抗氧化活性測(cè)定方法的比較

1、抗氧化活性測(cè)定方法的比較人體衰老和多種疾病均與自由基有關(guān)，尋找天然抗氧化劑具有重要意義。黃酮、多糖、多肽、酚類等生物活性成分均具有抗氧化活性，抗氧化活性的篩選方法可分為體外和體內(nèi) 2 種測(cè)試體系。體外：抗氧化活性可以用在特定條件下，樣品對(duì)檢測(cè)體系中自由基的清除能力、抗油脂過氧化能力及樣品的還原能力、總抗氧化能力等來衡量和表征。常用的方法有羥基自由基（·OH ）清除能力法、 1,1-二苯基苦基苯肼 （ DPPH 法）、 2,2- 聯(lián)氮基 - 雙 -(3- 乙基苯并噻唑啉 -6- 磺酸 ) 二氨鹽（ ABTS法）、超氧陰離子自由基法（O2- ·）、鄰苯三酚自氧化法、-胡蘿卜素漂

2、白法、硫代巴比妥酸法、鐵離子還原能力測(cè)定（FRAP 法）、總酚測(cè)定法、 ORAC 法等方法。體內(nèi)：主要有DNA 氧化損傷法、蛋白質(zhì)氧化損傷法、線粒體氧化損傷法。其中 DPPH 法和 ABTS 法操作較簡(jiǎn)單便捷，不需要特殊的檢測(cè)設(shè)備，只在需固定時(shí)間下記下其紫外分光光度測(cè)量值后計(jì)算其自由基清除率，缺點(diǎn)是不同物質(zhì)具有組成和結(jié)構(gòu)的差異，與DPPH ·、 ABTS+ ·的反應(yīng)速率不同，反應(yīng)到達(dá)平衡的時(shí)間不同，將反應(yīng)時(shí)間固定在某一值時(shí)，可能對(duì)抗氧化劑的抗氧化性評(píng)價(jià)帶來錯(cuò)誤的判斷，且DPPH 自由基會(huì)和其他自由基發(fā)生反應(yīng)。鄰苯三酚自氧化法缺點(diǎn)是檢測(cè)波長(zhǎng)、緩沖液的組成及值、鄰苯三酚濃度等關(guān)

3、鍵測(cè)定條件存在供參考著較大差異。-胡蘿卜素漂白法的缺點(diǎn)是-胡蘿卜素本身有抗氧化活性，對(duì)樣品活性的測(cè)定結(jié)果有影響。FRAP 法主要用于食品業(yè)，優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單易操作、可以重復(fù)，缺點(diǎn)是無法測(cè)定硫醇化合物的還原能力。ORAC 法是國(guó)際上通用的評(píng)價(jià)食品氧化的標(biāo)準(zhǔn)方法，缺點(diǎn)是儀器成分較復(fù)雜，檢測(cè)成本較高。目前普遍使用的體外抗氧化活性指標(biāo)一般都采用分光光度法，使用分光光度計(jì)測(cè)量各種顏色成分含量的變化。分光光度法操作較簡(jiǎn)單、便捷，不需要特殊的檢測(cè)設(shè)備，只在需固定時(shí)間下記下其紫外 - 可見分光光度測(cè)量值后計(jì)算其活性大小，具有成本低、效率高、樣品量少等優(yōu)點(diǎn)。分光光度法缺點(diǎn)是會(huì)受到樣本自身顏色和渾濁度的影響和限制，顏色深的樣品測(cè)得的數(shù)據(jù)誤差大，甚至得到錯(cuò)誤的結(jié)果；不同物質(zhì)組成和結(jié)構(gòu)存在差異，與各種自由基的反應(yīng)速率不同，反應(yīng)到達(dá)平衡的時(shí)間不同，將反應(yīng)時(shí)間固定在某一值時(shí)，可能對(duì)抗氧化劑的抗氧化性評(píng)價(jià) 帶來錯(cuò)誤的判斷。外界環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也存在一定程度的影響，有些抗氧化活性實(shí)驗(yàn)在冬天低溫時(shí)不易成功，測(cè)得的數(shù)據(jù)往往沒有規(guī)律。我覺得在測(cè)定樣品的抗氧化活性時(shí)，各種方法都有自己的優(yōu)缺點(diǎn)，要根據(jù)需測(cè)物質(zhì)來決定用什么方法，比如 DPPH 法的自由基選擇性強(qiáng)，不和只有一個(gè)羥基的芳香酸、無羥基的類黃酮反應(yīng)，這類物質(zhì)需用其他方法測(cè)定。若對(duì)檢測(cè)結(jié)果供參考要求高的可用ORAC 法，若是做兩個(gè)活性物質(zhì)的抗氧化活性的對(duì)比可用多種方法