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1、1965年,法國(guó)科學(xué)家Jacob和Mood提出證實(shí)了操縱子作為調(diào)節(jié)細(xì)菌代謝的分子機(jī)制1980年,Sanger設(shè)計(jì)出一種測(cè)定DNA分子內(nèi)核苷酸序列的方法1983年,美國(guó)遺傳學(xué)家 McCIintock發(fā)現(xiàn)可移動(dòng)的遺傳因子分子生物學(xué)主要研究?jī)?nèi)容:1.重組DNA技術(shù)2基因表達(dá)調(diào)控研究 3生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研 究4基因組、功能基因與生物信息學(xué)研究1. 真核細(xì)胞染色體的組成,蛋白質(zhì)和dna2. 組蛋白有如下特征1進(jìn)化上的極端保守性2無(wú)組織特異性3肽鏈上氨基酸的不 對(duì)稱性4組蛋白的修飾作用3. 堿性氨基酸集中分布在 N端的鏈上4. C值:一種生物單倍體基因組dna的總稱為C值。5. C值反?,F(xiàn)象:是指c值
2、往往與種系進(jìn)化的復(fù)雜程度不一致,某些低等的生物卻具有較大 的C值。6. 真核細(xì)胞DNA序列大致可被分為三類:一不重復(fù)序列結(jié)構(gòu)基因根本上屬于不重復(fù)序列, 二中度重復(fù)系列,三高度重復(fù)系列衛(wèi)星 DNA7. 真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):真核基因組龐大,一般都遠(yuǎn)大于原核生物的基因組,真 核基因組存在大量的重復(fù)序列真核基因組的大局部為非編碼序列,占整個(gè)基因組序列的 90%以上,該特點(diǎn)是真核生物與細(xì)菌和病毒之間最主要的區(qū)別真核基因組的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子真核基因是斷裂基因,有內(nèi)含子結(jié)構(gòu)真核基因組存在大量的順式作用元件,包括啟動(dòng)子,增強(qiáng)子,沉默子真核基因組中存在大量的DNA多態(tài)性真核基因組具有端粒結(jié)構(gòu)多態(tài)性是指D
3、NA序列中發(fā)生變異而導(dǎo)致的個(gè)體間核苷酸序列的差異,主要包括單核苷酸多態(tài)性single nucleotide polymorphism,SNP ,和串聯(lián)重復(fù)序列多態(tài)性tandem repeatspolymorphiem9. 端粒是真核生物線性基因組dna末端的一種特殊結(jié)構(gòu), 它是一段dna序列和蛋白質(zhì)形成的 復(fù)合體,10. 端粒酶:是逆轉(zhuǎn)錄酶,該酶由RNA及蛋白質(zhì)組成,可以延長(zhǎng)染色體上的端粒,從而增強(qiáng)細(xì)胞的增殖能力,端粒酶在正常人體組織中的活性被抑制,在腫瘤中被重新激活,端粒酶可能參與腫瘤的惡性轉(zhuǎn)化。11.原核細(xì)胞dna的特點(diǎn):結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)練,存在轉(zhuǎn)錄單兀,有重疊基因,12.環(huán)狀dna雙鏈的復(fù)制分為
4、0型,滾環(huán)型,D環(huán)型13.單鏈結(jié)合蛋白 (single-strand binding protein,SSB 蛋白):保證被解鏈酶解開的單鏈在復(fù)制完成前能保持單鏈結(jié)構(gòu),它以四聚體形式存在于復(fù)制叉,待單鏈復(fù)制完成后才離開,重新進(jìn)入循環(huán)。大腸桿菌復(fù)制起始點(diǎn),不常用的稱oriH損傷修復(fù)無(wú)過失修復(fù)【I直接修復(fù)光修復(fù),轉(zhuǎn)甲基修復(fù)U切除修復(fù)堿基切除修復(fù),核苷酸切除修復(fù)川錯(cuò)配修復(fù)】有過失修復(fù)的轉(zhuǎn)座,或稱移位transposition :是由可移位因子介導(dǎo)的遺傳物質(zhì)重排現(xiàn)象。17. 轉(zhuǎn)座子transposon,Tn:是存在于染色體 dna上可自主復(fù)制和位移的根本單位,18. 轉(zhuǎn)座子分為兩大類:插入序列inse
5、rtional sequence,IS 和復(fù)合型轉(zhuǎn)座子,19. 轉(zhuǎn)座作用的遺傳學(xué)效應(yīng):轉(zhuǎn)座引起插入突變,轉(zhuǎn)座產(chǎn)生新的基因,轉(zhuǎn)座產(chǎn)生的染 色體畸變,sin gel n ucleotide poymorphism 單核苷酸多態(tài)性,指基因組dna序列中由于單個(gè)核苷酸的突變而引起的多態(tài)性,1啟動(dòng)子(promoter ):是基因轉(zhuǎn)錄起始所必須的一段DNA序列,是基因表達(dá)調(diào)控的上游順式作用元件之一。的編輯:是某些 RNA特別是mRNA前體的一種加工方式。如插入,刪除?;蛉〈恍┖塑?酸殘基,導(dǎo)致 DNA所編碼的遺傳信息的改變,因?yàn)榻?jīng)過編輯的mRNA序列發(fā)生了不同于模版的變化。3核酶:指一類具有催化功能的R
6、NA分子。的再編碼包括:+1、-1移碼,核糖體跳躍,終止子通讀。5核仁小RNA(snoRNA)參與RNA化學(xué)修飾,snoRNA上的D 盒是甲基化酶的識(shí)別為點(diǎn)。6核小RNA(snRNA與這些RNA相結(jié)合的核蛋白參與 RNA的剪切。法那么:多數(shù)細(xì)胞核 mRNA前體內(nèi)含子的5 '邊界序列為GU,3'邊界序列為AG.8原核生物:半衰期短,以多順反子的形式存在。真核生物:5 '帶帽,3 '加尾,內(nèi)含子剪切。序列(shine-dalgarno sequenee):原核生物起始密碼子上游712個(gè)核苷酸處有一被稱為 SD序列的保守區(qū)。10.增強(qiáng)子特點(diǎn):遠(yuǎn)距離效應(yīng),無(wú)方向性,順式
7、調(diào)節(jié),無(wú)物種和基因的特異性,具有組織特 異性,有相位性,有的增強(qiáng)子可以對(duì)外部信號(hào)產(chǎn)生反響區(qū):這個(gè)區(qū)的中央大約位于起點(diǎn)上游1Obp處,又稱-10區(qū)。Hogness區(qū):位于轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)上游 -25-30bp處的共同序列 TATAAA也稱TATA區(qū)。12真核細(xì)胞RNA聚合酶的特性:酶 1:轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,45srRNA;對(duì)鵝膏蕈堿不敏感酶 2: hnRNA,敏感酶3: tRNA,存在物種特異性13. 大腸桿菌0因子的功能:070,廣泛;032,熱休克;054,氮代謝RNA聚合酶受利福平和利福霉素的抑制14. 大腸桿菌中的終止子分為:依賴于p因子,不依賴于 p因子的終止15. 轉(zhuǎn)錄延伸過程中,可在電鏡下觀察到羽
8、毛狀。原因:在同一個(gè)dna模板上有多個(gè)轉(zhuǎn)錄同時(shí)進(jìn)行;轉(zhuǎn)錄尚未完成翻譯已經(jīng)開始;真核生物不存在此現(xiàn)象1. 同工tRNA(eongnate tRNA)由于一種氨基酸可能有多個(gè)密碼子,因此有多個(gè)tRNA來(lái)識(shí)別這些密碼子,即多個(gè) tRNA代表一種氨基酸,我們將幾個(gè)代表相同氨基酸的tRNA稱為同工tRNA2. 蛋白質(zhì)合成的各階段:1.氨基酸的活化2.肽鏈的起始3.肽鏈的延伸4.肽鏈的終止5.折疊和 加工3. 蛋白質(zhì)前體的加工:端 fMet或Met的加工2.二硫鍵的形成3.特定氨基酸的修飾 4.切除新 生肽鏈中的非功能片段4. 分子伴侶(molecularchaperone )是一類序列上沒有相關(guān)性擔(dān)憂共
9、同功能的保守性蛋白質(zhì),它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)能幫助其他多肽進(jìn)行正確的折疊、組裝、運(yùn)轉(zhuǎn)和降解。分子伴侶家族(熱休克蛋白.伴侶素)能在細(xì)胞內(nèi)輔助新生肽鏈正確折疊的蛋白質(zhì)。J5. 嘌呤霉素是通過提前釋放肽鏈來(lái)抑制蛋白質(zhì)合成的。6. 幾類主要蛋白運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制分泌:蛋白質(zhì)在結(jié)合核糖體上合成,并翻譯運(yùn)轉(zhuǎn)同步機(jī)制運(yùn)輸 (免疫球蛋白 卵蛋白 激素 水解酶)細(xì)胞器發(fā)育:蛋白質(zhì)在游離核糖體上合成,以翻譯后運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制運(yùn)輸(核、葉綠體、線 粒體)膜的形成兩種機(jī)制兼有(質(zhì)膜 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 類囊體中的蛋白質(zhì))7. 信號(hào)肽(signal peptide):在起始密碼子后,有一段編碼疏水性氨基酸序列的RNA區(qū)域, 這個(gè)氨基酸的序列就被稱為。1簡(jiǎn)述
10、代謝物對(duì)基因表達(dá)調(diào)控的兩種方式。答:轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控轉(zhuǎn)錄后水平上的調(diào)控,包括mRNA加工成熟水平上的調(diào)控和翻譯水平上的調(diào)控2在原核生物中營(yíng)養(yǎng)狀況和環(huán)境因素基因表達(dá)起舉足輕重的作用。在真核生物中激素水平和發(fā)育階段是基因表達(dá)調(diào)控的最主要手段。3阻遏蛋白repressor起著阻止結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄的作用4細(xì)菌應(yīng)急反響:信號(hào)是鳥苷四磷酸ppGPP和鳥苷五磷酸pppGpp,產(chǎn)生這兩種誘導(dǎo)物空 載 tRNA5. 弱化子attenuation 位于轉(zhuǎn)錄開始區(qū)的一種內(nèi)部終止子。1根據(jù)對(duì)刺激的反響模式,可分成組成性表達(dá)和選擇性表達(dá)。2. 管家基因具備以下特點(diǎn) 1.是細(xì)胞結(jié)構(gòu)和代謝過程中所必須的基因,例如編碼rRNA、肌動(dòng)蛋白、微管蛋白等的基因。2通常能夠保持較高的表達(dá)量3. 真核生物中反式作用因子的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域有螺旋轉(zhuǎn)角螺旋HTH、堿性螺旋-環(huán)-螺旋bHLH、鋅指zinefinger、堿性亮氨酸拉鏈 bZIP。4. 根據(jù)DNA復(fù)性動(dòng)力學(xué),DNA序列可以分成哪四種類型單一序列、輕度重復(fù)序列、中度重 復(fù)序歹U、咼度重復(fù)序歹U5真核生物DNA水平上的基因表達(dá)調(diào)控1 “
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