天然藥化黃酮類(lèi)化合物

1、 黃酮類(lèi)化合物黃酮類(lèi)化合物Flavonoids本章內(nèi)容本章內(nèi)容 檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定提取與分離提取與分離理化性質(zhì)理化性質(zhì)結(jié)構(gòu)與分類(lèi)結(jié)構(gòu)與分類(lèi)學(xué)習(xí)要求學(xué)習(xí)要求1.1.掌握黃酮類(lèi)化合物的主要結(jié)構(gòu)類(lèi)型，掌握黃酮類(lèi)化合物的主要結(jié)構(gòu)類(lèi)型，了解結(jié)構(gòu)之間的生物合成關(guān)系；了解結(jié)構(gòu)之間的生物合成關(guān)系；2.2.掌握黃酮類(lèi)化合物的理化性質(zhì)和顯色掌握黃酮類(lèi)化合物的理化性質(zhì)和顯色反應(yīng)；反應(yīng)；3.3.掌握黃酮類(lèi)化合物的提取分離方法；掌握黃酮類(lèi)化合物的提取分離方法；4.4.掌握波譜法在黃酮類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)鑒定掌握波譜法在黃酮類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用，熟悉其色譜鑒定方法。中的應(yīng)用，熟悉其色譜鑒定方法。概述概述5黃酮類(lèi)化合

2、物概述經(jīng)典定義：經(jīng)典定義：基本母核為基本母核為2-苯基色原酮的一類(lèi)化合物苯基色原酮的一類(lèi)化合物現(xiàn)在定義：現(xiàn)在定義：泛指兩個(gè)苯環(huán)（泛指兩個(gè)苯環(huán)（A與與B環(huán)）通過(guò)三個(gè)碳原子相互環(huán)）通過(guò)三個(gè)碳原子相互 連接而成的一系列化合物連接而成的一系列化合物生源途徑：生源途徑：莽草酸和乙酸莽草酸和乙酸-丙二酸丙二酸復(fù)合途徑復(fù)合途徑6生源：生源： 由由三個(gè)三個(gè)丙二酸單酰丙二酸單酰輔酶輔酶A A和一個(gè)桂皮酰和一個(gè)桂皮酰輔酶輔酶A A生物合成而成生物合成而成. .黃酮類(lèi)化合物生物合成的基本途徑黃酮類(lèi)化合物生物合成的基本途徑OABC桂皮酰輔酶A丙二酰輔酶ACOCoACH2COCoACOOH3 X8結(jié)構(gòu)分類(lèi)結(jié)構(gòu)分類(lèi)黃酮類(lèi)

3、黃酮類(lèi)Flavone黃酮醇類(lèi)黃酮醇類(lèi)二氫黃酮二氫黃酮類(lèi)類(lèi)二氫黃酮二氫黃酮醇類(lèi)醇類(lèi)異黃酮類(lèi)異黃酮類(lèi)高異黃酮高異黃酮查耳酮查耳酮二氫查耳酮二氫查耳酮OOOHOOHOOO結(jié)構(gòu)分類(lèi)結(jié)構(gòu)分類(lèi)黃烷黃烷-3 -3，4- 4-二醇類(lèi)二醇類(lèi) 黃烷黃烷-3-3-醇醇類(lèi)類(lèi) 花色素花色素橙酮橙酮OOHOHOOHO+OOCH111213與異黃酮相比與異黃酮相比：C環(huán)與B環(huán)間多了1個(gè)CH2矢車(chē)菊素：矢車(chē)菊素：R1 = OH, R2 = H飛燕草素：飛燕草素：R1 = R2 = OH天竺葵素：天竺葵素：R1 = R2 = H錦葵花素：錦葵花素：R1 = R2 = OCH31617裸子植物：銀杏、卷柏18存在形式存在形式19

4、黃酮類(lèi)化合物的結(jié)構(gòu)和分類(lèi)黃酮類(lèi)化合物的結(jié)構(gòu)和分類(lèi)A環(huán)環(huán)B環(huán)環(huán)20D-glc、D-gal、D-xyl、L-rha、L-ara、 D-glucuronic acid槐糖（槐糖（glc 1- 2glc), 蕓香糖蕓香糖 （rha1-6glc)等。等。龍膽三糖（龍膽三糖（glc 1-6glc 1 2 fru) 槐三糖（槐三糖（glc 1-2 glc 1-2glc)第二節(jié)第二節(jié) 黃酮類(lèi)化合物的理化性黃酮類(lèi)化合物的理化性質(zhì)與顯色反應(yīng)質(zhì)與顯色反應(yīng)一、性狀一、性狀1 1、苷元多呈晶形，苷類(lèi)為無(wú)定形粉末；、苷元多呈晶形，苷類(lèi)為無(wú)定形粉末；2 2、顏色：多為黃色，與結(jié)構(gòu)中的、顏色：多為黃色，與結(jié)構(gòu)中的交叉共交叉共

5、軛體系和助色團(tuán)（軛體系和助色團(tuán)（-OH-OH、-OCH3-OCH3等）的等）的種類(lèi)、數(shù)目及取代位置有關(guān)種類(lèi)、數(shù)目及取代位置有關(guān)OOOH.23黃酮（醇）及其苷：黃酮（醇）及其苷：呈黃色呈黃色-灰黃色灰黃色 查耳酮：查耳酮：黃黃-橙色橙色 二氫黃酮（醇）二氫黃酮（醇）：無(wú)色 異黃酮：異黃酮：微黃色微黃色 花色素可隨著花色素可隨著pH值的變化顏色有所不同：值的變化顏色有所不同：24 游離苷元： 二氫黃酮（醇）、黃烷（醇）有旋光性 其余黃酮類(lèi)化合物無(wú)旋光性。 苷 類(lèi)： 因?yàn)樘欠肿拥囊耄哂行庑裕?且多為左旋。25黃酮類(lèi)化合物的理化性質(zhì)黃酮類(lèi)化合物的理化性質(zhì)： 難溶或不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、乙酸

6、乙酯、乙醚等有機(jī)溶劑。： 可溶于水、乙醇、甲醇中，難溶于苯和氯仿，連糖越多，水溶度越大 黃酮黃酮(醇醇),查爾酮：查爾酮：平面型分子二氫黃酮二氫黃酮(醇醇)，異黃酮：，異黃酮：非平面型分子花色素花色素：離子，具鹽的通性水中溶解度增加26酸性： 酚羥基 可溶于堿水、吡啶、中7 、4二二OH 7或或4OH 一般酚一般酚OH 5OH 3OH 提取、分離和鑒定中OOOHHOOH74OOOHOH27 來(lái)源：-吡喃酮環(huán)上的1-位氧原子未共用的電子對(duì)，顯微弱堿性，與強(qiáng)無(wú)機(jī)酸生成yang鹽。黃酮類(lèi)黃酮類(lèi)濃濃H2SO4 / 濃濃HCl鹽鹽H2O分解分解黃酮類(lèi)黃酮類(lèi) 顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) （一）還原反應(yīng)（一）還原反應(yīng)

7、（二）金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)（二）金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)29 含黃酮（醇）、二氫黃酮（醇） 30 顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) （一）還原反應(yīng)（一）還原反應(yīng)（二）金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)（二）金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)p 反應(yīng)官能團(tuán)：反應(yīng)官能團(tuán)：3-OH，4-C=O 5-OH，4-C=O 鄰二酚羥基鄰二酚羥基OOOHOHOHOH二氫黃酮、二氫黃酮醇二氫黃酮、二氫黃酮醇 天藍(lán)色熒光天藍(lán)色熒光其他黃酮類(lèi)其他黃酮類(lèi) 黃色黃色橙黃

8、橙黃褐色褐色 p 鋁鹽反應(yīng)鋁鹽反應(yīng) 三氯化鋁反應(yīng)三氯化鋁反應(yīng)與與1%AlCl3反應(yīng)顯反應(yīng)顯 黃色或黃色加深，黃色或黃色加深，UV下熒光增強(qiáng)下熒光增強(qiáng)金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)OOOOOOOOAlAlOOAl ClCl2Cl2p 鎂鹽反應(yīng)鎂鹽反應(yīng) 醋酸鎂反應(yīng)醋酸鎂反應(yīng)p 鉛鹽反應(yīng)鉛鹽反應(yīng) 醋酸鉛反應(yīng)醋酸鉛反應(yīng)與與1%醋酸鉛或堿式醋酸鉛，可生成醋酸鉛或堿式醋酸鉛，可生成 黃黃紅色沉淀紅色沉淀l 醋酸鉛：醋酸鉛： 鄰二酚羥基，或兼有鄰二酚羥基，或兼有3-OH，4-C=O 5-OH，4-C=Ol 堿式醋酸鉛：堿式醋酸鉛：一般酚羥基類(lèi)一般酚羥基類(lèi) 金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)鹽

9、反應(yīng)鹽反應(yīng) 鹽鹽-枸櫞酸反應(yīng)枸櫞酸反應(yīng)金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)OOOZrHOOHOHOHOClH2O 3-OH,4-C=O 5-OH,4-C=O+ 2%ZrOCl2H+ 穩(wěn)定，不退色穩(wěn)定，不退色 不穩(wěn)定分解，不穩(wěn)定分解，顯著褪色顯著褪色氯化鍶反應(yīng)氯化鍶反應(yīng)金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)OSrO+H2OOHOHSr+2HO-p 三氯化鐵反應(yīng)三氯化鐵反應(yīng)鄰二酚羥基鄰二酚羥基SrCl2OH-酚羥基酚羥基FeCl3在黃酮類(lèi)化合物中含有在黃酮類(lèi)化合物中含有氫鍵締合的酚羥基氫鍵締合的酚羥基時(shí)顏色才明顯時(shí)顏色才明顯 顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) （一）還原反應(yīng)（一）還原反應(yīng)（二）金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)

10、合反應(yīng)（二）金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)硼酸絡(luò)合反應(yīng)硼酸絡(luò)合反應(yīng)硼酸顯色反應(yīng)硼酸顯色反應(yīng)OOHOBOOOOOH+H3BO4亮黃色5-OH-黃酮黃酮6-OH-查兒酮查兒酮樣品樣品 硼酸硼酸草酸草酸枸櫞酸枸櫞酸黃色并有綠色熒光黃色并有綠色熒光黃色，無(wú)熒光黃色，無(wú)熒光丙酮丙酮 顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) （一）還原反應(yīng)（一）還原反應(yīng)（二）金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)（二）金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)堿性試劑顯色反應(yīng)堿性試劑顯色反應(yīng)p 黃酮類(lèi)黃酮類(lèi)日光下顯黃色或黃色加深日光下顯

11、黃色或黃色加深UV下顯熒光或熒光增強(qiáng)下顯熒光或熒光增強(qiáng)p 黃酮醇類(lèi)黃酮醇類(lèi)p 二氫黃酮類(lèi)二氫黃酮類(lèi)OH-顯橙顯橙黃色黃色OH-NaOH引起的色變不退引起的色變不退NH4OH引起的色變退去引起的色變退去空氣空氣OH-呈黃色呈黃色空氣空氣棕色棕色OOOHOHOHOOHOCH3OCH3OHOHHOHO-H+OOHOOHOHOHOOHOOHOHOOHOOHOHOOHOOHOHOOHOOHOHABCDOHOOHOOHOHOHOHFEOOHOOHG用化學(xué)方法鑒別用化學(xué)方法鑒別A-G小結(jié)小結(jié)1 1 概述概述p 概念：概念：C6-C3-C6 C6-C3-C6 、 2-2-苯基色原酮苯基色原酮p 結(jié)構(gòu)類(lèi)型：結(jié)構(gòu)

12、類(lèi)型： 劃分依據(jù)：劃分依據(jù)：C C環(huán)氧化程度、是否開(kāi)環(huán)、環(huán)氧化程度、是否開(kāi)環(huán)、B B環(huán)連接位置環(huán)連接位置 重要類(lèi)型：重要類(lèi)型：黃（醇）、二氫黃（醇）、（二氫）異黃黃（醇）、二氫黃（醇）、（二氫）異黃 查爾酮、橙酮查爾酮、橙酮p 生物合成：生物合成： B B環(huán)的來(lái)源：桂皮酸環(huán)的來(lái)源：桂皮酸 A A環(huán)的來(lái)源環(huán)的來(lái)源 ：丙二酸：丙二酸p 生物活性：生物活性： 主要活性及代表物主要活性及代表物小結(jié)小結(jié)2 2 理化性質(zhì)理化性質(zhì)一、性狀：一、性狀：p 顏色：顏色：多黃色多黃色 影響顏色深淺的主要因素：交叉共軛體系影響顏色深淺的主要因素：交叉共軛體系 助色團(tuán)及其位置。助色團(tuán)及其位置。p 物態(tài)：物態(tài)：多結(jié)晶、

13、無(wú)定型粉末多結(jié)晶、無(wú)定型粉末二、溶解性：二、溶解性：苷與苷元的區(qū)別苷與苷元的區(qū)別 影響苷元水溶性的因素：影響苷元水溶性的因素：三、酸性：三、酸性：來(lái)源來(lái)源 影響因素及規(guī)律：影響因素及規(guī)律：7,47,4 7/47/4 一般一般 5 5四、堿性：四、堿性：1-O1-O孤對(duì)電子孤對(duì)電子小結(jié)小結(jié)2 2 理化性質(zhì)理化性質(zhì)三、顯色反應(yīng)：三、顯色反應(yīng)：p 還原反應(yīng)：還原反應(yīng)：Mg-HClMg-HCl反應(yīng)：（二氫）黃（醇）反應(yīng)：（二氫）黃（醇） 橙紅橙紅- -紫紅紫紅- -紫紫- -藍(lán)藍(lán) NaBHNaBH4 4反應(yīng)：二氫黃反應(yīng)：二氫黃 紅紅- -紫紫p 金屬鹽絡(luò)合反應(yīng)：金屬鹽絡(luò)合反應(yīng)：AlClAlCl3 3反

14、應(yīng)：反應(yīng)： 黃色熒光黃色熒光 Mg(Ac)Mg(Ac)2 2反應(yīng)：二氫黃酮（醇）反應(yīng)：二氫黃酮（醇） 天藍(lán)色熒光天藍(lán)色熒光 Pb(Ac)Pb(Ac)2 2反應(yīng)：中性：鄰二酚羥反應(yīng)：中性：鄰二酚羥 黃黃- -紅色沉淀紅色沉淀 堿式：堿式： 鋯鹽鋯鹽- -枸櫞酸反應(yīng)：枸櫞酸反應(yīng)：3-OH,4C=O 3-OH,4C=O 黃色不退黃色不退 5-OH,4C=O 5-OH,4C=O 黃色退去黃色退去 氨性氨性SrClSrCl2 2反應(yīng)：鄰二酚羥反應(yīng)：鄰二酚羥 綠綠- -黑色黑色 FeClFeCl3 3反應(yīng)：酚羥基反應(yīng)：酚羥基 綠綠- -黑色黑色小結(jié)小結(jié)2 2 理化性質(zhì)理化性質(zhì)三、顯色反應(yīng)：三、顯色反應(yīng)：p

15、 硼酸絡(luò)合反應(yīng)：硼酸絡(luò)合反應(yīng)： 5-OH5-OH黃酮、黃酮、2-OH2-OH查爾酮查爾酮 亮黃色亮黃色p 堿性試劑顯色反應(yīng)：堿性試劑顯色反應(yīng)： 黃酮類(lèi)黃酮類(lèi) 日光下顏色加深，紫外下熒光增強(qiáng)日光下顏色加深，紫外下熒光增強(qiáng) 二氫黃酮二氫黃酮 橙橙- -黃色黃色 黃酮醇黃酮醇 黃色，通空氣變棕色黃色，通空氣變棕色第三節(jié)第三節(jié) 黃酮類(lèi)化合物的提取與黃酮類(lèi)化合物的提取與分離分離47黃酮類(lèi)化合物的提取和分離黃酮類(lèi)化合物的提取和分離：黃酮類(lèi)化合物的和 相似相溶與酸堿理論：苷元：極性小的溶劑，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等 回流提取苷及極性大的苷元： 用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇-水加熱提取 極性稍大的甙元一般

16、指：羥基黃酮、雙黃酮、 橙酮、查爾酮多糖苷類(lèi)：一般用沸水提取 48 49水或醇-水，加熱提取濃縮，加3-4倍醇濃縮，回收醇，加水依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取原理：原理：利用黃酮類(lèi)與其它雜質(zhì)極性利用黃酮類(lèi)與其它雜質(zhì)極性不同，選不同溶劑進(jìn)行萃取不同，選不同溶劑進(jìn)行萃取505152：主要用于含量較高的黃酮苷類(lèi)的精制：植物的甲醇提取物中，分次加入活性炭， 攪拌，靜置，定性檢查上清液無(wú)黃酮反應(yīng)時(shí)為止。 過(guò)濾，收集活性炭，依次用，對(duì)各部分洗脫液進(jìn)行定 性檢查。大部分黃酮苷類(lèi)可以用7%酚/水洗下。53 應(yīng)用范圍： 主要分離的化合物，應(yīng)用最為廣泛。 異黃酮、二氫黃酮（醇）、高度甲基化（乙?；┑狞S

17、 酮及黃酮醇 多羥基黃酮、黃酮醇及其苷類(lèi)：硅膠加水去活化：A 苷元 B 二糖苷 C 單糖苷 Rf：A C B54：氫鍵吸附（作用）：（先后） 母核上酚羥基增加，洗脫順序遞減 酚羥基數(shù)目相同時(shí)，有締合羥基 無(wú)締合羥基 苷元相同：三糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元 不同類(lèi)型黃酮類(lèi)化合物的洗脫先后順序?yàn)椋?異黃酮二氫黃酮醇黃酮黃酮醇。 分子中芳香程度高、共軛雙鍵多，則聚酰胺對(duì)其的吸附力強(qiáng)，故難于洗脫。：適合各種類(lèi)型的黃酮類(lèi)化合物，包括苷、苷元、查耳酮及二氫黃酮55：Sephadex-G和Sephadex-LH20吸附作用和分子篩 對(duì)，主要是, 吸附程度取決于游離酚羥基的數(shù)目，苷元的羥基數(shù)目越多，越難洗脫。

18、 對(duì)，主要是, 洗脫時(shí)按分子量由大到小先后洗脫下來(lái)。： 堿性水溶液（0.1mol/L NH4OH），鹽水溶液(0.05mol/L NaCl) 醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水，乙醇等。 其它溶劑：含水丙酮、甲醇-氯仿(凝膠會(huì)膨脹， 體積變大)。56原理： 黃酮類(lèi)化合物具有酸性、且不同數(shù)目和不同位置的酚羥基的酸性強(qiáng)弱不同適用范圍：適用于分離酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元酸性：酸性：7,4-OH 7-或或4-OH 一般酚一般酚OH5-OH溶于溶于5%NaHCO3溶于溶于5%NaCO3溶于不同濃度溶于不同濃度NaOH5758原理：利用分子中某些特定官能團(tuán)性質(zhì)進(jìn)行分離 具有鄰二酚羥基的成分，用醋酸鉛沉淀 不具有鄰

19、二酚羥基的成分，用堿式醋酸鉛沉淀 具有鄰二酚羥基的黃酮類(lèi)化合物還可以與硼酸反應(yīng)形成溶于水的硼酸絡(luò)合物，可以與不具有鄰二酚羥基的其它黃酮類(lèi)化合物分離提取分離方法實(shí)例提取分離方法實(shí)例1. 1.黃芩苷的提取分離方法黃芩苷的提取分離方法黃芩粗粉黃芩粗粉分別加分別加1010倍、倍、8 8倍量沸水煎煮兩次，倍量沸水煎煮兩次，每次每次1 1小時(shí)，小時(shí)，過(guò)濾過(guò)濾藥渣藥渣濾液濾液加鹽酸調(diào)加鹽酸調(diào)pH12, 80 pH12, 80 保溫保溫30min30min靜置，離心沉淀靜置，離心沉淀濾液濾液沉淀沉淀依次用水、依次用水、50%EtOH50%EtOH洗滌洗滌95%EtOH95%EtOH重結(jié)晶重結(jié)晶黃芩苷黃芩苷OO

20、OHOOHOOHOHOHCOOH2. 2.蘆丁的提取方法蘆丁的提取方法提取分離方法實(shí)例提取分離方法實(shí)例OOOHOHOHOHOglcOrha槐花米粗粉槐花米粗粉加加6 6倍量水和適量的硼砂，煮沸倍量水和適量的硼砂，煮沸邊攪拌邊加入石灰乳至邊攪拌邊加入石灰乳至pH89pH89，微沸，微沸趁熱抽濾趁熱抽濾藥渣藥渣濾液濾液在在6070 6070 條件下，加濃鹽酸調(diào)至條件下，加濃鹽酸調(diào)至pH5pH5，靜置，靜置抽濾抽濾濾液濾液沉淀（蘆丁粗品）沉淀（蘆丁粗品）第四節(jié)第四節(jié) 黃酮類(lèi)化合物的黃酮類(lèi)化合物的檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定色譜法色譜法紫外及可見(jiàn)光譜氫核磁共振譜碳核磁共振譜

21、質(zhì)譜63：多呈黃色： 鹽酸-鎂粉反應(yīng) 黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇 四氫硼鈉反應(yīng) 二氫黃酮（醇）類(lèi)：鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng) 3-OH、 5-OH黃酮鑒別 氨性氯化鍶反應(yīng) 鄰二酚羥基 硅膠 TLC 聚酰胺TLC 紙層析（PC）64：用于分析與鑒定弱極性黃酮類(lèi)化合物。 展開(kāi)劑：甲苯-甲酸甲酯-甲酸(5:4:1)，苯-甲醇，氯仿-甲醇等。： 適合于含游離酚OH的黃酮及其苷類(lèi)的分析。 聚酰胺對(duì)黃酮類(lèi)化合物吸附能力強(qiáng)，大多數(shù)展開(kāi)劑中含有醇、酸或水。： 適用于各種黃酮類(lèi)化合物及其苷類(lèi)的分析雙向紙層析雙向紙層析第一向：醇性溶劑展開(kāi)，例如第一向：醇性溶劑展開(kāi)，例如BAWBAW系統(tǒng)，系統(tǒng)，化合物極性大，吸附強(qiáng)。

22、化合物極性大，吸附強(qiáng)。第二向：水類(lèi)溶劑展開(kāi)，例如第二向：水類(lèi)溶劑展開(kāi)，例如2-6%2-6%醋酸水，醋酸水，化合物極性大，吸附弱。化合物極性大，吸附弱。66二、紫外及可見(jiàn)光譜法二、紫外及可見(jiàn)光譜法帶帶（240-280 nm）由苯甲?；到y(tǒng)引起由苯甲?；到y(tǒng)引起反應(yīng)反應(yīng)A環(huán)取代情況環(huán)取代情況 帶帶（300-400nm）由）由桂皮?；到y(tǒng)引起反應(yīng)桂皮酰基系統(tǒng)引起反應(yīng)B環(huán)取代情況環(huán)取代情況 （一）在甲醇溶液中的紫外光譜（一）在甲醇溶液中的紫外光譜1 1、黃酮、黃酮醇：、黃酮、黃酮醇：相同點(diǎn)：帶相同點(diǎn)：帶I I與帶與帶II II的吸的吸收峰強(qiáng)度均較大；收峰強(qiáng)度均較大；不同點(diǎn)：帶不同點(diǎn)：帶I I位置不同位

23、置不同黃酮帶黃酮帶I I（304350nm304350nm）黃酮醇帶黃酮醇帶I I（358385nm358385nm）a. b. 木犀草素和槲皮素在甲醇溶液中的木犀草素和槲皮素在甲醇溶液中的UVUV光譜數(shù)據(jù)光譜數(shù)據(jù)OOOHOHOHOH木犀草素木犀草素MeOH 253 MeOH 253 （帶（帶II II） 349 349 （帶（帶I I）OOOHOHOHOHOH槲皮素槲皮素MeOH 256 MeOH 256 （帶（帶II II） 371371（帶（帶I I）2 2、異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇、異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇 ：相同點(diǎn)：具有強(qiáng)的帶相同點(diǎn)：具有強(qiáng)的帶II II吸收，帶吸收，帶I I

24、很弱，很弱，常為肩峰。常為肩峰。不同點(diǎn)：不同點(diǎn)：異黃酮帶異黃酮帶II II（245270nm245270nm）二氫黃酮（醇）帶二氫黃酮（醇）帶II II（270295nm270295nm）（一）在甲醇溶液中的紫外光譜（一）在甲醇溶液中的紫外光譜異黃酮和二氫黃酮在甲醇溶液中的異黃酮和二氫黃酮在甲醇溶液中的UVUV光譜光譜OOOH7-羥基異黃酮羥基異黃酮OOHOHO4，7-二羥基二氫黃酮二羥基二氫黃酮200300400500 總結(jié)總結(jié)二氫黃酮二氫黃酮 黃酮醇黃酮醇黃酮黃酮查耳酮查耳酮橙酮橙酮異黃酮異黃酮 200300400(nm)3 3、查耳酮及橙酮類(lèi)：、查耳酮及橙酮類(lèi)：相同點(diǎn)：帶相同點(diǎn)：帶很強(qiáng)，

25、為主峰；帶很強(qiáng)，為主峰；帶較弱，較弱，為次強(qiáng)峰。為次強(qiáng)峰。不同點(diǎn)：橙酮常顯現(xiàn)不同點(diǎn)：橙酮常顯現(xiàn)3 34 4個(gè)吸收峰，個(gè)吸收峰， （一）在甲醇溶液中的紫外光譜（一）在甲醇溶液中的紫外光譜查耳酮和橙酮在甲醇溶液中的查耳酮和橙酮在甲醇溶液中的UVUV光譜光譜2 2，3 3，44三羥基查耳酮三羥基查耳酮33，4-4-二羥基橙酮二羥基橙酮OHOOHOHOHOCHOOHOH200300400500500340390nm370430nm75一般步驟： 1 待測(cè)樣品在甲醇中的UV光譜 2 待測(cè)樣品在甲醇中加入各種診斷試劑后的UV光譜 3 苷類(lèi)水解后的UV光譜。767778793. NaOAc/H3BO3：確定

26、鄰二酚OH。 在醋酸鈉堿性下，鄰二酚OH與硼酸絡(luò)合，引起峰帶紅移。804. AlCl3 5. AlCl3 /HCl： 分子中有3-OH，5-OH，鄰二酚OH時(shí)，可與Al3+絡(luò)合，引 起吸收峰紅移。： 黃酮醇3-OH 黃酮5-OH 二氫黃酮5-OH 鄰二酚OH81診斷試劑在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用診斷試劑在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用黃酮或黃酮醇黃酮或黃酮醇a. AlCl3/HCl與與MeOH中光譜比較中光譜比較 相同時(shí)，示無(wú)相同時(shí)，示無(wú)3-OH或或5-OH不同時(shí)，只有不同時(shí)，只有5-OH，無(wú)，無(wú)3-OH時(shí)，時(shí)，帶帶紅移紅移35-55nm 同時(shí)有同時(shí)有5-OH，3-OH時(shí)，時(shí)，帶帶紅移紅移50-60nm 只有只有3

27、-OH，帶帶紅移紅移60nmb. AlCl3/HCl與與AlCl3中光譜比較中光譜比較相同時(shí)，示無(wú)鄰二酚羥基相同時(shí)，示無(wú)鄰二酚羥基不同時(shí)，不同時(shí)，B環(huán)有鄰二酚羥基，環(huán)有鄰二酚羥基，帶帶紅移紅移35-55nm A，B環(huán)有鄰二酚羥基，環(huán)有鄰二酚羥基，帶帶紅移紅移50-60nm82診斷試劑對(duì)黃酮類(lèi)化合物診斷試劑對(duì)黃酮類(lèi)化合物UVUV譜圖的影響及結(jié)構(gòu)的關(guān)系譜圖的影響及結(jié)構(gòu)的關(guān)系83診斷試劑對(duì)黃酮類(lèi)化合物診斷試劑對(duì)黃酮類(lèi)化合物UVUV譜圖的影響及結(jié)構(gòu)的關(guān)系譜圖的影響及結(jié)構(gòu)的關(guān)系三、黃酮類(lèi)化合物的三、黃酮類(lèi)化合物的1HNMR譜特征譜特征 B環(huán)質(zhì)環(huán)質(zhì)子信號(hào)子信號(hào)C環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子信號(hào)信號(hào)A環(huán)質(zhì)環(huán)質(zhì)子信號(hào)子信號(hào)8

28、510345678910111213H3C-C0.9Ar-O-CH33.868.510.5124.65.9910CR2=CH-RRCOOHRCHO常用溶劑的質(zhì)子的化常用溶劑的質(zhì)子的化學(xué)位移值學(xué)位移值22.18687H-2常作為單峰常作為單峰出現(xiàn)在較低場(chǎng)區(qū)出現(xiàn)在較低場(chǎng)區(qū)88實(shí)例實(shí)例8990H-29192 5.76.9 (d, J = 2.5 Hz) 5.76.9 (d, J = 2.5 Hz)93 7.98.2 (d, J = 9.0 Hz)6.77.1 (dd, J=9.0, 2.5 Hz) 6.77.0 (d, J = 2.5 Hz)H-5：較低場(chǎng)較低場(chǎng) （受羰基的負(fù)屏蔽效應(yīng)（受羰基的負(fù)屏蔽

29、效應(yīng))94H-2,6: 7.1-8.1，d, J=8HzH-3,5: 6.5-7.1，d, J=8HzC環(huán)對(duì)環(huán)對(duì)H-2,6的去屏蔽效應(yīng)的去屏蔽效應(yīng)95H-2H-6黃酮類(lèi)黃酮類(lèi)3,4-OH及及3-OH,4-OMe7.2-7.3, d7.3-7.5, dd黃酮醇類(lèi)黃酮醇類(lèi)3,4-OH及及3-OH,4-OMe7.5-7.7, d7.6-7.9, dd黃酮醇類(lèi)黃酮醇類(lèi)3-OMe,4-OH7.6-7.8, d7.4-7.6, dd黃酮醇類(lèi)黃酮醇類(lèi)3,4-OH,3-O-糖糖7.2-7.5, d7.3-7.7, dd對(duì)于黃酮與黃酮醇對(duì)于黃酮與黃酮醇H-5作為一個(gè)二重峰作為一個(gè)二重峰(d, J=8.5 Hz)出現(xiàn)在出現(xiàn)在6.7-7.1處處H-2(d, J=2.5 Hz)出現(xiàn)在出現(xiàn)在7.2及及H-6(dd, J=8.5, 2.5Hz)信號(hào)出現(xiàn)在信號(hào)出現(xiàn)在7.9異黃酮、二氫黃酮及二氫異黃酮異黃酮、二氫黃酮及二氫異黃酮H-2,5,6作為一個(gè)多重峰出現(xiàn)在作為一個(gè)多重峰出現(xiàn)在6.7-7.1二氫黃酮二氫黃酮97 若若3 位和位和5 位取代基相同時(shí)位取代基相同時(shí)，H-2 , H-6 作為一個(gè)單峰，出現(xiàn)在作為一個(gè)單峰，出現(xiàn)在 6.50 7.50。 若若3 位和位和5 位取代基不相同時(shí)位取代基不相同時(shí)， H-2 , H-6 將以不同的化學(xué)位