科研部目前能提供技術(shù)指導(dǎo)一覽表

1、科研部目前能提供技術(shù)指導(dǎo)一覽表根據(jù)科技處領(lǐng)導(dǎo)要求，現(xiàn)列出科研部能開展的各項實驗室技術(shù)詳細(xì)清單，以增進(jìn)相關(guān)人員對科研部的了解，提高科研部實驗室的使用效率。需要特別說明的是，實驗室技術(shù)與研究項目的內(nèi)容密切相關(guān)，但實驗室技術(shù)名稱不等于研究項目或研究內(nèi)容名稱。我們只能列出各項實驗室技術(shù)名稱，而無法列出研究內(nèi)容或項目的名稱，用實際例子說明如下。例如，“某基因單核苷酸多態(tài)性與某種疾病易感性的關(guān)系”，這屬于研究項目的名稱，其中的基因單核苷酸多態(tài)性檢測需要在實驗室完成，其方法至少有10種以上，而任何一種方法，都包括多種實驗室技術(shù)，其中最基本的標(biāo)本留取和處理，就需要考慮以下至少5個方面：1）留取什么組織標(biāo)本：通

2、常為外周血；2）留取外周血：是否需要抗凝，最好抗凝（不抗凝的血標(biāo)本也可以用，但對后續(xù)實驗帶來很大麻煩）；3）用什么抗凝劑：最好用EDTA或枸櫞酸鈉（用肝素也可以，但價格高，且有可能影響后續(xù)實驗）；4）采血量：根據(jù)多態(tài)性位點數(shù)目、多態(tài)性位點檢測方法等而定；5）血樣處理（這涉及試劑配置、移液器使用、離心、標(biāo)本保存等各種技術(shù)）：a何時處理：最好當(dāng)天，甚至需立即處理，也可以在12周甚至更長時間后處理；這需要綜合考慮，如血細(xì)胞和血漿是否需要用于檢測其他指標(biāo)，這些指標(biāo)是否受標(biāo)本處理時間的影響，；b如果不能及時處理，如何保存：4ºC保存，室溫保存12天也可以，但未處理的抗凝血切忌凍存，因為凍融后紅

3、細(xì)胞溶血，部分白細(xì)胞也會裂解，影響后續(xù)實驗，； c如何處理：需要綜合考慮，是否需要保存血漿，是的話，先離心，吸取血漿，保存；再裂解紅細(xì)胞，留取白細(xì)胞，分裝，保存。因此，此清單僅作為參考，不能機(jī)械地根據(jù)此清單判斷科研部能否對您的課題提供技術(shù)支持。請在課題開始前，電話或來科研部咨詢相關(guān)事項。根據(jù)需要，我們也可以派人到貴科室提供咨詢服務(wù)。另外，因為實驗室技術(shù)的通用性，此清單中未列出的項目，只要沒有儀器或試劑的特殊要求，本部門多數(shù)也能開展。鼓樓醫(yī)院科研部 2016.1.18 1 / 5一、實驗室基本技術(shù)：1) 試劑瓶和實驗器材的清洗2) 試劑選擇3) 試劑稱量與配制4) 血液、組織等樣本的收集與保存5

4、) 儀器或設(shè)備的使用：具體儀器和設(shè)備見清單，使用時請參見本實驗室各儀器的SOP。二、分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)：1) 人及各種動物基因組DNA抽提、濃度測定2) 人及各種動物組織或細(xì)胞RNA提取、濃度測定3) 瓊脂糖凝膠電泳（DNA；RNA）4) 瓊脂糖凝膠DNA回收5) RNA電泳6) Southern blotting (DNA轉(zhuǎn)印技術(shù)) 7) Northern blotting (RNA轉(zhuǎn)印技術(shù))8) 普通PCR9) 巢式PCR10) 逆轉(zhuǎn)錄PCR11) 熒光定量PCR12) 梯度PCR13) PCR產(chǎn)物（DNA片段）純化14) 基因突變（點突變或缺失突變）技術(shù)15) 感受態(tài)細(xì)胞制備16) DN

5、A連接17) DNA克隆 （T-A克隆、質(zhì)粒構(gòu)建等）18) 質(zhì)粒DNA制備19) 質(zhì)粒抽提20) MicroRNA、mRNA檢測21) 基因過表達(dá)22) 基因沉默23) 引物設(shè)計24) DNA測序25) DNA片段分析26) SNP檢測27) 分子克隆技術(shù)：蛋白原核和酵母表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建、蛋白原核表達(dá)、純化三、蛋白質(zhì)相關(guān)技術(shù)：1) 各種組織裂解及蛋白抽提（總蛋白、胞漿蛋白、膜蛋白及核蛋白提?。?) 蛋白質(zhì)定量3) SDS-PAGE電泳及考馬斯亮藍(lán)染色4) 蛋白表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建、蛋白原核表達(dá)、純化（鹽析、親和層析等）5) 蛋白真核細(xì)胞（包括哺乳動物細(xì)胞、酵母細(xì)胞）的表達(dá)和純化6) 蛋白質(zhì)超速離心分析：密

6、度滴度離心、浮力密度分析、微量蛋白濃縮、純化等四、免疫學(xué)分析技術(shù)（檢測各種抗原、抗體、各種蛋白質(zhì)分子）：1) ELISA2) 免疫組化3) HE染色4) 免疫沉淀5) 免疫熒光6) 熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）7) Western blotting (蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印技術(shù))8) 液相芯片分析檢測各種細(xì)胞因子9) 固相酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)10) 免疫動物的抗原制備五、細(xì)胞學(xué)分析技術(shù)（用于各種以細(xì)胞為基礎(chǔ)的研究）：1) 傳代細(xì)胞培養(yǎng)、復(fù)蘇和凍存2) 原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)3) 細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)4) 細(xì)胞增殖檢測5) 細(xì)胞毒性檢測6) 細(xì)胞凋亡檢測7) 細(xì)胞周期檢測8) 細(xì)胞遷移/劃痕實驗9) 細(xì)胞轉(zhuǎn)染和篩選10) 流式細(xì)胞儀檢測11) 流式細(xì)胞儀分選細(xì)胞12) 免疫磁珠分選細(xì)胞13) 細(xì)胞氧化應(yīng)激檢測14) 人和各種動物外周血淋巴細(xì)胞分離15) 細(xì)胞核提取16) 線粒體提取17) 干細(xì)胞原代培養(yǎng)和鑒定（免疫標(biāo)記鑒定、成骨、成軟骨、成脂鑒定及尼氏體檢測等）六組織病理切片和顯微鏡分析技術(shù)：用于各種形態(tài)學(xué)成像分析1）包括石蠟切片及冰凍切片2）普通光學(xué)顯微鏡術(shù)：常規(guī)切片、免疫組化等3）普通光