各類藥物的生產(chǎn)方法

1、1 1、穩(wěn)定及難溶氨基酸的溶解 取新鮮的注射用水（約全量2/32/3），于容器中，加溫至90 90 o oC C，將亮氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、天門冬氨酸及谷氨酸依次投入，充分攪拌溶解，停止加熱，加入色氨酸攪拌溶解。2 2、加易溶解的氨基酸及穩(wěn)定劑 投入其它易溶氨基酸及穩(wěn)定劑（亞硫酸氫鈉及半胱氨酸各加至全量濃度為0.050.05）攪拌溶解，迅速降至室溫，加注射用水至近全量，用1010氫氧化鈉液調(diào)pH4.5-5.5pH4.5-5.5，加注射用水至全量。3 3、脫色與灌注 上述溶液加0.1-0.20.1-0.2（w/vw/v）的活性炭，攪拌3030minmin，濾除活性炭，再用分子

2、量截留值為1-21-2萬的超濾膜過濾，濾液分裝于250250mlml或500500mlml的輸液瓶中，按常規(guī)操作壓蓋后，于105105o oC C流動蒸汽滅菌3030minmin即得成品。氨基酸輸液配制原則糖類藥物及其制造工藝一、糖類藥物的一般制備方法1、單糖、寡糖及其衍生物提取純化可以用水及50以下的乙醇為提取溶劑，也可用82乙醇，在7078 oC下回流提取。雜蛋白用硫酸鉛除去，然后用通H2S除去。提取后用吸附層析或離子交換法進行純化。2、多糖分離純化 先脫脂便于釋放多糖A 難溶于水者（冷水、熱水）可溶于烯堿者（不溶性的膠類）；B易溶于溫水、難溶于冷水及乙醇者；C粘多糖需先用酶解法或堿水解法

3、使糖蛋白結(jié)合鍵斷裂，用水或鹽溶液提取純化：乙醇沉淀法有機溶極分級沉淀法回 收 酒 精上 清 液小 分 子 右 旋 糖 苷 成 品沉 淀干 燥 ， 乙 醇 洗上 清 液常 溫 ， 6h , 55.5 56.5% A低 分 子 右 旋 糖 苷 成 品沉 淀干 燥 ， 乙 醇 洗 ， 干 燥上 清 夜40oC , 22h, 48 48.5% A中 分 子 右 旋 糖 苷 成 品 沉 淀干 燥 ， 乙 醇 洗 ， 干 燥上 清 夜40oC , 22h, 45 45.5% A沉 淀 （ 雜 質(zhì) 及 大 分 子 右 旋 糖 苷 ）水 解 液40 40.5% A沉 淀 為 高 分 子 右 旋 糖 苷 粗 品

4、水 解 、 中 和 純 化 ， pH 6.5, 95 100oC發(fā) 酵 液pH 4.2 5發(fā) 酵5oC , 20 24h種 子 培 養(yǎng)5oC , 20 24h菌 種 活 化25oC , 24h二、不同分子量右旋糖苷乙醇分級分離五、透明質(zhì)酸生產(chǎn)工藝結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)：等質(zhì)量的葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖組成；無種屬差異，只存在相對分子量的差異；加熱、劇烈攪拌、重金屬、酸堿、紫外線等會造成降解，提純工藝不同分子量差異較大。生產(chǎn)工藝：動物組織提取法和細菌發(fā)酵法產(chǎn)氨短桿菌嘌呤核苷酸生物合成調(diào)節(jié)機制5受GMP ATP的反饋抑制1被G阻遏 2受GMP反饋抑制3被A阻遏4受ATP ADP AMP GMP反饋抑制6

5、受GTP的反饋抑制注：PRPP5磷酸核糖焦磷酸產(chǎn)氨短桿菌腺嘌呤缺陷型菌株IMP發(fā)酵機制肌苷酸誘變圖譜肌苷酸產(chǎn)生誘變過程的產(chǎn)量變化1 1、選用產(chǎn)氨短桿菌腺嘌呤缺陷型菌株以解、選用產(chǎn)氨短桿菌腺嘌呤缺陷型菌株以解除腺嘌呤衍生物的反饋抑制；除腺嘌呤衍生物的反饋抑制；2 2、培養(yǎng)基中提供亞適量、培養(yǎng)基中提供亞適量A A，不足以產(chǎn)生反饋，不足以產(chǎn)生反饋抑制的腺嘌呤衍生物，通過補救途徑合成微抑制的腺嘌呤衍生物，通過補救途徑合成微生物生命活動所需要的生物生命活動所需要的DNADNA；3 3、培養(yǎng)基中加入特異抑制、培養(yǎng)基中加入特異抑制IMPIMP脫氫酶的化學脫氫酶的化學物質(zhì)（如物質(zhì)（如8 8氮雜鳥嘌呤）則氮雜鳥

6、嘌呤）則IMPIMP脫氫反應(yīng)被脫氫反應(yīng)被切斷，切斷，GMPGMP不能生成，解除不能生成，解除GMPGMP的反饋抑制，的反饋抑制，使使IMPIMP進一步被積累；進一步被積累；提高IMP產(chǎn)量途徑4、Mn2+在限量的情況下，培養(yǎng)后期產(chǎn)氨短桿菌，嘌呤核苷酸補救合成所需的酶和中間體核糖5磷酸很容易透過細胞膜，并且在細胞外重新合成大量的肌苷酸；5、因工業(yè)原料和工業(yè)水都含較高的Mn2，通過誘變育種的方法選育了對Mn2+不敏感的變異株，使發(fā)酵液Mn2 含量高達1000 g/ml時，肌苷酸的生物合成仍不受影響。二、免疫治療二、免疫治療免疫治療是通過輸入抗體、胸腺素、淋巴因子免疫治療是通過輸入抗體、胸腺素、淋巴因

7、子或某些藥物等來提高人的免疫功能，治療疾病的或某些藥物等來提高人的免疫功能，治療疾病的方法。輸入的抗體常稱為抗毒素。方法。輸入的抗體常稱為抗毒素?？辜毦舅鼗蚩共《究贵w可用于中和毒素和病毒。例如：被狗咬傷的例如：被狗咬傷的人要注射人要注射“狂犬疫苗狂犬疫苗”、被鐵釘?shù)仍鷤娜顺Ｗ?、被鐵釘?shù)仍鷤娜顺Ｗ⑸涞纳涞摹捌苽L毒素破傷風毒素”等都是從健康且遭受過相應(yīng)等都是從健康且遭受過相應(yīng)抗原感染的人血液中提取出來的抗體。給被抗原抗原感染的人血液中提取出來的抗體。給被抗原感染或懷疑被感染的人輸入淋巴因子、干擾素等感染或懷疑被感染的人輸入淋巴因子、干擾素等增強免疫效應(yīng)的物質(zhì)用于治療某些疾病也屬免疫增強免疫

8、效應(yīng)的物質(zhì)用于治療某些疾病也屬免疫治療的方法。治療的方法。輸入激活的淋巴細胞多用于腫瘤治療。如輸入激活的淋巴細胞多用于腫瘤治療。如腫瘤浸潤的淋巴細胞（腫瘤浸潤的淋巴細胞（tumor infiltrating tumor infiltrating lymphocyte,TILlymphocyte,TIL）或淋巴因子激活的殺傷細胞）或淋巴因子激活的殺傷細胞（lymphokine-activated killerlymphokine-activated killer，LAKLAK）輸注等。）輸注等。三、免疫重建與免疫替代療法 若機體免疫系統(tǒng)因先天或后天原因而出現(xiàn)嚴重缺陷，可通過輸入造血干細胞而重建免

9、疫系統(tǒng)，此為免疫重建（，此為免疫重建（immunological reconstitution）。造血干細胞可來自骨髓、胚胎肝細胞、臍血或外周血。免疫替代療法免疫替代療法即輸入機體缺乏的免疫活性物質(zhì)，以暫時維持其免疫功能。四、疫苗種類1、第一代疫苗-以完整病原體與毒素制備的疫苗由滅活的病源微生物懸液構(gòu)成，幾乎不經(jīng)過任何純化2、第二代疫苗病源微生物的純化、保護組分的完全提純。如脊髓灰質(zhì)炎死疫苗、多糖疫苗；3、第三代疫苗各種保護組織進行組合后的產(chǎn)品及生物技術(shù)疫苗。如將多糖連接到百日咳疫苗蛋白載體上、DNA疫苗等。 死疫苗死疫苗 (dead vaccine) 亦稱滅活疫苗( inactive vac

10、cine)，包括霍亂、傷寒、鉤端螺旋體、百日咳、狂犬病、甲型肝炎及乙型腦炎疫苗等。 減毒活疫苗減毒活疫苗 （attenuated vaccine）由無毒或弱毒的病原微生物制成，可在體內(nèi)增殖，所需接種劑量小，且僅需一次接種；免疫效果較好。有卡介苗、麻疹、腮腺炎、脊髓灰質(zhì)炎(Sabin)、風疹及水痘疫苗等。會有核酸插入宿主基因組的危險，和發(fā)生致病力恢復的現(xiàn)象，但可能性很小；對免疫缺陷兒童，會導致嚴重的并發(fā)癥。如T細胞缺乏的兒童在使用卡介苗時會有強烈反應(yīng)，甚至導致死亡。 類毒素類毒素(toxoid) 將細菌外毒素用0.3%0.4甲醛處理而制成。類毒素無毒性，但有免疫原性, 可誘導機體產(chǎn)生抗毒素。常用

11、的類毒素主要有破傷風類毒素與白喉類毒素。幾種第一代疫苗二、生物轉(zhuǎn)化與藥物合成生物轉(zhuǎn)化藥物 ：用微生物或酶進行藥物合成過程中的一步或幾步反應(yīng)。與微生物從頭到尾合成初級或次級產(chǎn)物如氨基酸和天然抗生素相區(qū)別回 收 酒 精上 清 液小 分 子 右 旋 糖 苷 成 品沉 淀干 燥 ， 乙 醇 洗上 清 液常 溫 ， 6h , 55.5 56.5% A低 分 子 右 旋 糖 苷 成 品沉 淀干 燥 ， 乙 醇 洗 ， 干 燥上 清 夜40oC , 22h, 48 48.5% A中 分 子 右 旋 糖 苷 成 品 沉 淀干 燥 ， 乙 醇 洗 ， 干 燥上 清 夜40oC , 22h, 45 45.5% A沉 淀 （ 雜 質(zhì) 及 大 分 子 右 旋 糖 苷 ）水 解 液40 40.5% A沉 淀 為 高 分 子 右 旋 糖 苷 粗 品水 解 、 中 和 純 化 ， pH 6.5, 95 100oC發(fā) 酵 液pH 4.2 5發(fā) 酵5oC , 20 24h種 子 培 養(yǎng)5oC , 20 24h菌 種 活 化25oC , 24h二、不同分子量右旋糖苷乙醇分級分離4、Mn2+在限量的情況下，培養(yǎng)后期產(chǎn)氨短桿菌，嘌呤核苷酸補救合成所需的酶和中間體核糖5磷酸很容易透過細胞膜，并且在細胞外重新合成大量的肌苷酸；5、因工業(yè)原料和工業(yè)水都含較高的Mn2，通過誘變育種的方法選育了對Mn2+不敏感的變異株，使發(fā)