殊要求 1、細(xì)胞基質(zhì)的穩(wěn)定性 生產(chǎn)者須具有該細(xì)胞用于生產(chǎn)的目的基因的穩(wěn)定性資料，穩(wěn)定性檢測的項(xiàng)目及方法依據(jù)產(chǎn)品的特性確定，對于細(xì)胞基質(zhì)來說，穩(wěn)定性的分析是保證MCB/WCB與EOPC之間的一致性，包括：重組細(xì)胞的遺傳穩(wěn)定性（如插入基因拷貝數(shù)、插入染色體位點(diǎn)、插入基因的序列等）、目的基因表達(dá)穩(wěn)

8、定性、目的產(chǎn)品持續(xù)生產(chǎn)的穩(wěn)定性，以及一定條件下保存時細(xì)胞生產(chǎn)目的產(chǎn)品能力的穩(wěn)定性等資料。 2、細(xì)胞鑒別試驗(yàn)編輯ppt五、原代細(xì)胞的要求 （一）動物組織來源和其他材料 （二）原代細(xì)胞培養(yǎng)物的檢查1、細(xì)胞形態(tài)檢查2、特定病毒檢查3、對照細(xì)胞檢查編輯ppt六、檢定用細(xì)胞的要求 （一）細(xì)胞資料1、檢定用細(xì)胞應(yīng)具有明確的合法來源，及相關(guān)的來源證明資料。 2、如使用傳代細(xì)胞系/株，應(yīng)建立細(xì)胞庫體系，即主細(xì)胞庫及工作細(xì)胞庫，如細(xì)胞使用量較少，可建立單一細(xì)胞庫。各制品應(yīng)根據(jù)其特性以及保證檢測結(jié)果的可靠性基礎(chǔ)上，在該細(xì)胞允許的最高限定代次內(nèi)，規(guī)定相應(yīng)檢定用細(xì)胞的代次范圍（應(yīng)在確定細(xì)胞代次的1代范圍內(nèi)）。檢定時從工作細(xì)胞庫復(fù)蘇細(xì)胞后，不能再回凍。3、應(yīng)詳細(xì)記錄檢定用細(xì)胞建庫的過程，包括細(xì)胞培養(yǎng)所用原材料的來源、批號，細(xì)胞生長液的配制方法、使用濃度等，記錄細(xì)胞的傳代及凍存過程