凍干粉針劑等非最終滅菌的無菌制劑檢查要點(diǎn)

1、【分享】凍干粉針劑等非最終滅苗的無菌制劑檢査要點(diǎn)凍卡粉針劑等非最終火菌的無菌制劑檢查要點(diǎn)防止微生物、熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素、微粒污染廠房設(shè)備生產(chǎn)工藝無菌檢査物料和中間產(chǎn)品人員各個階段（包括滅菌前的各階段）都必須采取預(yù)防措施，以盡可能降低污染、廠房廠房布局和建造潔凈度級別的標(biāo)準(zhǔn)關(guān)鍵操作區(qū)的空氣流向潔凈區(qū)的壓差潔凈區(qū)的清潔和消毒環(huán)境監(jiān)控（包括動態(tài)監(jiān)控）hvac系統(tǒng)的維護(hù)和監(jiān)控二、設(shè)備適用于產(chǎn)品的生產(chǎn)、清潔、消毒或滅菌盡可能采用密閉系統(tǒng)合理布置和安裝關(guān)鍵參數(shù)控制和記錄儀表的校準(zhǔn)設(shè)備的確認(rèn)、維護(hù)和維修設(shè)備的清潔、消毒或滅菌共用設(shè)備應(yīng)有防止交-義污染的措施設(shè)備應(yīng)在確認(rèn)的范圍內(nèi)使用三、工藝用水水處理設(shè)施及其分配

2、系統(tǒng)的設(shè)計、安裝和維護(hù)應(yīng)能確保供水達(dá)到適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。水系統(tǒng)的運(yùn)彳亍不應(yīng) 超越其設(shè)計能力注射用水的生產(chǎn)、貯存和分配方式應(yīng)能防止微生物生長水源、水處理設(shè)施及水的化學(xué)和生物學(xué)污染狀況應(yīng)定期監(jiān)測，必要時還應(yīng)監(jiān)測細(xì)菌內(nèi)毒素。監(jiān)測結(jié)果 以及所采取糾偏措施的記錄應(yīng)予歸檔四、生產(chǎn)工藝1、配制工序操作區(qū)的設(shè)置和潔凈度級別配制設(shè)備的選型配料處方稱量操作稱量記錄防止污染和交義污染的描施2、過濾工序過濾器的安裝位置過濾器的相關(guān)信息過濾器完整性試驗的方法過濾前后的完整性試驗和記錄過濾器的更換、消壽或滅菌發(fā)現(xiàn)過濾器出問題后的處理3、無菌灌裝工序關(guān)鍵操作區(qū)和生產(chǎn)設(shè)備消潔、消毒或滅菌動態(tài)環(huán)境的監(jiān)控?zé)o菌淋裝用各類物料、器具的

3、準(zhǔn)備或滅菌處理生產(chǎn)用氣體人員的無菌操作裝量控制培養(yǎng)基模擬灌裝驗證無菌檢驗樣品的取樣檢杳等英他活動不能影響正常的生產(chǎn)4、凍干工序凍干產(chǎn)晶的包裝形式、裝量凍干產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量凍干工藝?yán)€凍干工藝的驗證凍干產(chǎn)詁進(jìn)出冷凍十燥室的操作凍干機(jī)的滅菌凍干機(jī)關(guān)鍵參數(shù)控制和記錄儀農(nóng)的校準(zhǔn)管路的連接凍干的記錄五、無菌檢驗無菌空及環(huán)境監(jiān)控取樣計劃取樣量和檢驗量培養(yǎng)基和菌種管理無菌檢驗方法樣品表面消壽處理陽性檢驗結(jié)果的調(diào)杳和處理六、物料物料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物料的來源物料的取樣和檢驗物料的供應(yīng)商審計物料供應(yīng)商的變更七、中間產(chǎn)品的質(zhì)量控制應(yīng)特別注意監(jiān)控11'間產(chǎn)品微個物和細(xì)菌內(nèi)再索污染情況已配制的中間產(chǎn)品含量

4、檢測極為關(guān)鍵澄清度檢查可見異物檢查應(yīng)100 %檢查可制備含有可見異物的標(biāo)準(zhǔn)樣品對操作人員進(jìn)行培訓(xùn)八、人員人員的培訓(xùn)人員的衛(wèi)生習(xí)慣體檢檔案和匯總潔凈區(qū)內(nèi)人員的工作服及穿著無菌操作粉針千間凍t粉針劑培養(yǎng)基無菌灌裝模擬試驗是對粉針車間使用f2000/12/600型灌裝機(jī)在局部疔 級工作環(huán)境中進(jìn)行凍干粉針劑灌裝過程中所采川的各種方法和各種規(guī)程防止微生物污染的水平可以 達(dá)到可接受的合格標(biāo)準(zhǔn)的能力。通過檢查確認(rèn)找出粉針車間進(jìn)行凍干粉針劑灌裝作業(yè)過程中的控制要 求，為今后對粉針車間進(jìn)行凍干粉針劑灌裝作業(yè)管理確定依據(jù)。凍干粉針劑培養(yǎng)基無菌灌裝模擬試驗驗證方案方案制訂：制訂日期：方案批準(zhǔn)：批準(zhǔn)日期：目錄1 .概

5、括11.1目的11.2范圍11.3責(zé)任12. 確定可接受的合格標(biāo)23. 培養(yǎng)基性能測試23.1微生物生長性能試驗 23.2培養(yǎng)基無菌性試驗 24模擬分裝用無菌粉末24.1模擬分裝用無菌粉末應(yīng)具有的特性 24.2無菌性試驗34.3抑菌性試驗34.4溶解性試驗35模擬分裝過程操作規(guī)程及操作人員控制36操作過程及無菌環(huán)境控制與監(jiān)測46.1模擬分裝使用西林瓶及膠塞無菌性檢測46.2微生物控制與監(jiān)測46.3塵埃粒子監(jiān)測57取樣計劃及取樣點(diǎn)57.1取樣計劃57.2取樣點(diǎn)68模擬分裝68.1無菌粉針劑模擬分裝方法68.2液體培養(yǎng)基制備及進(jìn)入無菌分裝區(qū)方法68.3液體培養(yǎng)基分裝工具的選用及處理使用方法68.4

6、無菌粉針劑模擬分裝試驗78.5液體培養(yǎng)基分裝79微生物培養(yǎng)79.1陰性對照79.2陽性對照79.3試驗樣品培養(yǎng)710試驗結(jié)果評價811驗證制度及再驗證時間安排812確認(rèn)方案執(zhí)行f1期91、概括凍干粉針劑培養(yǎng)基無菌灌裝模擬試驗是在其他各個系統(tǒng)（諸如滅菌系統(tǒng)、公用系統(tǒng)、無菌環(huán)境保 持系統(tǒng)、設(shè)備驗證、設(shè)備清洗過程驗證等）驗證工作完成的基礎(chǔ)上進(jìn)行的。釆用培養(yǎng)基無菌灌裝模擬 試驗方法進(jìn)行。1.1、目的用和實(shí)際生產(chǎn)工藝相同的條件與操作方法（包括生產(chǎn)環(huán)境），向凍干制品容器（西林瓶）內(nèi)灌裝經(jīng)除 菌過濾器過濾的培養(yǎng)基，然后將此模擬制品在適當(dāng)條件下培養(yǎng)，以確認(rèn)工藝過程的可靠性。證明在凍 干粉針劑灌裝過程中所采用的

7、各種方法和各種規(guī)程以防止微牛物污染的水平達(dá)到可接受的合格標(biāo)準(zhǔn) 的能力，或提供保證所牛產(chǎn)產(chǎn)品的無菌性的可信限度達(dá)到可接受的合格標(biāo)準(zhǔn)的證據(jù)。1.2、范圍此驗證方案適川于粉針車間凍干粉針劑灌裝過程驗證。1.3、責(zé)任生產(chǎn)技術(shù)部、質(zhì)暈保證部、qc化驗室、粉針車間、設(shè)備部負(fù)責(zé)驗證方案的執(zhí)行，主耍工作內(nèi)容如下: 、編訂及實(shí)施驗證方案： 、實(shí)施確認(rèn)并提供確認(rèn)資料； 、匯編測試資料于最終報告內(nèi)； 、協(xié)調(diào)參與驗證過程的人員和部門，確保驗證的各項要求； 、將成功的結(jié)果及分裝過程的需求規(guī)范化，并制定相關(guān)文件待核準(zhǔn)下發(fā)。2、確定可接受的合格標(biāo)準(zhǔn)警戒限：可信限為95%時污染概率大于0.05%；合格限：可信限為95%時污染

8、概率小于0.1%。分裝量與污染控制數(shù)關(guān)系表模擬分裝數(shù)暈/瓶污染控制數(shù)量/瓶模擬分裝數(shù)量/瓶污染控制數(shù)暈/瓶3000 474204743 6294小于 162957751小于2775291 51小于33、培養(yǎng)基性能測試模擬分裝試驗采用胰u東大豆肉湯培養(yǎng)基，通過下述試驗對培養(yǎng)基微生物生長性能進(jìn)行確認(rèn)。首先 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程制備培養(yǎng)基并滅菌后備用。3.1微生物生長性能試驗將上述滅菌后的培養(yǎng)基分裝于100支試管中，在一半數(shù)量的試管中接種枯草桿菌,接種量為 100cfu；在另一半數(shù)量的試管中接種白色念珠菌，接種量為v100cfu。接種后蓋塞、封口，將 接種有枯草桿菌的試管放于3035°c下培養(yǎng)

9、7天，將接種有白色念珠菌的試管放于2025°c下培 養(yǎng)7天。7天內(nèi)至少有50%以上接種的各試管的培養(yǎng)基中應(yīng)出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長。3.2培養(yǎng)基無菌性試驗將上述滅菌后的培養(yǎng)基分裝于100支無菌試管中，蓋塞、封口。其中50支試管放于3035°c下培 養(yǎng)7天，同時將另外50支試管放于2025°c下培養(yǎng)7天。7天內(nèi)各試管培養(yǎng)基中應(yīng)無任何微生物 生長。4、模擬分裝過程操作規(guī)程及操作人員控制4.1、模擬分裝試驗小使用的西林瓶和膠塞的淸洗、滅菌，分裝設(shè)備的清洗、消毒，與產(chǎn)品接觸的分 裝設(shè)備部件的清洗、滅菌、安裝過程必須遵循與實(shí)際生產(chǎn)操作相同的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。4.2、灌裝機(jī)

10、灌裝速度保持與正常凍干粉針劑灌裝及半壓膠塞生產(chǎn)時的速度相同。4.3、所有參加模擬試驗的操作人員均應(yīng)經(jīng)過gmp、無菌操作、無菌更衣程序技術(shù)等相關(guān)知識的培訓(xùn) 并經(jīng)考核合格。4.4、參加模擬試驗的操作人員數(shù)及人員構(gòu)成應(yīng)嚴(yán)格控制，非規(guī)疋的驗證小組成員嚴(yán)禁在模擬試驗過 程中進(jìn)入模擬試驗現(xiàn)場，模擬試驗現(xiàn)場人員數(shù)不得超過5人，人員的進(jìn)入及退出應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序，減少不必要的人員進(jìn)入及退出次數(shù)。可進(jìn)入模擬試驗現(xiàn)場的人員名單如下:部門姓名設(shè)備部生產(chǎn)技術(shù)部qc化驗室qc化驗室粉針車間粉針車間部門姓名質(zhì)量保證部qc化驗室粉針車間粉針車間粉針車間粉針車間5、操作過程及無菌環(huán)境控制與監(jiān)測進(jìn)行模擬試驗過程中，對以下各

11、項進(jìn)行監(jiān)測。5.1、模擬試驗使用西林瓶及膠塞無菌性檢測：按第6條取樣計劃的規(guī)定要求，對模擬試驗使用的西林瓶及膠塞進(jìn)行取樣，檢測其無菌性，合格 標(biāo)準(zhǔn)為各樣品不得存在無菌性不合格情況。5.2、微生物控制與監(jiān)測： 、在模擬試驗過程中,對操作人員的無菌服、手套、眼鏡、胸前、前臂等部位的微生物數(shù)量進(jìn)行監(jiān) 測。其取樣方法、取樣頻率、取樣要求、取樣點(diǎn)分布見第6條取樣計劃。合格標(biāo)準(zhǔn)：手套全部檢出菌數(shù)2個、霉菌1個；一個操作人員雙臂、前胸的3個取樣點(diǎn)檢出菌數(shù)之和v 10個。 、對無菌區(qū)墻壁、門、設(shè)備以及操作人員可能接觸的各種表而進(jìn)行無菌程度檢驗。其取樣方法、取 樣點(diǎn)、取樣頻率見第6條取樣計劃。在進(jìn)行取樣時其取樣

12、而積應(yīng)保持在25cm2o合格標(biāo)準(zhǔn)：局部百級區(qū)全部檢出菌數(shù)v3個、霉菌v1個；萬級區(qū)全部檢出菌數(shù)v 10個、霉菌v2個，地面檢出菌數(shù)v25個、霉菌v3個。 、對空氣中微牛物數(shù)量進(jìn)行監(jiān)測，其取樣方法、取樣點(diǎn)、取樣頻率見第6條取樣計劃。合格標(biāo)準(zhǔn)：局部百級區(qū)全部檢出菌數(shù)1個；萬級區(qū)全部檢出菌數(shù)v 10個、霉菌v3個； 、微牛物數(shù)量監(jiān)測試驗所采用的培養(yǎng)基應(yīng)為經(jīng)過無菌及微牛物生長性能檢驗合格的培養(yǎng)基。 、污染調(diào)査、微生物鑒別方法、污染發(fā)生時應(yīng)采取的措施執(zhí)行相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作程序。5.3塵埃粒子監(jiān)測按第6條取樣計劃的規(guī)定要求，對灌裝室進(jìn)行空氣質(zhì)量監(jiān)測，其監(jiān)測結(jié)果應(yīng)能證明關(guān)鍵區(qū)域空氣 質(zhì)量達(dá)到百級潔凈區(qū)的空氣質(zhì)量標(biāo)

13、準(zhǔn)。6、取樣計劃及取樣點(diǎn)6.1取樣計劃：監(jiān)測項目取樣方法取樣頻率模擬試驗西林瓶無菌檢杳隨機(jī)取樣支模擬試驗使用膠寒無菌檢查隨機(jī)取樣枚操作人員無菌性檢查棉簽擦拭法取樣要求每灌裝500瓶取樣一次每次取樣10每灌裝500瓶取樣一次每次取樣1 0模擬試驗開始詢，試驗進(jìn)行一半時間，試驗結(jié)束后,分別對操作人員進(jìn)行取樣監(jiān)測 取樣時，被取樣的操作人員應(yīng)離開分裝機(jī)，在灌裝室的一角將 雙臂平伸，靜止不動,取樣人員按棉簽擦拭取樣法在最短時間內(nèi)取樣。每次對同一操作人員進(jìn)行取樣 監(jiān)測時，其取樣點(diǎn)應(yīng)不相同 無菌灌裝區(qū)無菌性檢查 棉簽擦拭法 模擬試驗開始前，試驗進(jìn)行一半時間，試驗結(jié)束 后，分別根據(jù)取樣點(diǎn)耍求對無菌區(qū)進(jìn)行取樣監(jiān)

14、測 根據(jù)取樣點(diǎn)耍求取樣，取樣面積固泄，每次 取樣面積為25cm2 .每次應(yīng)選擇不同位置取樣，英垂點(diǎn)為操作者可能接觸的各種表面。空氣微生物數(shù)量監(jiān)測 沉降平皿法 每小時取樣一次 根據(jù)取樣點(diǎn)分布圖布置 培養(yǎng)川l,各取樣點(diǎn)每小時更換取樣iiil進(jìn)行檢測。灌裝機(jī)附近設(shè)置四個以上的取樣平iiil連續(xù)暴蘇取樣。 另有一個平皿應(yīng)放置于微生物監(jiān)測室情況最差的部位。浮游菌采樣 每30分鐘監(jiān)測一次 取樣操作時應(yīng)由專人進(jìn)行塵埃粒子監(jiān)測 粒子計數(shù)器 每30分鐘監(jiān)測一次 監(jiān)測應(yīng)由專人按標(biāo)準(zhǔn)操作程 序進(jìn)行6.2取樣點(diǎn)： 、操作人員無菌性檢查取樣點(diǎn)：操作人員的無菌服、手套、眼鏡、胸前、前臂等部位。 、無菌灌裝區(qū)無菌性檢查取樣

15、點(diǎn)：其取樣重點(diǎn)為無菌灌裝區(qū)內(nèi)墻壁、門、設(shè)備衣面以及操作人員可 能接觸的各種表面。每次収樣應(yīng)包括：一側(cè)內(nèi)墻壁，無菌灌裝區(qū)內(nèi)門把手，膠塞淸洗機(jī)開門螺旋，灌 裝機(jī)上塞料斗，西林瓶火菌烘干隧道出口處理瓶轉(zhuǎn)盤，灌裝機(jī)控制面板，物料周轉(zhuǎn)桶、周轉(zhuǎn)托盤等處。 、空氣微生物數(shù)鼠監(jiān)測沉降平111l法取樣點(diǎn)：取樣點(diǎn)見附件凍干粉針劑培養(yǎng)基無菌灌裝模擬試驗空 氣微生物監(jiān)測沉降平皿取樣點(diǎn)分布圖。 、空氣微牛物數(shù)量監(jiān)測浮游菌測試取樣點(diǎn)：按無菌灌裝區(qū)而積等分進(jìn)行取樣,每個測試點(diǎn)距離1米, 測試點(diǎn)距內(nèi)墻面0.5米，另外在分裝面、膠塞淸洗機(jī)膠塞出口處、西林瓶火菌烘干隧道出口處分別增 加一個測試點(diǎn)。 、塵埃粒了監(jiān)測取樣點(diǎn)：按無菌灌

16、裝區(qū)面積等分進(jìn)行取樣，每個測試點(diǎn)距離1米，測試點(diǎn)距內(nèi)墻面 0.5米，另外在分裝而、膠塞清洗機(jī)膠塞出口處、西林瓶滅菌烘干隧道出口處分別增加一個測試點(diǎn)。7、模擬灌裝7.1凍干粉針劑模擬灌裝方法：凍干粉針劑模擬灌裝方法采用將一定量的無菌液體培養(yǎng)基通過灌裝機(jī)灌裝于西林瓶中并進(jìn)行半 壓膠塞，然后在凍干機(jī)內(nèi)進(jìn)行凍干試驗并進(jìn)行全壓膠塞，壓鋁蓋密封。模擬試驗量為5000瓶。7.2液體無菌培養(yǎng)基制備方法：將經(jīng)過第3項檢測合格的培養(yǎng)基在配制室內(nèi)按每30g加1 l注射用水的比例配制50l液體培養(yǎng)基備 用。7.3無菌粉針劑模擬灌裝試驗：7.3.1模擬灌裝試驗用曲林瓶數(shù)屋：按生產(chǎn)工藝要求準(zhǔn)備7000支無菌西林瓶。7.3

17、.2模擬灌裝試驗用膠塞數(shù)量：按生產(chǎn)工藝要求準(zhǔn)備7000枚無菌膠塞。7.3.3模擬灌裝試驗用鋁蓋數(shù)量：按生產(chǎn)工藝要求準(zhǔn)備7000枚鋁蓋。7.3.4模擬灌裝試驗用周轉(zhuǎn)盤數(shù)量：按生產(chǎn)工藝對周轉(zhuǎn)盤進(jìn)行淸潔消尊，以每只周轉(zhuǎn)盤裝量290支 計算，準(zhǔn)備25只潔凈周轉(zhuǎn)盤備用。7.3.5模擬灌裝試驗灌裝量：每支西林瓶灌裝7ml液體培養(yǎng)基。7.3.6液體培養(yǎng)基的除菌過濾：對在配制間配制好的液體培養(yǎng)基按正常生產(chǎn)工藝要求進(jìn)行除菌過濾并 存放于無菌儲罐內(nèi)。7.3.7灌裝機(jī)灌裝速度：灌裝機(jī)灌裝及半壓膠塞速度為260 k/分。7.3.8模擬灌裝試驗操作流程：按凍干粉針劑生產(chǎn)工藝流程進(jìn)行。7.3.9模擬灌裝試驗灌裝過程要求：

18、在進(jìn)行模擬灌裝試驗時，當(dāng)灌裝進(jìn)行至一半時，使設(shè)備空轉(zhuǎn)一小 時以上再繼續(xù)進(jìn)行模擬灌裝試驗，完成剩余的試驗制品的淋裝。7.3.10根據(jù)5.1項及6項要求，在每臺灌裝機(jī)分裝完成500瓶時，隨機(jī)抽取未分裝的西林瓶及膠 塞10枚供檢測使用。7.3.11凍干模擬試驗：培養(yǎng)基灌裝半壓膠塞以后，將半壓膠塞的樣品瓶轉(zhuǎn)移到凍干機(jī)內(nèi)，進(jìn)行凍干 的模擬試驗。試驗小，冷凍溫度不得低于3°c。凍干時間設(shè)定為24小時，抽其空、全壓塞后按生產(chǎn) 工藝耍求進(jìn)行鋁蓋密封作業(yè)。至此供試品已全部制備完成。7.3.12取樣原則：由于培養(yǎng)棊灌裝試驗分為兩個階段進(jìn)疔，因此將全部樣品分為阿個不同時間段進(jìn) 行樣品標(biāo)示，即第一階段灌裝試

19、驗開始時、第一階段灌裝試驗結(jié)束時、第二階段灌裝試驗開始時、第 二階段灌裝試驗結(jié)束時四個時間。其標(biāo)記法為“1-1”、“1-2”、“2-1”、“2-2”。標(biāo)記點(diǎn)為周轉(zhuǎn)盤。8、微生物培養(yǎng)陰性對照：在模擬灌裝過程屮，使用20支潔凈試管灌裝7ml培養(yǎng)基，密封后進(jìn)行現(xiàn)場用培養(yǎng)基無菌性試驗。 其20瓶陰性對照品應(yīng)均不得長菌。8.2陽性對照：為確認(rèn)無菊灌裝容器中培養(yǎng)基的促菌牛產(chǎn)能力，取低濃度菌接種于進(jìn)行挑戰(zhàn)性陽性試驗用的4支 對照試管屮，2瓶接種濃度v 100個微生物/0.1ml的枯草桿菌芽砲；另2瓶接種濃度v 100個微生 物/0.1ml的口色念珠菌。接種后將接種枯草桿菌芽砲的西林瓶放于3035°

20、c下培養(yǎng)7天，將接種 有口色念珠菌的西林瓶放于2025°c下培養(yǎng)7天。7天內(nèi)至少需有1支容器被證實(shí)有菌生產(chǎn)。如2 個容器內(nèi)均沒有菌增殖，則應(yīng)在確認(rèn)試驗操作有誤后，重復(fù)試驗1次，此次試驗應(yīng)在2個容器內(nèi)均 有菌生產(chǎn)的情況。8.3試驗樣品培養(yǎng)：模擬灌裝生產(chǎn)的全部樣品在適宜的溫度下培養(yǎng)14天，先在較低溫度（2025°c）下培養(yǎng)7天, 然后在較高溫度（3035°c）下培養(yǎng)7天,較低溫度與較離溫度一般相差10°c。在第三天和第七天 z間至少觀察培養(yǎng)基灌裝品的微生物的生產(chǎn)情況一次，并且在檢測期間的最后一天至少再觀察一次， 并對污染的瓶中的微牛物進(jìn)行總結(jié)其特點(diǎn)。若發(fā)現(xiàn)污染應(yīng)明確記錄樣品號及數(shù)量，同時應(yīng)檢查鋁蓋、 膠塞的密封情況；若冇破損應(yīng)記錄并檢杳其破損原因。対于微生物污染的樣品應(yīng)進(jìn)行鑒別試驗，鑒別 的內(nèi)容至少應(yīng)包括菌落、細(xì)胞形態(tài)學(xué)及革蘭染色特性等。9、試驗結(jié)果評價評價無菌模擬灌裝試驗結(jié)果的主耍指標(biāo)之一是微牛物污染水平，如果試驗結(jié)杲證明其污染水平超過規(guī) 定的合格限度（參見第2項規(guī)定），則應(yīng)立即停止牛產(chǎn)，調(diào)查并記錄污染產(chǎn)牛的原因。在調(diào)查結(jié)束并 采用相應(yīng)