VF-PR-18-A微生物控制菌檢查方法的驗證方案

1、編號：vf-pr-18-a文件類別：驗證文件部門：質(zhì)控部微生物控制菌檢查方法的驗證方案版次新訂起草人：驗證小組方案批準(zhǔn)人驗證實施日期年 月復(fù)印數(shù)份替代起草日期： 年 月 日審閱批準(zhǔn)日期： 年 月 日日批準(zhǔn)人：分發(fā)至：質(zhì)控部一、驗證方案的制定二、驗證方案的起草與審批三、微生物限度檢查方法（平皿法）驗證方案1. 驗證目的和原理2. 驗證方法步驟3. 試驗實施3.1試驗前的準(zhǔn)備3.2驗證試驗操作3.3試驗結(jié)果4. 驗證結(jié)果評價分析5. 附件微生物控制菌檢查方法的驗證-、驗證方案的制定驗證項目名稱微生物控制菌檢查方法的驗證編號vf-pr-18-a驗證小組組員成員職務(wù)姓名主要工作職責(zé)組長方案設(shè)計責(zé)任人副

2、組長方案實施負(fù)責(zé)人組員操作人操作人操作人操作人驗證方案組織實施進(jìn)度步驟實施日期二、驗證方案的起草與審批1驗證方案的起草驗證項目名稱微生物控制菌檢查方法的驗證編號vf-pr-18-a起草部門起草人簽名日期生產(chǎn)部年月日質(zhì)控部年月h2.驗證方案的審核與批準(zhǔn)驗證方案審核人：審核口期：年月口驗證方案批準(zhǔn)人：批準(zhǔn)日期：年刀日三、微生物控制菌檢查方法的驗證1. 驗證目的和原理1.1驗證目的本實驗是關(guān)于尿素維e乳膏的微生物控制菌檢查試驗的驗證。驗證結(jié)果應(yīng) 顯示尿素維e乳膏的微生物控制菌試驗方法，對檢品中可能存在的微生物沒有 抑制作用，符合驗證要求。1.2原理按照已建立的藥品微生物控制菌檢查方法，通過已知菌數(shù)試

3、液的對照菌的培 養(yǎng)對照，驗證其操作方法適合該藥品的微生物控制菌的檢測的正確性。2. 驗證方法步驟2.1驗證前的準(zhǔn)備將所有的平皿和稀釋劑都應(yīng)該嚴(yán)格按照相關(guān)的滅菌程序消 毒，以確保其對試驗的結(jié)果沒有影響。試驗菌應(yīng)選擇相應(yīng)的陰性對照菌。2.2驗證試驗的操作計劃用3個不同批號產(chǎn)品按照微生物控制菌檢測方法進(jìn) 行平行試驗，通過觀測是否長菌來判斷。2.3試驗結(jié)果可接受標(biāo)準(zhǔn) 用標(biāo)準(zhǔn)菌株評價方法“尿素維e乳膏的微生物控制 菌檢查試驗”對檢品中微生物的抑菌性。試驗結(jié)果應(yīng)顯示：陰性菌對照組不得檢 出陰性對照菌，試驗組應(yīng)檢出試驗菌。3 試驗實施3.1實驗前的準(zhǔn)備3.1.1主要儀器設(shè)備：高壓蒸汽滅菌器、恒溫烘干箱、凈化

4、工作臺、生物安全柜、 生化培養(yǎng)箱、隔水式恒溫培養(yǎng)箱。3.1.2操作環(huán)境：操作間應(yīng)該安裝空氣除菌過濾層流裝置。環(huán)境潔凈度不應(yīng)低于 10000級，局部潔凈度為100級（或防置同等級凈化工作臺）。操作間或凈化工 作臺的潔凈空氣應(yīng)該保持對環(huán)境形成正壓，不低于5pa。3.1.3試驗樣品：尿素維e乳膏批號 ,批號 ,批號3.1.4稀釋液和試劑：ph7.0無菌氯化鈉蛋白腺緩沖液。3.1.5器具：無菌培養(yǎng)皿（直徑90mm）無菌移液管5ml。3.1.6驗證用微生物名稱及其編號。實驗菌株的來源：菌株名稱編號大腸埃希菌(escherichia coli ) cmcc(b) 44102金黃色葡萄球菌(staphylo

5、coccus) cmcc(b) 26003銅綠假單胞菌(pseudomonan aeruginosa) cmcc(b) 10104編號由菌名首字母一一傳代代數(shù)一一制備h期組成3.1.7培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)商批號配制日期有效期營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基鹽乳糖培養(yǎng)基3.2驗證試驗操作3.2.1試驗菌種的制備和稀釋 接種大腸埃希菌，金黃色葡萄球菌、銅綠假單 胞菌的新鮮培養(yǎng)物至相應(yīng)的營養(yǎng)肉湯或bl增菌液10ml中，3035°c培養(yǎng)1824 小時。取各自菌懸液按lml加至9ml, 0.9%無菌氯化鈉溶液的10倍稀釋法，制 成含菌落數(shù)為50-100cfu的菌懸液。3.2.2驗證試驗操作用不同類別的微生物考察供試液

6、及檢驗程序的抑菌性，將試驗分為2組：a試驗組：準(zhǔn)確取供試品10g,加至含20ml無菌十四烷酸異丙酯和無菌玻璃珠的適宜容 器中，必要時可增加十四烷酸異丙酯的用量，充分振搖，使供試品溶解。然后加 入45°c的ph7.0無菌氯化鈉-蛋白腺緩沖液100ml,振搖510分鐘,萃取，靜 置使油水明顯分層，取其水層作為1： 10的供試液。準(zhǔn)確取規(guī)定量供試液及 50100cfu試驗菌加入相應(yīng)增菌培養(yǎng)基中，按照藥典依相應(yīng)控制菌檢查法進(jìn)行 檢查。b陰性對照組：采用大腸埃希菌作為陰性對照用菌。方法同試驗組。3.3試驗結(jié)果記錄：331證用微生物的稀釋度和接種量菌種名稱稀釋度(10")接種濃度(cf

7、u/ml)接種量(ml)大腸埃希菌金黃色葡萄球菌銅綠假單脆菌3.3.2試齡組和陰性對照組記錄結(jié)果st批號bl漠化十六烷基 三甲鍍瓊脂g染 色氧化 酶綠膿 菌素硝酸鹽 產(chǎn)氣42°c明 膠試驗組陰性對 照組銅綠 假單 胞菌批號營養(yǎng)肉湯升露醇氯化鈉平板g染色血漿凝固酶試驗組陰性對照組測試人/測試日期：復(fù)核人/復(fù)核日期:4.驗證結(jié)果評價分析質(zhì)控部負(fù)責(zé)各項驗證、試驗結(jié)果記錄，驗證小組根據(jù)驗證、試驗結(jié)果進(jìn)行評 價(附件1),起草驗證報告(附件2),報驗證委員會。(附件3)驗證委員會負(fù)責(zé)對驗證結(jié)果進(jìn)行綜合評審，做岀驗證結(jié)論，發(fā)放驗證證書(附 件4)。對驗證結(jié)果的評審應(yīng)包括：(1) 驗證試驗是否有遺

8、漏？(2) 驗證實施過程中對驗證方案有無修改？修改原因、依據(jù)以及是否經(jīng)過 批準(zhǔn)？(3) 驗證記錄是否完整？(4) 驗證試驗結(jié)果是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求？偏差及對偏差的說明合理？是否需進(jìn)一步補充試驗?5 附件驗證結(jié)果評價表驗證名稱微牛物控制菌 檢查方法的驗證編號vf-pr-18-a驗證 結(jié)果評價及建議確認(rèn)驗證小組：年月口驗證報告年 月 h至 年月 r,驗證小組根據(jù)批準(zhǔn)的編號為"vf-pr-18-a"的微生物控制菌檢查方法的驗證文件對微生物控制菌檢查法進(jìn)行了相關(guān)的一系列驗證工作，達(dá)到了預(yù)期效果，滋將有關(guān)事項說明如下：1. 驗證方案在實施過程中未做修改；2. 驗證方案各項性能指標(biāo)在驗證中未作變動，誤差在允許范圍內(nèi)；3. 驗證過程中結(jié)果符合規(guī)定要求，記錄完整屬實；4. 驗證結(jié)果符合設(shè)計要求和gmp原則要求，可以投入使用。以上情況，請驗證委員會審批!驗證小組年 月試驗報告審批表驗證名稱微生物控制菌 檢查方法的驗證編號vf-pr-18-a驗證內(nèi)容審閱 會簽質(zhì)量部審核人：年月h驗