胰島素工藝流程說明

1、-作者xxxx-日期xxxx胰島素工藝流程說明【精品文檔】重組人胰島素產(chǎn)品生產(chǎn)工藝流程菌種擴(kuò)培 對(duì)從菌種庫中取出的菌種進(jìn)行活化及初步擴(kuò)大培養(yǎng)種子罐培養(yǎng) 在種子罐中對(duì)菌種進(jìn)行進(jìn)一步的擴(kuò)大培養(yǎng)，至菌種到對(duì)數(shù)生長期時(shí)轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐培養(yǎng)發(fā)酵罐培養(yǎng)分兩階段進(jìn)行控制，第一階段主要通過控制溶氧和補(bǔ)加甘油使菌體達(dá)到富集的目的，第二階段通過補(bǔ)加甲醇使菌體進(jìn)行高密度表達(dá)目的產(chǎn)物，HPLC檢測(cè)目的產(chǎn)物含量發(fā)酵液固液分離目的產(chǎn)物存在于發(fā)酵液上清中，此步驟主要控制目的產(chǎn)物收率P1純化通過兩步柱層析，分別去除發(fā)酵上清液中的色素和雜蛋白利用紫外檢測(cè)儀控制目的產(chǎn)物收率，主要試劑為乙醇與異丙醇P1沉淀、干燥調(diào)節(jié)PH值，使P1沉淀，

2、再經(jīng)離心干燥，得中間體I固體P2純化控溫進(jìn)行轉(zhuǎn)肽反應(yīng)，主要試劑為DMSO與1,4-丁二醇 再通過柱層析進(jìn)行提純，主要試劑為異丙醇P2沉淀、干燥調(diào)節(jié)PH值，使P2沉淀，再經(jīng)離心干燥，得中間體II固體脫帽 通過控制濕度與溫度進(jìn)行脫帽反應(yīng)，得到終產(chǎn)物胰島素 主要試劑為丙酮，產(chǎn)品為半固體成品粗純化 經(jīng)過兩步柱層析對(duì)胰島素進(jìn)行提純，試劑為Tris-HCl和異丙醇 通過超濾對(duì)提純后的胰島素進(jìn)行濃縮，通過管道傳遞到下工序成品精純化 通過制備色譜對(duì)胰島素粗品進(jìn)行精制，主要試劑為色譜乙腈 然后經(jīng)兩步結(jié)晶后通過管道過濾除菌到百級(jí)區(qū)過濾凍干 對(duì)胰島素成品進(jìn)行一次結(jié)晶和水洗 對(duì)水洗后的胰島素進(jìn)行過濾除菌后凍干，即得胰

3、島素成品重組人胰島素生產(chǎn)工藝流程功能間分布工序功能間名稱主要操作菌種菌種室菌種儲(chǔ)藏培養(yǎng)基準(zhǔn)備間培養(yǎng)基配制、消毒、無菌服消毒接種室在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行無菌接種，菌種并瓶擴(kuò)培室菌種的搖瓶培養(yǎng)菌種洗衣菌種區(qū)無菌服清洗發(fā)酵發(fā)酵室種子培養(yǎng)、發(fā)酵培養(yǎng)控制室發(fā)酵過程控制發(fā)酵配料室發(fā)酵配料固液分離過濾室發(fā)酵液過濾分離洗衣洗濾布間濾布清洗中間體IP1純化區(qū)中間體I柱純化沉淀干燥室I中間體I沉淀、干燥中間體IIP2純化轉(zhuǎn)肽操作、中間體II柱純化沉淀干燥室II中間體II沉淀、干燥脫帽室脫帽操作成品粗純化粗純配液室P1、P2、粗純化配液粗純化區(qū)成品粗純化柱純化、超濾清洗室P1、P2、粗純化區(qū)玻璃儀器及工具清洗成品精純化精純配液室精純化區(qū)配液冷室結(jié)晶產(chǎn)物低溫靜置精純化區(qū)胰島素成品