液相色譜儀操作規(guī)程LC-20A

1、液相色譜分析儀（lc-20a）一、開機前的準備工作1、流動相的制備：用雙重純水蒸憾器制取雙蒸水于超聲脫氣機脫氣后冷至室溫后備用（流動 相應(yīng)每天制備使用）2、鈣柱應(yīng)正確連接，注意柱子的連接方向。二、儀器操作步驟2、泵頭的沖洗：打開泵控制電源，將排液閥逆時針轉(zhuǎn)180使有字母的一端向上，按“purge" 鍵開始大流速沖洗管路（趕去流路中的氣泡或由于使用緩沖液作流動相后的結(jié)晶），3分鐘后, 大流量沖洗自動結(jié)束，將排液閥順時針轉(zhuǎn)到原位置。3、再打開柱箱、檢測器電源，雙擊“l(fā)csolution”進入工作站。4、儀器與工作站連機：點instrument on/off”鍵，儀器上的"ove

2、n”及"pump”燈亮， 己經(jīng)連接。5、設(shè)置柱箱溫度為80°c,檢測池溫度40°c,柱子流速為0. 2ml/min,點“download”將設(shè) 置的方法參數(shù)下載到儀器。6、方法下載到儀器到，儀器顯示“wait oven"柱箱開始升溫。7、儀器顯示“ready”后，點“r flow”圖標沖洗參比池20-30分鐘。8、再點“r flow”圖標沖洗樣品池20-30分鐘。9、點“balance"圖標進行基線平衡，平衡時間可以持續(xù)20-30分鐘，也可每隔10分鐘點一 次重復(fù)2-3次，基線穩(wěn)定后將流速以0. 1-0. 2 ml/min的速率調(diào)至0. 6ml

3、/min10、點“zeros”圖標將基線調(diào)零，穩(wěn)定后即可進樣。11、分析完成后，將柱箱溫度設(shè)為40°c并下載到儀器，將流速以0. 1-0.2 ml/min的速率調(diào) 至0. 2ml/min,以低流速沖洗柱子30-60分鐘。（流速降下來后，可以點"instrument on/off,> 將儀器與操作系統(tǒng)斷開，但在柱溫沒降下來前一定不能關(guān)泵，系統(tǒng)斷開后可按儀器操作面板 上的“pump”鍵將泵打開。此時可以將檢測器、柱箱電源關(guān)閉。柱子沖洗完成后，一定要先 按“pump”將泵關(guān)閉后再關(guān)閉電源）12、打印色譜分析報告。計算分析結(jié)果。將結(jié)果存盤后退出lcsolution系統(tǒng)。三、試

4、樣的制備用雙蒸水將待測樣品稀釋至1%-2%濃度，用0. 45um水相濾膜過濾備用。四、維護與保養(yǎng)鈣柱：1使用壓力為小于4mpa,平時使用時用2 lpao先升溫再降壓。不用排液閥時，應(yīng)關(guān)閉。2在80°c時分離效果最好，使用過程中流速要逐步加（每增加流速要在壓力穩(wěn)定后再增加）， 頻率 0. 1-0. 2 ml/mino3必須待色譜柱溫度降至室溫后方可停止流動相的輸送。4鈣柱只能使用純水作流動相，不用時用螺母封閉兩端后低溫保存防止水溫升高染菌污染柱 子。吸濾頭：不銹鋼燒結(jié)4-5um,過濾作用，此濾頭要長吋間浸入流動相中，防止氣泡進入泵后 入柱子。易堵塞表現(xiàn)為管路中有氣泡生成（1個月左右），

5、d泵壓力波動大于2個（用5%稀 硝酸超聲波清洗15分鐘，再用高 純水清洗15分鐘）泵頭：單向閥，兩個并聯(lián)泵交替工作以抵銷脈沖，最大使用流速5 ml/mino泵頭沖洗：打開泵開關(guān)，旋轉(zhuǎn)180度轉(zhuǎn)動排液閥，按purge鍵，大流量沖洗泵頭（趕走氣泡、 沖洗易結(jié)晶的流動相）3分鐘后會自動停止，也可以按purge鍵手動停止，關(guān)閉排液閥。 注意事項：1、大流量清洗時排液閥一定要轉(zhuǎn)到位，有字母一側(cè)向上。2、吸濾頭要長時間浸入水中3、管道過濾器為4-5um,易堵。（清洗：用甲醇、異丙醇、5-10%體積比稀硝酸浸泡后再超聲10-15分鐘）對于1 ml/min甲醇壓力為小于0. 5mpa是正常的。紅寶石：若有結(jié)晶

6、狀鹽或纖維膜易引起壓力波動（±0.3mpa的波動是止常的）解決措施：1、用稀硝酸作為流動相沖洗。2、直接用60-70°c熱水做流動相擰開2#口，接燒杯1-2小時。柱箱手相進樣閥一般情況下至少可以轉(zhuǎn)動4萬次，若出現(xiàn)進樣品滲液體、排液晶滲水則進樣閥壞。 每次更換柱子時都要查看壓力情況。色譜柱的損壞情況：1、填料塌陷（進口端2-3cm） 2、柱子兩頭過濾片易堵，引起壓力升高, 可以柱子反沖解決示差折光檢測器示差折光檢測器是根據(jù)不同物質(zhì)具有不同折射率來進行組分檢測的。凡是具 有與流動相折射率不同的組分，均可以使用這種檢測器。如果流動相選擇適當(dāng)，可以檢測所有的樣品組分。示差折光檢測器

7、分為反射式和折射式兩種。反射式示差折光檢測器是根據(jù)下 述原理制成的：光在兩種不同物質(zhì)界面的反射百分率與入射角和兩種物質(zhì)的折射率成正比。 如果入射角固定，光線反射百分率僅與這兩種物質(zhì)的沂射率成正比。光通過僅有流動相的參 比池時，由于流動相組成不變，故其折射率是固定的；光通過工作池時，由于存在待測組分 而使折射串改變，從而引起光強度的變化，測量光強度的變化，即可測出該組分濃度的變化。 偏轉(zhuǎn)式示差折光檢測器是根據(jù)下述原理：當(dāng)一束光透過折射率不同的兩種物質(zhì)時，此光束會 發(fā)生一定程度的偏轉(zhuǎn)，其偏轉(zhuǎn)程度正比于兩物質(zhì)折射率z差。示差折光檢測器的優(yōu)點是通用 性強，操作簡便；缺點是靈敏度低，最小檢出限約為io(

8、-7)g/ml,不能做痕量分析。此外， 由于洗脫液組成的變化會使折射率變化很大，因此，這種檢測器也不適用于梯度洗脫。另外, 溶劑溫度和壓力的變化述會導(dǎo)致基線不穩(wěn)定。折射率檢測的另一個缺點是既有可能產(chǎn)生正峰 又有可能產(chǎn)生負峰。1、iiplc的日常操作條件：溫度：1030°c；相對濕度80%；最好是恒溫、恒濕，遠離高 電磁干擾、高振動設(shè)備微波消解儀1、插上主機電源插座，打開位于主機正面右下方的黑色電源開關(guān)，此時顯示屏上顯示“上海 新儀微波化學(xué)科技有限公司”預(yù)熱30分鐘后使用。2、顯示完成出現(xiàn)提示選擇方案的頁而，3秒鐘后則顯示方案“00”按01 “確認”進入已保存 的01方案。3、方案“0

9、0-04”為微波消解單罐壓力主控（每個方案下最多可以預(yù)置6個升壓步驟，以“n 表示，按“預(yù)置”，此時“n”下顯示1 （第一步驟）然后按順序分別輸入“p”壓力（mpa） “t” 時間（分鐘）功率（1為400w 2 600w 3 800w 4 1000w）,設(shè)置完最后一步時 按“確認”，程序自動結(jié)束步驟輸入，屏上方提示:"no. 00* no. 00-04”鍵入數(shù)字按確認，主 機進入待啟動狀態(tài)，通過以上操作可以增加新的方案或覆蓋舊方案。注意事項:預(yù)置壓力時，第1步驟應(yīng)小于0. 5mpa,建議在0. 2-0. 5mpa （未知樣品或易反應(yīng)樣品先設(shè)0. 2mpa） 功率為1 （400w）時間

10、為2-3分鐘，之后每個步驟間壓力的升幅也須小于或等于0. 5mpa （避 免升壓過快導(dǎo)致劇烈反應(yīng)）若需要最高壓力在3-4mpa之間，則在壓力設(shè)置到2-3mpa時，時 間必須設(shè)置在5分鐘或以上，建議最高設(shè)置壓力小于等于4. ompa,功率在低壓（0-1.5mpa） 時可任意設(shè)置，在高壓（2-4mpa）時須設(shè)為400w或600w。開始做樣放入已經(jīng)裝好的消解罐，關(guān)上爐門，按位于主機止面右下方的“啟動”（此時程序沒有運行） 然后放下防護罩，按控制而板上的“運行”此時微波開始加熱，程序運行。運行時，左面箭頭所指的步驟為當(dāng)前運行的步驟，計時為倒計時顯示，壓力為實際壓力，若 需要更改當(dāng)前步驟運行時間，按“改時”，通過數(shù)字鍵重新輸入新的吋間后按確認。程序運行線束后，主機發(fā)出提示音，此時取出罐體冷卻。注意事項：若在按啟動前先按運行，則主機會發(fā)出警示，提示操作錯誤運行過程中，當(dāng)壓力處于穩(wěn)定或下降的階段