實驗一藥理學(xué)實驗基本技能

1、實驗一 藥理學(xué)實驗的基本技能一、實驗動物的基本技能和實驗技術(shù)基礎(chǔ)1. 實驗動物的標(biāo)記大、小鼠和白色家兔的標(biāo)記常用35黃色苦味酸溶液涂于皮毛上標(biāo)號。常用的方法：1號-左前腿2號-左腰部3號-左后腿4號-頭部5號-正中6號-尾根部7號-右前腿8號-右腰部9號-右后腿10號- 不標(biāo)記2. 實驗動物的捉持（大、小鼠） 1） 小鼠的捉持用右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠籠蓋）上面，向后輕拉鼠尾；用左手拇指和食指捏住其兩耳頸背部皮膚，將小鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然后以無名指和小指夾住鼠尾或小鼠的左后肢。 2） 2） 大鼠的捉持捉持和固定方法基本同小鼠，無經(jīng)驗者可戴上防護(hù)手套，并應(yīng)動作輕柔。用右手捉住鼠尾

2、，放在鼠籠蓋上，向后輕拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指壓住鼠的頭頂， 拇指和無名指分別從鼠的兩腋下插入，將鼠的兩前肢卡?。换蜃Ьo鼠后頸及后背皮膚即可。圖 1 小白鼠捉持法3、實驗動物的給藥方法（大、小鼠）（ 1 ）小鼠的給藥方法灌胃（ ig ） ：將小鼠固定后，使頸部拉直，右手持裝有灌胃針頭的注射器，自口角插入口腔， 壓其頭部，使口腔與食道成一直線，沿上腭壁向鼠口腔的后下方輕輕插入食道。如遇阻力， 可將針頭抽出再插，以免刺破食管或誤入氣管。一般給藥量為0.1 0.3ml/10g （體重） 。2、實驗報告的寫作3 小白鼠腹腔注射法2 小白鼠灌胃法實驗皮下注射（H 或 sc） ：常在背部皮下。輕

3、輕捏起背部皮膚，將注射針頭刺入皮下，稍稍擺動針頭，若容易擺動則表明針尖位于皮下。然后注入藥液。一般給藥量為0.1 0.20ml/10g4 小白鼠皮下注射法腹腔注射（ip ） ：左手固定動物，右手持注射器，從下腹部外側(cè)，呈45度角刺入腹腔，進(jìn)針約3 5mm，一般給藥量為0.1 0.3ml/10g （體重） 。肌內(nèi)注射（im） ：多注射于后肢股部肌肉，一般每側(cè)不超過0.1ml 。尾靜脈注射（iv ） ：將小鼠置于固定筒內(nèi)，使尾部露在外面，用7075的乙醇棉球擦尾部，或?qū)⑹笪步?5 59oC 溫水中，待尾部左右側(cè)靜脈擴(kuò)張后，左手拉尾，右手進(jìn)針。一般給藥量為0.1 0.2ml/10g（ 2）大鼠的給

4、藥方法均同小鼠。一般情況下，灌胃劑量為1 2ml/100g，皮下注射、尾靜脈注射<1ml /只，腹腔注射為1.5ml /只，肌內(nèi)注射為0.1 0.2ml/ 只。此外大鼠尚有舌下靜脈給藥的方法。圖 5 家兔耳部血管分布圖 6 家兔耳靜脈注射法（ 1 ）藥物濃度的表示方法溶液的質(zhì)量（g）百分濃度（）=× 100%溶液的體積（ml）（2）實驗動物給藥劑量一般按mg/kg（ 或g/kg） 計算。 為了方便，大鼠和豚鼠可按每100g計算，小鼠可按每10g 計算。給藥劑量=藥物濃度×給藥體積（ 3）給藥容量的計算：從已知藥的濃度和已知給藥劑量算出相當(dāng)于每1kg 體重應(yīng)給藥的毫升數(shù)

5、（ ml） 。例：小鼠體重22g，腹腔注射鹽酸嗎啡10mg/kg, 藥物濃度為0.1%, 應(yīng)注射多少毫升?藥物濃度：0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml給藥劑量：10mg/kg=10ml/kg小鼠體重：22g=0.022kg10ml/kg × 0.022kg=0.22ml或換算成ml/10g 來計算較為方便：10ml/kg=0.1ml/10g 。 這樣再計算其他小鼠的給藥量就很方便。5、實驗動物的處死方法（ 1 ） 頸椎脫臼法此法常用于小鼠。用左手拇指、食指或鑷子用力壓住小鼠的后頭部，同時用右手抓住鼠尾用力向后上方牽拉，使之頸椎脫臼，鼠立即死亡。（ 2

6、） 空氣栓塞法此法常用于家兔的處死。用注射器將空氣快速注入靜脈，可使動物立即死亡。（ 3）擊打法適用于較小的動物，如家兔、大鼠和小鼠等。提起動物的尾部，用力敲擊動物頭部，或用要木錘打擊頭部，致使動物死亡。（ 4）斷頭法此法適用于蛙、蟾蜍、小鼠和大鼠。用剪刀將動物頭部剪斷，由于脊髓婁離且大量出血，動物很快死亡。二、實驗記錄的內(nèi)容和實驗報告的寫作1、 實驗記錄實驗記錄是將實驗內(nèi)容如實地記錄下來，長期保存?zhèn)溆?。其基本原則是真實、及時、準(zhǔn)確、完整，實驗過程中應(yīng)認(rèn)真做好實驗記錄。內(nèi)容一般應(yīng)包括：（ 1 ）時間、天氣、溫度；（ 2）實驗標(biāo)本：動物的種類、體重、標(biāo)記和標(biāo)號及如何分組等。（ 3）實驗藥物：藥物

7、的來源、批號、劑型、濃度、劑量及給藥途徑。（ 4）實驗進(jìn)程、步驟和方法的詳細(xì)記錄。（ 5）觀測指標(biāo)的變化和原始的描記圖紙。實驗報告要實事求事地反映實驗的基本過程，并要對實際所得結(jié)果進(jìn)行整理、計算、 統(tǒng)計學(xué)處理，然后進(jìn)行科學(xué)地分析討論，進(jìn)一步闡明實驗的目的和意義。一般包括以下內(nèi)容： 實驗?zāi)康?實驗材料包括儀器、藥品和動物。要盡可能詳細(xì)、具體、明確。 實驗方法可簡明扼要地敘述，但關(guān)鍵環(huán)節(jié)或步驟必須寫清楚。 實驗結(jié)果應(yīng)根據(jù)實驗獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，并可對一個教學(xué)實驗小組或全實驗室的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、歸納、 分析和對比，盡量總結(jié)出圖表。尤其有觀察時效關(guān)系的，描出時效曲線，一目了然。數(shù)據(jù)須進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，選擇

8、的統(tǒng)計學(xué)方法要恰如，檢驗效率要高。 討論 和 結(jié)論 討論與結(jié)論是報告的核心，應(yīng)包括對實驗結(jié)果的分析、思考題的探討、實驗、實驗方法及實驗中出現(xiàn)異?，F(xiàn)象的分析、認(rèn)識、體會和建議等。實驗二不同給藥途徑對藥物作用的影響【目的和原理】觀察給藥途徑不同，動物對藥物反應(yīng)有何不同。【實驗動物】小白鼠，體重18-24g，雌雄兼用【實驗器材和藥品】小鼠籠、天平、注射器（1ml ） 、大燒杯、小鼠灌胃器、10%硫酸鎂、0.5%戊巴比妥鈉【實驗步驟和觀察項目】1 硫酸鎂不同給藥途徑對藥物作用的影響取體重相近的小白鼠2只，編號并稱重。1號小白鼠腹腔注射10%硫酸鎂溶液0.3ml， 2號小白鼠經(jīng)口灌胃10%硫酸鎂0.6m

9、l。觀察并比較兩鼠有何不同現(xiàn)象發(fā)生，為什么？鼠號給藥途徑劑量 （ ml/ 只）呼吸肌張力大便1號2號2戊巴比妥鈉不同給藥途徑對藥物作用的影響取體重相近的小白鼠3只， 編號并稱重。觀察小鼠正?；顒忧闆r及翻正反射，然后用 0.5%戊巴比妥鈉，分別從不同途徑（灌胃、皮下注射、腹腔注射）給藥0.1ml/10g，觀察小鼠反應(yīng)，記錄小白鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥鈉的時間、翻正反射消失及恢復(fù)時間，計算睡眠潛伏期和睡眠持續(xù)時間。鼠號給藥途徑劑量（ml/10g）睡眠潛伏期（min）睡眠時間（min）1號2號3號同一藥物、同等劑量以不同途徑給藥將會出現(xiàn)哪些不同反應(yīng)？實驗三急性毒性（LD50 ）的測定【目的】通過實

10、驗學(xué)習(xí)測定藥物L(fēng)D50的方法、步驟及計算過程，觀察受試藥品一次給予動物后所產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)和死亡情況?！驹怼克幬锝o藥劑量與動物死亡率間呈正態(tài)分布，以對數(shù)劑量為橫坐標(biāo)、死亡率為縱坐標(biāo)作圖，可得到一對稱S 型曲線，其兩端較平坦，中間較陡，說明兩端處劑量稍有變化時死亡率的改變不易表現(xiàn)出來，在50%死亡率處斜率最大，該處劑量稍有變動時，其死亡率變動最明顯，即最靈敏，在技術(shù)上也最容易測得準(zhǔn)確，所以人們常選用LD50 值作為反映藥物的指標(biāo)。 若將死亡率換算成機(jī)率單位，則對數(shù)劑量與機(jī)率單位呈直線關(guān)系，用數(shù)學(xué)方法可擬合其回歸方程式，可精確地計算LD50及引起任何死亡率的劑量及相關(guān)數(shù)據(jù)。【器材和藥品】注射器

11、（1ml） 、天平、小鼠籠、苦味酸；鹽酸普魯卡因?！緞游铩?8 22g 健康小鼠50只 （正式試驗），雌雄各半（雌鼠應(yīng)無孕），實驗前禁食12h，不禁水?！痉椒ā? .預(yù)試驗?zāi)康氖菍ふ乙?%和 100%動物死亡的劑量范圍，以便正式實驗時確定各組劑量。一般是取小鼠9 12只，分3 4組，選擇組距較大的一系列劑量腹腔注射給藥，觀察出現(xiàn)的癥狀并記錄死亡數(shù)，找出引起0%及 100%死亡率，至少應(yīng)找出引起20% 80%死亡率的劑量范圍，以保證量-效曲線跨越足夠的范圍。普魯卡因小鼠腹腔注射（ip）引起0%和 100%動物死亡的劑量范圍的參考值為：最小劑量（Dmin ） 121.3mg/kg，最大劑量（Dm

12、ax）290mg/kg。2 .劑量計算及藥液配制（1） 劑量計算根據(jù)預(yù)試結(jié)果找出Dmax 及 Dmin ，設(shè)正式實驗的劑量組數(shù)為n，劑量公比為r，則各組劑量為Dmax · rk-1 ， k 為第幾組，一般選用4 5組動物，r 為 0.6 0.85為宜。例 已知普魯卡因Dmin=121.3mg/kg ， Dmax=290mg/kg當(dāng) n=6時，r=0.84, 各組劑量為：1. 290mg/kg2. 290 mg/kg×0.84 = 243.6mg/kg3. 290 mg/kg×0.842= 204.6mg/kg4. 290 mg/kg×0.843= 171

13、.9mg/kg5. 290 mg/kg ×0.844= 144.4mg/kg6. 290 mg/kg ×0.845= 121.3mg/kg( 2)藥液配制藥源充足時的配藥方法最高濃度藥液(母液)的配制小鼠腹腔注射體積為0.2ml/10g= 20ml/kg ，每組藥液量為4ml 左右，為留有余地，各組動物所需藥液體積定為6ml。求出所需母液體積(V)及母液所需藥量(M)V= 各組動物所需藥液體積/ (1-r)= 6 / (1-0.84)=37.5mlM = V Dmax/(20ml/kg)=37.5 (290/kg) /(20ml/kg)=543.75mg各劑量組藥液按下法稀

14、釋：543.75mg+生理鹽水至37.5ml，混勻 第一組取6ml31.5ml+生理鹽水6ml，混勻 第二組取6ml31.5ml+生理鹽水6ml，混勻第三組取6ml31.5ml+生理鹽水6ml，混勻 第四組取6ml31.5ml+生量鹽水6ml，混勻 第五組取6ml31.5ml+生理鹽水6ml，混勻，為第六組藥液藥源緊張時的配藥法各組所需母液的體積(ml)為：第一組 6第二組 6*r第三組6*r 2第四組6*r 3第五組6*r4第六組6*r5母液總體積(V)=6 (1+ r+ r2+ r3+ r4+ r5)總藥量 (M)= 母液總體積Dmax/( 20ml/kg )計算出 V、 M 后，取藥量M

15、，用生理鹽水稀釋至Vml，用移液管精密吸取各組所需的母液量，加生理鹽水稀釋至6ml ，即為各組試驗藥液。3動物分組：將小鼠雌、雄分開。分別稱重，同一重量段(如18.0 18.9g)小鼠放入一個籠內(nèi)，標(biāo)記小鼠。雌、雄小鼠分別按重量順序分層隨機(jī)分為6組，使不同性別和體重的小鼠能均勻分配于各組，每組10只。4給藥：各組動物分別腹腔注射相應(yīng)濃度的藥液0.2ml/10g，立即詳細(xì)觀察，記錄動物反應(yīng)情況、死亡時間和數(shù)目。在24h 內(nèi)作多次觀察，以后每天觀察1次以上，連續(xù)觀察714天。按 Bliss 法及其它方法計算LD50 和 95%可信限（由于 Bliss 法計算復(fù)雜，可用相關(guān)的軟件進(jìn)行處理）?！窘Y(jié)果】

16、記錄于表T1-1 。組別劑量 （ mg/kg）對數(shù)劑量（ X）動物 數(shù)死亡動物 數(shù)死亡率（ %）幾率單位（ Y）LD 50及 95% 置 信限123456（1）隨機(jī)性： 實驗中能控制的因素盡量使之均衡化，難以控制的因素也應(yīng)力求嚴(yán)格隨機(jī)化。分組時應(yīng)先將不同性別分開，再將不同體重分開，然后隨機(jī)分配，此法稱為分層隨機(jī)分組法。（ 2）劑量按幾何級數(shù)排列，轉(zhuǎn)換為對數(shù)后，劑間為等距，便于計算結(jié)果，估計誤差。相鄰高低劑量之比一般為1:0.6 1:0.85，劑距小，結(jié)果較精確，但過小易出現(xiàn)反應(yīng)率顛倒的情況。劑距的大小也與給藥途徑有關(guān)，靜脈給藥時，劑距可偏小，灌胃給藥時可適當(dāng)偏大。（ 3）藥物及給藥途徑應(yīng)以靜脈

17、注射、腹腔注射和灌胃給藥為主，選取的途徑必須包括推薦臨床給藥途徑。（ 4） LD50 受試驗中多種因素的影響，如動物的品系、性別、年齡、饑飽以及環(huán)境因素中室溫、濕度、光照、時辰（上、下午）等。當(dāng)進(jìn)行兩藥的毒性比較時，應(yīng)盡可能在相同條件下進(jìn)行，以減少抽樣誤差。（ 5）在試驗過程中應(yīng)詳細(xì)記動物的中毒癥狀及可能致死原因，必要時解剖死亡動物肉眼觀察，如發(fā)現(xiàn)有組織病變時，可進(jìn)行組織學(xué)檢查，通常動物死亡多出現(xiàn)在給藥后1 2日內(nèi)，但全部試驗應(yīng)觀察7日以上，如遇有遲發(fā)性或進(jìn)行性中毒反應(yīng)時，需根據(jù)實際情況延長觀察時間。 若發(fā)現(xiàn)中毒反應(yīng)和死亡率對不同動物性別有明顯差別，則應(yīng)選擇比較敏感的性別進(jìn)行試驗。（ 6）當(dāng)藥

18、物毒性小，以最大濃度和最大體積給藥后仍測不出致死毒性時，可測定最大耐受量： 即用臨床試驗的給藥途徑，以動物能耐受的最高濃度、最大容積的劑量1次或1日內(nèi)連續(xù) 2 3次給予動物（小白鼠至少20只，雌雄各半），連續(xù)觀察7天，詳細(xì)記錄動物反應(yīng)情況，以不產(chǎn)生死亡的最大劑量為最大耐受量?！?注意事項】1 .劑量要準(zhǔn)確，時間掌握好；2 .給藥后應(yīng)保持室內(nèi)安靜，避免刺激實驗動物。【 討論 】什么是LD50 ，測量的LD50目的和意義是什么？實驗四 巴比妥鈉的抗驚厥作用【實驗?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)動物驚厥模型的復(fù)制方法；觀察大劑量尼可剎米的中毒反應(yīng)；掌握苯巴比妥鈉的抗驚厥作用?！緦嶒炘怼磕峥蓜x米(nikethamide)

19、 為常用的呼吸中樞興奮藥。主要作用是直接興奮延腦呼吸中樞，對大腦皮層、血管運動中樞和脊髓也有興奮作用。過大劑量可引起驚厥，繼而發(fā)生中樞抑制而死亡。苯巴比妥鈉(phenobarbital sodium)是一種普遍性中樞抑制藥，具有良好的抗驚厥作用?！緦嶒瀸ο蟆啃“资?，體重18 22g，雌雄不拘。【實驗藥品】5%尼可剎米，0.8%苯巴比妥鈉，生理鹽水【實驗器材】小動物電子秤，小鼠鼠籠，lml 注射器3支【實驗方法】1 .取體重相近的小白鼠4只，稱重，編號，隨機(jī)分組，分為實驗組和對照組。2 .實驗組小鼠腹腔注射0.8苯巴比妥鈉80mg/kg；對照組腹腔注射等體積生理鹽水。3 .15min 后實驗組和

20、對照組分別腹腔注射5%尼可剎米750mg/kg，連續(xù)觀察20min，詳細(xì)記錄兩組小鼠的反應(yīng)情況?！緦嶒灲Y(jié)果】(實驗室結(jié)果匯總)以出現(xiàn)陣發(fā)性抽搐視為驚厥發(fā)生的特征指標(biāo)。詳細(xì)記錄兩組動物各個體撞籠出現(xiàn)時間、驚厥出現(xiàn)時間和死亡時間。給藥20min 后，清點兩組的驚厥動物數(shù)和死亡動物數(shù)，將實驗結(jié)果填入下表，并計算驚厥百分率和死亡百分率。動物總數(shù)驚厥動物數(shù)驚厥百分率死亡動物數(shù)死亡百分率對照組實驗組【注意事項】1 .注意觀察小鼠給藥后的反應(yīng)，如出現(xiàn)豎尾、洗臉、猛烈地奔跑、撞籠、跳躍等反應(yīng)即為驚厥前兆。2 .腹腔注射部位要準(zhǔn)確，否則會影響實驗結(jié)果。【思考題】簡述苯巴比妥鈉的藥理作用及臨床應(yīng)用。實驗五 藥物的

21、相互作用【 實驗?zāi)康摹坑^察藥物的協(xié)同與拮抗作用【 實驗材料】1. 動物：家兔。2. 藥物：5%MgS4O溶液，5%CaCl2溶液3. 器材：磅秤、5ml 注射器【方法與步驟】：取家兔 1 只稱重，觀察其正常活動，然后由耳緣靜脈緩慢注射（ iv ） MgSO4 2ml/kg 藥后注意觀察所發(fā)生的癥狀，當(dāng)出現(xiàn)呼吸、心跳減慢減弱，肌肉松弛不能站立時，立即靜注5%CaC2l1ml/kg ，如心跳及呼吸恢復(fù)，耳殼血管開始轉(zhuǎn)紅即可停止注射。記錄癥狀出現(xiàn)時間，給予拮抗藥物后癥狀恢復(fù)時間及有無死亡發(fā)生。【注意事項】iv MgSO 4可緩慢、全量在2 3min 注完。實驗時應(yīng)將CaCl2溶液同時抽好，以便解救使

22、用。實驗六 有機(jī)磷中毒及其解救【實驗?zāi)康摹空莆沼袡C(jī)磷中毒解救方法及與傳出神經(jīng)作用機(jī)理。【實驗原理】有機(jī)磷酯類進(jìn)入機(jī)體后，其親電子性的磷與膽堿酯酶的酯解部位中絲氨酸的羥基進(jìn)行共價鍵結(jié)合，形成不易水解的磷?；憠A酯酶，難以恢復(fù)活性，這使得乙酰膽堿大量積聚體內(nèi)無法水解成膽堿和醋酸失效，因此產(chǎn)生了乙酰膽堿作用的中毒癥狀。解磷定解救有機(jī)磷中毒的機(jī)理是膽堿酶復(fù)活劑，通過恢復(fù)酶活力，使乙酰膽堿分解而消除中毒癥狀?！緦嶒灢牧稀? .動物：家兔；2 .器材：注射器3 .藥品：4%的敵敵畏，2.5%解磷定，阿托品【 實驗方法】1 .觀察并測量正常家兔的活動，呼吸心率瞳孔并記錄測量結(jié)果；2 .取家兔，有機(jī)磷（敵敵畏

23、4%、 0.2ml/kg ）后觀察上述活動變化3 . 6組中兩組阿托平1mg/支靜脈注射后觀察上述活動變化兩組解磷定100mgl/kg 靜脈注射后觀察上述活動變化兩組阿托品+解磷定靜脈注射后觀察上述活動變化【實驗結(jié)果】觀察上述活動變化并記錄結(jié)果【注意事項】1 .阿托品要快速注入，以緩解危機(jī)的中毒癥狀，但解磷定注射要慢；2 .一般出現(xiàn)中度中毒時開始解救。討論：有機(jī)磷中毒的作用機(jī)理是什么？阿托品與解磷定解救機(jī)理有何不同。實驗七 去甲腎上腺素的縮血管作用【實驗?zāi)康摹? 觀察去甲腎上腺素的縮血管作用，分析其作用機(jī)制，聯(lián)系其臨床用途。2練習(xí)蛙的捉拿及破壞其腦、脊髓的方法?！緦嶒灢牧稀? .動物青蛙或蟾蜍

24、。2 .藥物0.01%重酒石酸去甲腎上腺素溶液。3 .器材探針、蛙板、蛙腿夾、大頭針、手術(shù)剪、攝子、滴管、放大鏡?！痉椒ㄅc步驟】取青蛙或蟾蜍1只，應(yīng)用探針破壞其腦與脊髓后，固定于蛙板上。沿其腹壁一側(cè)剖開腹腔，找出腸系膜，用大頭針固定于蛙板上。用放大鏡觀察腸系膜血管的粗細(xì)后，滴 0.01%重酒石酸去甲腎上腺素溶液1滴于腸系膜上，待約3min 后，再觀察腸系膜血管的粗細(xì)與滴藥前有何不同。【結(jié)果記錄】滴藥后腸系膜血管與滴藥前相比較粗細(xì)程度的變化。實驗八 局麻藥的毒性比較【實驗?zāi)康摹坑^察普魯卡因、丁卡因?qū)π“资蟮淖饔媒Y(jié)果，判斷兩藥的毒性大小，聯(lián)系臨床應(yīng)用?！緦嶒灢牧稀? .動物小白鼠。2 .藥物1%鹽

25、酸普魯卡因溶液、1%鹽酸丁卡因溶液。3 .器材藥物天平1臺、1ml 注射器2支、5號針頭2個、大燒杯（或鼠籠）2個?！痉椒ㄅc步驟】取小白鼠2只，編號稱重，觀察其正常活動后，1 號鼠腹腔注射1%鹽酸普魯卡因溶液0.1ml/20g， 2號鼠用腹腔注射1%鹽酸丁卡因溶液0.1ml/20g。 觀察兩鼠用藥后及反應(yīng)有何差異?！窘Y(jié)果記錄】鼠 號體重（g）藥物( 0.1ml/20g )用藥后反應(yīng)毒性 大小發(fā)生驚厥時間（ min）驚厥程度11% 鹽酸普魯卡因21% 鹽酸丁卡因1 稱量準(zhǔn)確，用藥量準(zhǔn)確。2注意腹腔注射。實驗九鎮(zhèn)痛藥的鎮(zhèn)痛作用比較【實驗原理】不同類型鎮(zhèn)痛藥物的鎮(zhèn)痛強(qiáng)度、作用機(jī)制有所不同。一、小白鼠

26、扭體法（化學(xué)制激法）【實驗材料】1 動物小白鼠。2藥品0.2%哌替啶溶液、0.2%羅通定溶液、生理鹽水、6%醋酸溶液。3器械托盤天平、大燒杯、秒表、1ml 注射器?！緦嶒灧椒ā?取健康小白鼠6只，稱重后分為1、 2、 3三組，每組2只。2 1 組腹腔注射0.2%哌替啶溶液0.1ml/10g， 2組腹腔注射0.2%羅通定溶液0.1ml/10g， 3組腹腔注射生理鹽水0.1ml/10g 作對照。3給藥30min 后，各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml/只，隨即觀察10min 內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)的動物數(shù)。扭體反應(yīng)表現(xiàn)為腹部內(nèi)凹，后腿伸張，軀體扭曲，臀部抬高。4實驗完畢后，綜合全班各組的實驗結(jié)果，計算

27、出藥物鎮(zhèn)痛百分率。【實驗結(jié)果】組別鼠數(shù)藥物扭體反應(yīng)鼠數(shù)無扭體反應(yīng)鼠數(shù)1組2組3組藥物鎮(zhèn)痛百分率計算方法：藥物鎮(zhèn) 痛百 分率 ×100%二、溫度刺激法【實驗材料】1 動物小白鼠。2藥品0.1%鹽酸嗎啡溶液、生理鹽水。3器械小白鼠固定器、秒表、托盤天平、1ml 注射器、恒溫水箱。【實驗方法】1 小白鼠2只，分別裝入固定器內(nèi)，將鼠尾由固定器的小圓孔拉出，將鼠尾尖輕輕放入恒溫水浴55熱水內(nèi)深約0.5cm， 記錄鼠尾從放入熱水內(nèi)到縮離水面的時間，共測3次，每次間隔10min，取其平均值記錄。如在30s以上無反應(yīng)者，應(yīng)棄去不用。2取的2只小白鼠稱重編號，1 號鼠腹腔注射0.1%鹽酸嗎啡溶液0.1

28、ml/10g， 2號鼠腹腔注射生理鹽水0.1ml/10g 對照。注射10min 后再將小白鼠放入固定器內(nèi)，用同樣方法測其痛覺反應(yīng)一次，共測3次，每次間隔10min，記錄每次反應(yīng)時間，如超過30s鐘無反應(yīng)者，應(yīng)將鼠尾提起以免燙傷，并作為30s 鐘記錄。3實驗完畢后，分組統(tǒng)計全班實驗結(jié)果，取其平均值，按下式計算痛閾提高百分率：痛閾提高百分率×100%鼠號體重藥物及用量用藥前 反應(yīng)時間用藥后反應(yīng)時間及痛閾提高百分率10min%20min%30min%120.1%嗎啡溶 液生理鹽水ss%ss%ss%三、熱板法【實驗材料】1 動物雌性小白鼠。2藥品0.4%哌替啶溶液、0.2%嗎啡溶液、4%溶液

29、、生理鹽水。3器械藥理生理實驗多用儀及附件恒溫電熱器、鎮(zhèn)痛實驗盒、1ml 注射器、鼠籠、秒表、托盤天平?！緦嶒灧椒ā? 在恒溫電熱器內(nèi)加水至觸及鎮(zhèn)痛實驗盒底部，溫度控制在55，將兩極引線的插頭插入多用儀后面板的“恒溫控制”插口， 并把附近開關(guān)撥向“恒溫”， 再將后面板輸出與電熱器相連，通電后即可使電熱器內(nèi)水溫恒定于55。2用藥前痛閾測定開始，立即將一只小白鼠放入鎮(zhèn)痛實驗盒內(nèi)，密切觀察，并記錄小白鼠出現(xiàn)舐后足的時間，此段時間為該鼠的痛閾值，隨即將鼠取出。用此法挑選反應(yīng)小于30s的小白鼠4只。然后重復(fù)測定小白鼠的痛閾值一次，將每鼠所得兩次痛閾值平均后，作為用藥前的痛閾值。3以上選出的4只小白鼠，稱

30、重編號，分別腹腔注射下列藥物：1號鼠0.2%鹽酸嗎啡溶液0.1ml/10g2號鼠0.4%哌替啶溶液0.1ml/10g3號鼠4%溶液0.1ml/10g4號鼠生理鹽水0.1ml/10g4 用藥后 15min 、 30min 、 60min、 90min， 各測小白鼠的痛閾2次，兩次測定間隔23min，將兩次測得閾值平均，作為該時間的痛閾值。如果藥后放入鎮(zhèn)痛實驗盒內(nèi)60s 小鼠仍無舐后足反應(yīng)，即將小白鼠取出，以免時間太長鼠腳燙傷，此時閾值按60s 計算。【實驗結(jié)果】實驗完畢后，匯總?cè)嗨鶞y得痛閾按下列公式計算：痛閾提高百分率×100%用藥前痛閾平用藥后痛閾平均值及痛閾提高百分率鼠號動物數(shù)均

31、值15min（ %）30min （ %）60min（ %）90min（ %）1234然后根據(jù)每組不同時間的痛閾提高百分率作圖，橫坐標(biāo)代表時間，縱坐標(biāo)代表痛閾提高百分率，畫出曲線借以比較各藥的鎮(zhèn)痛強(qiáng)度，作用開始時間及維持時間?！咀⒁馐马棥? 因雄性小白鼠過熱時睪丸下垂，陰囊觸及熱板導(dǎo)致反應(yīng)敏感，故選用雌性為好。2室溫在15左右較好，過低則小鼠反應(yīng)遲鈍，過高則過于敏感，易產(chǎn)生跳躍，不易得到正確的實驗結(jié)果。3正常痛閾時，凡在30s 內(nèi)不舐后足或逃避、跳躍者則棄之另換?！舅伎碱}】2 正確理解效能和效價強(qiáng)度的概念。2從藥物作用強(qiáng)度的不同，指出其臨床意義。實驗十普萘洛爾的抗缺氧作用【實驗?zāi)康摹坑^察普萘洛爾

32、提高動物對缺氧的耐受力的作用，了解用小白鼠進(jìn)行耐缺氧的實驗方法?！緦嶒灢牧稀?動物：小白鼠。3 .藥物0.1%鹽酸普萘洛爾溶液、鈉石灰、生理鹽水。4 .器材250ml 廣口瓶，注射器、秒表、托盤天平、500ml 大燒杯。【方法與步驟】取 250ml 廣口瓶2個，分別放入鈉石灰10g，以吸收二氧化碳和水。再取小白鼠2只（體重18 22g 為宜） ，稱重并編號標(biāo)記。1 號鼠腹腔注射0.1%鹽酸普萘洛爾溶液0.2ml/10g ； 2號鼠腹腔注射生理鹽水0.2ml/10g 作為對照。給藥15min 后，將兩鼠分別放入兩只廣口瓶內(nèi)，蓋嚴(yán)瓶口，立即記錄時間。觀察兩鼠直至死亡，記錄各鼠死亡時間，求出各鼠存活時間?！窘Y(jié)果記錄】綜合各組實驗結(jié)果，分別計算出給藥鼠和對照鼠的平均存活時間，再用下式求得存活時間延長百分率。存活時間延長百分率×100%體重（g）藥物劑量放入廣口瓶內(nèi)存活存活時間延長鼠號時間（min）百分率（%）10.1% 鹽酸普萘洛爾2生理鹽水1 小白鼠