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文檔簡介

1、分 子 生 物 學(xué) 實 驗1. 分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程2. 分子生物學(xué)實驗常用儀器設(shè)備3. 分子生物學(xué)基本技術(shù)4. 實驗準備分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程 上課時間提前5分鐘進入實驗室;不遲到、不早退,無故曠課累計3次沒成績; 請假須醫(yī)院病假條或班主任簽字的假條; 上課時需穿實驗服,不許在實驗室內(nèi)吃東西,不背著書包做實驗,不穿拖鞋進實驗室; 實驗課期間不許打鬧、閑聊等,不大聲喧嘩,保持課堂紀律,實驗過程中,至始至終需全組同學(xué)一起完成,任何人中途不得缺席。 必須做到課前認真預(yù)習(xí),課間做好實驗記錄、課后詳細總結(jié)實驗結(jié)果并按時提交實驗報告; 公用試劑不得污染!每次都必須用新槍頭。公用臺上公用試劑不得私自拿到

2、自己實驗臺上; 不得私自拿走或亂放別人的實驗物品、實驗產(chǎn)品; 不得擅自使用實驗室中非本實驗儀器、試劑。 實驗廢液不隨便傾倒,隨時保持實驗臺的整潔; 愛護實驗器材,實驗器材損壞必須按規(guī)定賠償; 實驗前按儀器性能與要求,進行儀器預(yù)熱; 實驗完成后檢查電源插座,用完儀器后必須復(fù)位,儀器清潔干凈 、擺放整齊;每組實驗物品齊全,需教師驗收,槍量程要歸位,發(fā)現(xiàn)問題及時報修; 每位同學(xué)負責(zé)自己實驗臺面和柜體的衛(wèi)生,值日生負責(zé)公用實驗臺、地面等處衛(wèi)生; 每次輪到打掃衛(wèi)生的小組,要認真做好值日工作,離開實驗室須向教師聲明; 同學(xué)與老師之間、同學(xué)與同學(xué)之間、實驗班與實驗班之間一定要互相協(xié)作配合保持公用房間衛(wèi)生,注

3、意門窗水電的安全。 遵守通用的實驗室規(guī)則。 違反上述任何一條規(guī)則責(zé)任自負,并要扣分,造成損失要照價賠償。實 驗 成 績 實驗技能 2020分實驗報告 2020分實驗態(tài)度 1515分實驗室常識 1515分實驗實施 3030分 分子生物學(xué)實驗教程 自編 分子生物學(xué)實驗指導(dǎo) 魏群 高等教育出版社 分子生物學(xué)實驗指導(dǎo) 劉進元 清華大學(xué)出版社實 驗 內(nèi) 容p實驗一 分子生物學(xué)實驗的基本知識和基本技能培訓(xùn)p實驗二 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備p實驗三 質(zhì)粒DNADNA的轉(zhuǎn)化p實驗四 堿裂解法提取質(zhì)粒DNADNAp實驗五 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNADNAp實驗六 PCRPCR基因擴增1. 分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程2

4、. 分子生物學(xué)實驗常用儀器設(shè)備3. 分子生物學(xué)基本技術(shù)4 實驗準備樣品、試劑和材料等的保存溫度控制系統(tǒng)-冰箱:4 4 、-20-20 、-70-70 純 水 器恒溫培養(yǎng)箱恒溫空氣搖床滅菌器培養(yǎng)基、試劑、耗材等的滅菌PCR 儀PCR PCR 擴增、保溫實驗等恒溫水浴及微量加熱器保證實驗溫度的恒定電 泳 儀電泳時提供電壓和電流電泳槽核酸或蛋白質(zhì)的電泳定性分析時的凝膠支架凝膠成像系統(tǒng)臺式高速冷凍離心機落地式高速冷凍離心機樣品的分離分光光度計樣品的定量測定超凈工作臺電子天平樣品、試劑等的稱量精確的pHpH值測定液體試劑的精確取量制冰機1. 分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程2. 分子生物學(xué)實驗常用儀器設(shè)備3. 分

5、子生物學(xué)基本技術(shù)3.1實驗規(guī)范訓(xùn)練儀器的操作3.2實驗規(guī)范訓(xùn)練量程的選擇3.3實驗規(guī)范訓(xùn)練標簽3.4實驗規(guī)范實驗操作4 實驗準備3.1 實驗規(guī)范訓(xùn)練儀器的操作要求:儀器在未經(jīng)培訓(xùn)前,不得擅自使用 嚴格按操作規(guī)程使用儀器, 有些儀器必須有教師在場時才能使用,并由教師操作 違反規(guī)定的使用者,造成的后果由使用者承擔(dān)3.2 實驗規(guī)范訓(xùn)練量程的選擇天平燒杯、量筒、容量瓶、試劑瓶不同規(guī)格量程的選擇移液器3.3 實驗規(guī)范訓(xùn)練標簽1.所用的器皿上一定要做標記2.標簽一定要貼到固定的位置3.標簽上應(yīng)包括具體的名稱、組別、實驗班、日期3.4 3.4 實驗規(guī)范實驗操作詳細記錄和分析實驗結(jié)果并按時提交實驗報告實驗中一

6、定要處處用心、勤動手,多問為什么仔細操作和觀察保留好每一步的實驗樣品,在確準的情況下才能當廢液扔掉1. 分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程2. 分子生物學(xué)實驗常用儀器設(shè)備3. 分子生物學(xué)基本技術(shù)4. 實驗準備4.1 清點和熟悉常用玻璃器皿、耗材等4.2 洗滌本學(xué)期實驗用玻璃器皿4.3 配制試劑4.4 高溫滅菌4 4 實驗準備4.1 清點和熟悉常用玻璃器皿、耗材等4.1 洗滌本學(xué)期實驗用玻璃器皿4.3 配制試劑1 1) 0.1 mol/L CaCl0.1 mol/L CaCl2 2 100 mL100 mL2 2) 5 mol/L NaOH 100 mL 5 mol/L NaOH 100 mL 膠塞 3 3

7、) LBLB液體培養(yǎng)基 100 mL100 mL 胰蛋白胨(typtone) 1gtyptone) 1g 酵母提取物(yeast extract) 0.5gyeast extract) 0.5g NaCl 1g NaCl 1g 加部分水溶解后加2020L 5 mol/L NaOHL 5 mol/L NaOH,定容到100 100 mLmL4) 10%(w/v)SDS儲液 50 mL ,室溫保存5) 1 mol/L Tris 200 mL6) 2 mol/L HCL 100 mL7) 0.5 mol/L EDTA 100 mL 80 mL水中加18.61g EDTA-Na2H2O,用NaOH調(diào)

8、pH 8(約需2g NaOH),后定容至100 mL8) 5xTAE 1000 mL9) 70%乙醇 500 mL10) Amp :100 mg/ mL 20ml,分裝每管 1 mL,200C保存4.4 4.4 高溫滅菌LB液體培養(yǎng)基 1.5mL離心管 2瓶/組槍頭/1組 : 1mL 1盒,200uL 1盒培養(yǎng)皿 12套/組 無菌水 100 mL /班 0.1 mol/L CaCl2 每位同學(xué)負責(zé)自己實驗臺面和柜體的衛(wèi)生,值日生負責(zé)公用實驗臺、地面等處衛(wèi)生; 每次輪到打掃衛(wèi)生的小組,要認真做好值日工作,離開實驗室須向教師聲明; 同學(xué)與老師之間、同學(xué)與同學(xué)之間、實驗班與實驗班之間一定要互相協(xié)作配合保持公用房間衛(wèi)生,注意門窗水電的安全。

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