公開(kāi)課課件半成品(最新)

1、2.2.2 2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體授課人：授課人： 陳峰陳峰滅活的病毒滅活的病毒有絲分裂有絲分裂不同不同DNADNA的的兩個(gè)細(xì)胞兩個(gè)細(xì)胞融合融合兩個(gè)完整的兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞思考一：思考一：抗體是有什么細(xì)胞分泌的？抗體是有什么細(xì)胞分泌的？漿細(xì)胞漿細(xì)胞思考二：思考二：利用已學(xué)知識(shí)，考慮漿細(xì)胞是怎么利用已學(xué)知識(shí)，考慮漿細(xì)胞是怎么得到的？得到的？抗原抗原刺激刺激漿細(xì)胞漿細(xì)胞B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞抗體抗體抗體純度低抗體純度低特異性差特異性差不能增殖不能增殖抗體產(chǎn)量低抗體產(chǎn)量低漿細(xì)胞不純漿細(xì)胞不純抗原不純抗原不純思考三：思考三：那么那么如何來(lái)提高抗體的純度呢？如何

2、來(lái)提高抗體的純度呢？選用小鼠選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞與與漿細(xì)漿細(xì)胞胞融合后進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)融合后進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)思考四：思考四：又如何提高抗體的產(chǎn)量呢？又如何提高抗體的產(chǎn)量呢？篩選單一的漿細(xì)胞篩選單一的漿細(xì)胞漿細(xì)胞漿細(xì)胞1 1漿細(xì)胞漿細(xì)胞2 2漿細(xì)胞漿細(xì)胞3 3漿細(xì)胞漿細(xì)胞4 4抗體抗體1 1抗體抗體2 2抗體抗體3 3抗體抗體4 4白板拼圖生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合融合的原理融合的原理融合前處理融合前處理用用_和和_去細(xì)胞壁去細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用用_ 或或_ _ 使使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)融合細(xì)胞分散后誘導(dǎo)融合融合的方法融合的方法

3、物理法物理法 ?；瘜W(xué)法化學(xué)法 。物理法物理法 ?；瘜W(xué)法化學(xué)法 。 生物法生物法 。最終的結(jié)果最終的結(jié)果 獲得雜種獲得雜種 。 獲得雜種獲得雜種 。該技術(shù)意義該技術(shù)意義克服不同種生物克服不同種生物 上的障礙上的障礙該技術(shù)應(yīng)用該技術(shù)應(yīng)用獲得優(yōu)良的雜種植株獲得優(yōu)良的雜種植株 制造制造 。細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性纖維素酶纖維素酶果膠酶果膠酶胰蛋白酶胰蛋白酶膠原蛋白酶膠原蛋白酶離心，振動(dòng)，電激離心，振動(dòng)，電激滅活的病毒滅活的病毒PEGPEG離心，振動(dòng)，電激離心，振動(dòng)，電激PEGPEG植株植株細(xì)胞細(xì)胞遠(yuǎn)緣雜交遠(yuǎn)緣雜交單克隆抗體單克隆抗體如下圖所示為細(xì)胞融合技術(shù)的一些過(guò)程：如下圖所示為細(xì)胞融合技術(shù)的一些

4、過(guò)程：（1 1）若）若A A、B B細(xì)胞為植物細(xì)胞，那么這樣的細(xì)胞細(xì)胞為植物細(xì)胞，那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉了已經(jīng)用酶降解脫掉了 ，這種酶可能，這種酶可能是是 和和 ，D D細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞培養(yǎng)成植株用到植株用到 技術(shù)技術(shù)（2 2）若）若A A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞，細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞，B B細(xì)胞為經(jīng)過(guò)免疫的細(xì)胞為經(jīng)過(guò)免疫的B B淋巴細(xì)胞，那么淋巴細(xì)胞，那么D D細(xì)胞稱為細(xì)胞稱為 細(xì)胞，細(xì)胞，A A、B B誘導(dǎo)融合成誘導(dǎo)融合成C C用到的特有方法為用到的特有方法為 ，C C雙核細(xì)胞經(jīng)過(guò)雙核細(xì)胞經(jīng)過(guò) 形成形成D D單核細(xì)胞單核細(xì)胞（3 3）在動(dòng)物細(xì)胞融合之前，需要將所選取的組織）在動(dòng)物細(xì)胞融合之前，需

5、要將所選取的組織分散開(kāi)，可用分散開(kāi)，可用 或或 處理。處理。（4 4） 技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。技術(shù)的基礎(chǔ)。（5 5）有一個(gè)制藥廠設(shè)想生產(chǎn)抗）有一個(gè)制藥廠設(shè)想生產(chǎn)抗H7N9H7N9的單克隆抗體，的單克隆抗體，請(qǐng)你幫助完成制備單克隆抗體的步驟：請(qǐng)你幫助完成制備單克隆抗體的步驟：用用 對(duì)小鼠進(jìn)行注射，從產(chǎn)生免疫反應(yīng)對(duì)小鼠進(jìn)行注射，從產(chǎn)生免疫反應(yīng)小鼠的脾臟中得到相應(yīng)的小鼠的脾臟中得到相應(yīng)的 細(xì)胞；細(xì)胞；設(shè)法將鼠的設(shè)法將鼠的與淋巴細(xì)胞融合，與淋巴細(xì)胞融合，再用特定的再用特定的 培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，得到培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，得到既能既能 ，又能，又能的的 細(xì)胞；細(xì)胞；對(duì)上述細(xì)胞，還需進(jìn)行對(duì)上述細(xì)胞，還需進(jìn)行和和 ，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞；抗體的細(xì)胞；將該細(xì)胞在體內(nèi)或?qū)⒃摷?xì)胞在體內(nèi)或培養(yǎng)，就可以從中培養(yǎng)，就可以從中提取出大量的能抗提取出大量的能