原料藥分析方法開發(fā)流程

1、原 料 藥 分析方 法 開 發(fā)流程分析方法在藥物的研發(fā)過程中起到的是“燈塔”的作用，是原料藥及制劑開發(fā)、質(zhì)量控制的標(biāo)尺及眼睛，因此分析方法在藥物開發(fā)過程中起到了領(lǐng)航員的作用。下面簡單的介紹一下原料藥分析方法的開發(fā)流程。原料藥的分析方法開發(fā)一般分為兩大部分：1、起始物料的分析方法開發(fā)；2、中間體及API的分析方法開發(fā)。按照正常的邏輯順序，應(yīng)該是起始物料的分析方法開發(fā)先行，但是一般在實際操作過程中，往往是中間體及 API的分析方法先行開發(fā)。 主要是因為，在打通工藝路線時期或者是文 獻調(diào)研的階段，主要是針對中間體及 API的分析方法的工作。只有在工藝優(yōu)化的中期或者中后期， 對起始物料廠家基本選定時才

2、會有針對性的啟動起始物料的分析方法開發(fā)工作。雖然如此，考慮到邏輯順序，還是按照起始物料、中間體、API這樣的順序進行逐一介紹。一、起始物料1、合成路線的獲取在啟動分析方法開發(fā)工作之前，一定要獲得起始物料廠家提供的合成路線，需要包括以下幾點：起始物料、中間體、反應(yīng)溶劑、后處理溶劑及關(guān)鍵催化劑等。如果廠家提供反應(yīng)步驟過長，一般選擇3-5步即可。2、雜質(zhì)分析結(jié)合起始物料廠家提供的工藝路線，對可能存在或者產(chǎn)生的各種雜質(zhì)進行詳細(xì)的分析，為分析方法開發(fā)的方向奠定一個基礎(chǔ)，也好對所需要的儀器耗材有提前的準(zhǔn)備。一般涉及雜質(zhì)如下:雜質(zhì)種類雜質(zhì)主要來源一般檢測手段一般所需耗材普通雜質(zhì)起始物料、中間體、副產(chǎn)物、 降

3、解產(chǎn)物HPLC普通C18柱、氨基柱手性雜質(zhì)含手性中心的化合物、引入 手性的反應(yīng)HPLG旋光儀手性柱GTI起始物料、中間體、副產(chǎn)物HPLC LC-MS GC-MS普通C18柱、毛細(xì)管柱重金屬催化劑原子吸收、ICP-MS、藥典通用方法空心陰極燈、鉛標(biāo)準(zhǔn)溶 液溶劑殘留反應(yīng)溶劑、后處理溶劑、副 產(chǎn)物GC細(xì)管柱無機鹽縛酸劑、干燥劑、調(diào)節(jié)pH的試劑比濁法、熾灼殘渣、比色法相應(yīng)的分析溶劑3、分析方法的開發(fā)起始物料路線中所涉及的雜質(zhì)種類，進行對應(yīng)分析方法的開發(fā)。以廠家COA及提供的分析方 法為基礎(chǔ)，結(jié)合自身工藝對起始物料質(zhì)量的要求，建立適合自己的起始物料內(nèi)控方法。4、分析方法的驗證在API工藝進行逐級放大前，

4、取得起始物料供應(yīng)商提供的不小于 3批的中試生產(chǎn)批量樣品, 使用一批次進行分析方法驗證工作， 其余批次進行分析方法重現(xiàn)工作， 同時也是為了驗證廠家提 供起始物料質(zhì)量的穩(wěn)定和可控。5、雜質(zhì)限度制定的依據(jù)根據(jù)多批次起始物料的檢測結(jié)果，以及API雜質(zhì)限度的要求，結(jié)合工藝路線對雜質(zhì)的清除能力，制定起始物料中雜質(zhì)的限度。需重點關(guān)注基因毒性雜質(zhì)及毒性較大的試劑溶劑。物料名稱制定依據(jù)起始物料1、結(jié)合自身工藝対雜質(zhì)的清除效率；2、結(jié)合自身工藝所涉及溶劑；3、相關(guān)起始物料所涉及 GTI及手性雜質(zhì)的引入；中間體1、結(jié)合自身工藝対雜質(zhì)的清除效率2、結(jié)合之后反應(yīng)對水分及溶劑殘留的要求3、GTI及手性雜質(zhì)的引入4、API

5、中關(guān)鍵雜質(zhì)的要求API1、結(jié)合反應(yīng)體系中較大雜質(zhì)和清除率較低的雜質(zhì)情況2、結(jié)合指導(dǎo)原則要求3、結(jié)合所涉及溶劑及催化劑的情況、中間體中間體分為過程控制及質(zhì)量控制，過程控制主要監(jiān)控反應(yīng)進行的程度，質(zhì)量控制是制定中間體的中控標(biāo)準(zhǔn)。1、過程控制方法1）過程控制方法的開發(fā)根究反應(yīng)液的具體情況以及涉及物料自身的性質(zhì)，中間體的過程控制方法可以選擇TLC或者HPLC的手段進行控制。一般在反應(yīng)過程中主要關(guān)心的是原料的剩余及產(chǎn)物的生成情況，所以確 保在原料及產(chǎn)物峰周圍沒有干擾。如果有需要特殊關(guān)注的雜質(zhì)，也需確保雜質(zhì)的分離度、峰純度等。2）過程控制方法的驗證如果過程控制的方法只是定性的檢測，在方法驗證時一般只需進行

6、：專屬性、檢測限、耐用 性等方面的驗證工作。如果涉及定量檢測的方法，則需要進行全面的分析方法驗證工作。2、質(zhì)量控制方法1）質(zhì)量控制方法的開發(fā)對中間體的質(zhì)量控制， 一方面根據(jù)工藝優(yōu)化的結(jié)果制定質(zhì)量控制的限度，另一方面需要根據(jù)API質(zhì)量的要求對中間體所涉及雜質(zhì)的限度進行定量的控制。當(dāng)然，質(zhì)量控制方面不只是雜質(zhì)限 度的控制，如果接下來的反應(yīng)是無水反應(yīng)，上一步的中間體依然需要對水分的限度進行嚴(yán)格的控制。中間體的制備過程中，也會涉及 GTI、手性雜質(zhì)及重金屬等雜質(zhì)的研究。一般情況，此類雜 質(zhì)最好放在中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中進行， 如果控制有難度或者在之后的反應(yīng)過程中仍然會又引入及 生成，放在之后的步驟控制或者

7、 API控制均可。2）質(zhì)量控制方法的驗證一般情況下，中間體的質(zhì)量控制均會涉及雜質(zhì)的定量檢測，因此中間體質(zhì)控方法的驗證均需要按照定量檢測的方法進行全面的分析方法驗證工作。三、API同起始物料分析方法開發(fā)基本一致，在API分析方法的開發(fā)前期， 首先需要進行有關(guān)化合物或者相似化合物分析方法的調(diào)研工作，其次進行雜質(zhì)的分析工作。 針對不同類型的雜質(zhì)選擇有針對性的文獻報道的方法為方法開發(fā)的基礎(chǔ)，結(jié)合工藝本身，對分析方法進行逐步的優(yōu)化。有關(guān)物質(zhì)的制定，可以根據(jù)靠近終反應(yīng)步驟的雜質(zhì)譜以及最后一步反應(yīng)的雜質(zhì)體系進行制定。溶劑殘留的制定需要結(jié)合起始物料所涉及的溶劑，如果有與起始物料有差異的溶劑，那么差異溶劑需要在

8、起始物料中進行控制；若能包含起始物料所涉及溶劑，可以將所用溶劑在終產(chǎn)品中進行控制，起始物料中只需進行干燥失重的檢測。同時，還需要關(guān)注一些潛在的溶劑，例如：反 應(yīng)中涉及苯的衍生物，也需要關(guān)注苯的殘留控制等。3、分析方法的開發(fā)根據(jù)不同的雜質(zhì)種類，API的分析方法涉及到普通雜質(zhì)、手性雜質(zhì)、殘留溶劑、基因毒性雜質(zhì)、重金屬等。普通雜質(zhì)：一般采用HPLC法,在進行分析方法開發(fā)之前， 首先要進行充分的文獻調(diào)研工作， 查詢各國藥典標(biāo)準(zhǔn)、文獻、專利中是否收載了相同或同類化合物，以此為基礎(chǔ)進行分析方法的開發(fā)，結(jié)合API的理化性質(zhì)以及對各步反應(yīng)機理的分析，進行分析方法的逐步優(yōu)化。 在分析方法優(yōu)化過程中，應(yīng)同時對 A

9、PI進行強制降解實驗，評估分析方法對潛在降解產(chǎn)物的分離能力。手性雜質(zhì)：采用HPLC法，選用手性色譜柱或手性流動相。對有多個手性中心的，對映異構(gòu) 體需采用手性色譜進行分析，非對映異構(gòu)體，一般可與普通雜質(zhì)采用同一方法進行控制。殘留溶劑：殘留溶劑采用 GC法，根據(jù)溶劑的種類，選擇不同極性的色譜柱進行分離。除要 關(guān)注合成工藝中使用的溶劑外，還需要關(guān)注潛在的殘留溶劑，如使用了甲苯，需要對苯進行檢測與控制，使用了甲基叔丁基醚，需要關(guān)注叔丁醇的殘留，酯鍵斷裂過程中產(chǎn)生的醇類等?；蚨拘噪s質(zhì)： 由于基因毒性雜質(zhì)的限度較低，對方法的靈敏度要求較高，一般要用到HPLC-MS或GC-MS在分析方法開發(fā)中，需重點關(guān)注檢測限是否能滿足質(zhì)量控制的要求。重金屬：對于一般的重金屬，采用藥典通則的檢測方法即可，對于pd等重金屬需要特殊研究。4、分析方法的驗