藥師指導(dǎo)：甾體激素類藥物

1、藥師指導(dǎo)：甾體激素類藥物甾體激素類藥物根本結(jié)構(gòu)：均具有環(huán)戊烷駢多氫菲母核。分類：1. 腎上腺皮質(zhì)激素：皮質(zhì)酮衍生物，如可的松、潑尼松、地塞米松等。本類藥物多為 C21- 羥基所形成的酯類。結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是具有21個(gè)C原子：A環(huán)：具有厶4-3-酮基；C17:具有a -醇酮基并多數(shù)有a -羥 基；C10 C13:具有角甲基；C11 :具有羥基或酮基；其它：有些皮質(zhì)激素具有 1, 6 a、9 a鹵素，16a羥基，6 a、12 a、16a、16 3甲基等。2. 雄性激素及蛋白同化激素：甲睪酮、丙酸睪酮、十一酸睪酮等；蛋白同化激素有苯丙酸諾龍。結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：雄性激素具有19個(gè)C原子；蛋白同化激素具有 18個(gè)C原子

2、C10上無(wú)角甲基；A環(huán)：具有厶4-3-酮基；C17：無(wú)側(cè)鏈，多數(shù)是一個(gè)3 -羥基，有些是由他形成的酯，有些具 有a -甲基。3. 孕激素：也稱為黃體酮激素或孕酮。典型藥物為黃體酮。中國(guó)藥典收載有：黃體酮、醋酸甲羥孕酮、己酸羥孕酮、醋酸甲地孕酮原料及制劑；醋酸氯 地孕酮原料等。結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：具有21個(gè)C原子；A環(huán)：具有 4-3-酮基；C17：具有甲酮基，有些具有a -羥基， 與醋酸、已酸等形成酯如醋酸甲地孕酮、醋酸氯地孕酮、己酸羥孕酮等；其它：有些具有 6、6 3 -甲基、6 a -甲基、6 3 -氯I。4. 雌激素：又稱卵泡激素。雌二醇、炔雌醚、苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇、炔雌醇原料及制劑等。結(jié)構(gòu)特

3、點(diǎn)：具有18個(gè)C原子；A環(huán)：為苯環(huán)，C3上具有酚羥基且有些形成了酯或醚；C10:無(wú)角甲基；C17:具有B -羥基或酮基，有些羥基形成了酯，還有些具有乙炔基。口服避孕藥：炔諾酮、炔諾孕酮、炔孕酮。多數(shù)在A環(huán)上具有厶4-3-酮基，與黃體酮和睪酮一致；有的在 C17上具有B -羥基、a -乙炔基或甲酮基；有的在 C10上無(wú)角甲基，與雌激素 相同。鑒別試驗(yàn)：呈色反響 1. 與強(qiáng)酸的呈色反響：許多甾體激素能與硫酸、磷酸、高氯酸、鹽酸等呈色，其中 與與硫酸的呈色反響應(yīng)用較廣。藥品名稱 顏色 熒光 加水稀釋后的變化醋酸可的松 黃或微帶橙 無(wú) 顏色消失溶液澄清氫化 可的松 棕黃至紅 綠色 黃至橙黃微帶綠色熒光

4、，少量絮狀沉淀潑尼松 橙 無(wú) 黃至藍(lán)綠潑尼 松龍 深紅 無(wú) 紅色消失， 灰色絮狀沉淀炔雌醇 深紅 黃綠地塞米松磷酸鈉 黃或紅棕 無(wú)某些 甾體激素藥物與硫酸 -乙醇或硫酸 -甲醇作用而呈色。 如甲睪酮： 取本品數(shù)毫克， 加硫酸 -乙醇 2： 11ml 使溶解，即顯黃色并帶有黃綠色熒光。2. 官能團(tuán)的呈色反響： C17-a -醇酮基的呈色反響：皮質(zhì)激素類藥物分子結(jié)構(gòu)中 C17位上的a -醇酮基具有復(fù)原性，能與氧化劑四氮唑鹽反響而呈色。如醋酸潑尼松在堿性條件下與氯化三苯四氮唑試液反響生成紅色。 酮基的呈色反響：甾體激素分子結(jié)構(gòu)中含有酮基，如C3-酮基和C20-酮基，均能與2, 4-二硝基苯肼、異煙肼

5、、硫酸苯肼等羰基試劑呈色。例如，醋酸可的松、氫化可的松等，其甲 醇或乙醇溶液加新制的硫酸苯肼試液，加熱即顯黃色。 甲酮基的呈色反響：甾體激素分子結(jié)構(gòu)中含有甲酮基乙基活潑亞甲基時(shí)，能與亞硝基鐵氰 化鈉、間二硝基酚、芳香醛類反響呈色。其中亞硝基鐵氰化鈉反響可認(rèn)為是黃體酮的靈敏、 專屬的鑒別方法，在一定的條件下，黃體酮顯藍(lán)紫色，其他常用甾體激素均不顯藍(lán)紫色，而呈現(xiàn)淡橙色或不顯色。 有機(jī)氟的呈色反響： 一些含氟的甾體激素藥物 如醋酸氟輕松、 醋酸地塞米松等 ，經(jīng)氧瓶 燃燒法后生成無(wú)機(jī)氟化物，在12%醋酸鈉的稀醋酸中與茜素氟藍(lán)及硝基亞鈰起反響，即顯藍(lán)紫色。 酚羥基的呈色反響： C3 為酚羥基的雌激素，

6、能與重氮苯磺酸反響生成紅色偶氮染料。 如 JP 13收載的苯甲酸雌二醇利用該法進(jìn)行鑒別。沉淀反響1.與斐林試劑的沉淀反響皮質(zhì)激素的C17- a -醇酮基具強(qiáng)復(fù)原作用，與斐林試劑反應(yīng)生成橙紅色氧化亞銅沉淀。2. 與氨制硝酸銀的沉淀反響皮質(zhì)激素的 C17-a -醇酮基具強(qiáng)復(fù)原性，與氨制硝酸銀反響，生 成黑色金屬銀沉淀。3. 與硝酸銀的沉淀反響含炔基的甾體激素，如炔雌醇、炔諾酮，遇硝酸銀獎(jiǎng)試液，即生成白 色的炔雌醇銀鹽沉淀及白色炔諾酮銀沉淀。4. 與硝酸 -硝酸銀的沉淀反響甾體激素如丙酸氯貝他索、丙酸貝氯米松中有機(jī)結(jié)合的氯， 經(jīng)加熱或進(jìn)行有機(jī)破壞生成無(wú)機(jī)氯化物，再在硝酸酸性條件下與硝酸銀作用，生成氯

7、化銀的 白色沉淀。制備衍生物測(cè)定其熔點(diǎn)利用甾醇、甾酮類藥物與一些試劑反響生成酯、肟、縮氨脲，或利用 醇制堿液水解甾體酯類生成相應(yīng)的母體，然后測(cè)定其熔點(diǎn)進(jìn)行鑒別。1. 酯的生成：如炔雌醇制成苯甲酸酯。2. 酮肟的生成：如黃體酮與鹽酸羥胺作用生成黃體酮雙酮肟為例。3. 縮氨基脲的生成：ChP收載苯丙酸諾龍生成其縮氨基脲衍生物。4. 酯的水解：如丙酸睪酮用醇制氫氧化鉀水解為例。水解產(chǎn)物的反響戊酸雌二醇、已酸羥孕酮等藥物，先在堿液中水解，經(jīng)酸化加熱分別產(chǎn)生戊 酸、己酸特臭，用此法可鑒別這兩種藥物。紫外分光光度法丙酸倍氯米松的乙醇溶液20卩g/ml 在239nm波長(zhǎng)處有吸收。紅外分光光度法薄層色譜法中國(guó)

8、藥典收載的炔諾酮、炔雌醚片、丙酸睪酮注射液、倍他米松 磷酸鈉、醋酸氯地孕酮片、醋酸甲羥孕酮片、醋酸潑尼松片、苯丙酸諾龍注射液、戊酸雌二 醇注射液、苯甲酸雌二醇注射液、復(fù)方己酸孕酮注射液、復(fù)方炔諾酮片、復(fù)方炔諾酮膜、復(fù) 方炔諾孕酮片、復(fù)方炔諾孕酮滴丸、哈西奈德軟膏等甾體激素藥物均采用了薄層色譜標(biāo)準(zhǔn) 品對(duì)照法進(jìn)行鑒別。高效液相色譜法：中國(guó)藥典中醋酸氟輕松軟膏、 醋酸氟氫可的松軟膏、 醋酸曲安奈德軟膏、 丙酸倍氯米松軟膏、 地塞米松磷酸鈉滴眼液、哈西奈德乳膏等的鑒別試驗(yàn)。特殊雜質(zhì)的檢查 1. 游離磷酸：地塞米松磷酸鈉中國(guó)藥典收載 、氫化可的松磷酸鈉中檢查 游離磷酸。高法系利用酸性溶液中磷酸與鉬酸作用

9、生成磷鉬酸銨，再經(jīng)復(fù)原形成磷鉬酸藍(lán)鉬藍(lán)，在740nm波長(zhǎng)處有吸收。2. 甲醇和丙酮：地塞米松磷酸鈉中檢查甲醇和丙酮。本品在生產(chǎn)工藝中大量使用甲醇和丙酮，因此藥典規(guī)定作甲醇與丙酮?dú)埩袅繖z查。甲醇限量為 3.1ng. 3. 雌酮：炔雌醇中檢查雌酮。本法系根據(jù)雌酮的 Zimmermann反響來(lái)檢查的。即在羰基的鄰位具有活潑亞甲基的化合物在堿 性的氫氧化鉀乙醇溶液中，與間二硝基苯反響呈紅藍(lán)色。雌酮是17-酮甾類，因此根據(jù)該反響生成紫紅色化合物。在此操作中，如果不使用純度高的間二硝基苯，那么呈褐色而難于判 定。4. 硒中國(guó)藥典中規(guī)定醋酸地塞米松、醋酸氟輕松要檢查"硒" 。其原理為在氧

10、瓶燃燒破壞后的吸收液中加鹽酸羥胺，使Se6+復(fù)原為Se4+,在pH2.0 ± 0.2的條件下與2.3-二氨基萘試液作用，生成4, 5-苯丙苯硒二唑，用環(huán)己烷提取，于378nm波長(zhǎng)處呈吸收。5. 其他甾體 薄層色譜法 高效液相色譜法含量測(cè)定 1. 高效液相色譜法 2. 紫外分光光度法3.四氮唑比色法四氮唑鹽的種類：2,3,4-三苯基氯化四氮唑TTC,也稱紅四氮唑RT,其復(fù)原產(chǎn)物為不溶于水的深紅色三苯甲zan藍(lán)四氮唑BT，即3，3'-二甲氧苯基-雙-4，4'- 3, 5- 二苯基氯化四氮唑,其復(fù)原產(chǎn)物為暗藍(lán)色的雙甲 zan 反響原理：皮質(zhì)激素 C17-a -醇酮基-C0-

11、CH20H具有復(fù)原性，在強(qiáng)堿性試液中能將四氮唑鹽定量地復(fù)原為有色甲zan.生成顏色隨所用試劑和條件的不同而定,多為紅色或藍(lán)色。測(cè)定方法：中國(guó)藥典采用氯化三苯四氮唑法。例如醋酸潑尼松龍軟膏的含量測(cè)定。討論： 基團(tuán)影響：C11-酮基的反響速度快于 C11-羥基甾體；C21-羥基酯化后較其母體羥基的反響 速度慢；當(dāng)酯化了的基團(tuán)為三甲基醋酸酯、磷酸酯或琥珀酸酯時(shí),反響更慢。 溶劑和水分的影響：含水量大時(shí)會(huì)使呈色速度減慢，但含水量不超過(guò)5%寸，對(duì)結(jié)果幾無(wú)影響,因此可采用 95%乙醇。 堿的種類及參加順序的影響：在各類堿中，采用氫氧化四甲基銨能得到滿意結(jié)果，故最為 常用。以先加四氮唑鹽溶液再加堿液較好。

12、空氣中氧及光線的影響：反響及其產(chǎn)物對(duì)光敏感，故應(yīng)避光。 溫度與時(shí)間的影響：一般室溫或30C恒溫條件下顯色。中國(guó)藥典多數(shù)25 C暗處反響4045min. 4.異煙肼比色法甾體激素 C3-酮基及某些其他位置上的酮基都能在酸性條件下與羰基 試劑異煙肼縮合形成黃色異煙腙,在一定波長(zhǎng)下具有吸收。某些具有兩個(gè)酮基的甾體激素可形成雙腙,如黃體酮、可的松和氫化可的松等。本法主要用于甾體激素制劑的測(cè)定,如倍他米松軟膏、哈西奈德軟膏、倍他米松磷酸鈉及其注射液等的含量測(cè)定。討論：溶劑的選擇：只用用無(wú)水乙醇和無(wú)水甲醇才能得到滿意的結(jié)果，其他溶劑因受到異 煙肼鹽酸鹽在其中溶解度的限制不能采用。 酸的種類和濃度以及異煙肼

13、的濃度：當(dāng)酸與異煙肼試劑的摩爾比為2： 1時(shí)可獲得吸收度。 水分、溫度、光線和氧的影響：當(dāng)溶劑中含水量增高，吸收度隨之降低。溫度升高，反響 加速。當(dāng)在具塞玻管中不致使溶劑揮發(fā)及吸收水分的情況下，光與氧不影響反響。 關(guān)于反響的專屬性：具有 4-3-酮基的甾體激素在室溫不到1h即可定量地與酸性異煙肼反應(yīng)。其他甾酮化合物需在長(zhǎng)時(shí)間放置或加熱前方可反響完全，因此在上述反響條件下，本法對(duì)厶4-3-酮甾體具有一定的專屬性。5. Kober 反響比色法 Kober 反響是指雌激素與硫酸 -乙醇共熱呈色， 用水或稀硫酸稀釋后重新 加熱發(fā)生顏色改變，并在 515 nm附近有吸收。Kober反響有兩步：與硫酸-乙

14、醇光熱產(chǎn)生黃色， 在465nm處有吸收；加水或稀硫酸稀釋， 重新加熱顯桃紅色，在 515 nm處有吸收。中國(guó)藥典采用本法測(cè)定炔雌醇片及復(fù)方炔諾孕酮片、復(fù)方炔諾孕酮滴丸、復(fù)方左炔諾孕酮滴 丸中的炔雌醇的含量。維生素類藥物維生素 A維生素A的結(jié)構(gòu)為具有一個(gè)共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烯，因而具有許多立 體異構(gòu)體。天然維生素A主要是全反式維生素 A.性質(zhì)：具紫外吸收，易氧化變質(zhì)，能與三氯化銻呈色， 與氯仿、乙醚、環(huán)己烷或是由醚任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。鑒別試驗(yàn)三氯化銻反響Carr-price 反響：維生素A在飽和無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇氯仿溶 液中，即顯藍(lán)色，漸變成紫紅色。紫外吸收光譜：維生素 A分子中含

15、有5個(gè)共軛雙鍵，其無(wú)水乙醇溶液在波長(zhǎng)326nm處有吸收。當(dāng)在演算催化下加熱，那么發(fā)生去水反響而生成脫水維生素A.后者比維生素 A多一個(gè)共軛雙鍵，使其吸收峰紅移，同時(shí)在350390nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)出現(xiàn) 3個(gè)吸收峰。薄層色譜：以硅膠 G為吸附劑，環(huán)己烷-乙醚80: 20為流動(dòng)相。含量測(cè)定：紫外分光光度法三點(diǎn)校正法原理： 本法是在三個(gè)波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度， 根據(jù)校正公式計(jì)算吸收度 A 校正值后， 再計(jì)算含量， 故本法亦稱 " 三點(diǎn)校正法 " 。原理如下： 雜質(zhì)的吸收在310340nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)呈一條直線，且隨波長(zhǎng)的增大，吸收度變小。 物質(zhì)對(duì)光的吸收具有加和性。三點(diǎn)波長(zhǎng)的選擇法第 1點(diǎn)：

16、選擇維生素 A的吸收波長(zhǎng)即入1。 第2點(diǎn)和第3點(diǎn)：在吸收波長(zhǎng)的兩側(cè)各選一點(diǎn)即入 2和入3。等波長(zhǎng)差法：在入1的左右各選一點(diǎn)為入2和入3,使入3-入1=入1-入2.維生素A醋酸酯。等吸收法：在入1的左右各選一點(diǎn)為入2和入3，使A入2= A入3=6/7 A入1.維生素A醇。 雜質(zhì)吸收：對(duì)維生素 A的測(cè)定有影響的雜質(zhì)主要有：維生素A2和維生素A3;維生素A的氧化產(chǎn)物環(huán)氧化物、維生素A醛和維生素 A酸；維生素A在光照下產(chǎn)生的無(wú)生物活性的聚合物鯨醇；維生素AWord是學(xué)生和職場(chǎng)人士最常用的一款辦公軟件之一，99.99% 的人知道它，但其實(shí)，這個(gè)軟件背后，還有一大批隱藏技能你不知道。掌握他們，你將開啟新世界的大門。Tab+Enter,在編過(guò)號(hào)以后，會(huì)自動(dòng)編號(hào)段落Ctrl + D 調(diào)出字體欄，配合 Tab+Enter 全鍵盤操作吧Ctrl + L 左對(duì)齊， Ctrl + R 右對(duì)齊， Ctrl + E 居中Ctrl + F 查找，Ctrl + H 替換。然后關(guān)于替