24食品添加劑番茄紅素合成產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)

1、食品添加劑 番茄紅素（合成）1 生產(chǎn)工藝由用于食品的其他類胡蘿卜素生產(chǎn)中常用的合成中間體，經(jīng)過維蒂希聚合反應(yīng)制備而成的合成番茄紅素。商業(yè)上用于食品的配方型番茄紅素制劑，是將其配制成懸浮于食用油中的乳液或水溶型的粉末。2 性狀番茄紅素晶體為紅色，幾乎不溶于水，溶于氯仿等有機(jī)溶劑，對熱、光、空氣和濕度均敏感，容易氧化。項 目指 標(biāo)檢驗方法番茄紅素含量，%總番茄紅素96附錄a中a.1全反式 番茄紅素70干燥失重，% 0.5gb 5009.3減壓干燥法鉛（pb），mg/kg1gb 5009.12阿樸-12-番茄紅素醛，%0.15附錄a中a.2三苯基氧膦(tppo)，%0.01附錄a中a.3 3 技術(shù)要

2、求附錄a檢驗方法 a.1 總番茄紅素含量和全反式番茄紅素的含量的測定a.1.1 方法原理用高效液相色譜法在下列條件下測定總番茄紅素含量和全反式番茄紅素的含量a.1.2 試劑和材料(注意：所有溶劑均應(yīng)為色譜級)a.1.2.1 正己烷。a.1.2.2 用0.025%特丁基對苯二酚（bht）穩(wěn)定的四氫呋喃。a.1.2.3 n-乙基二異丙胺。a.1.2.4 番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品純度95。a.1.3 儀器和設(shè)備a.1.3.1紫外/可見分光光度計，配備1cm吸收池。a.1.3.2 高效液相色譜系統(tǒng)，配備合適的泵、進(jìn)樣器、色譜柱恒溫箱和積分儀。a.1.3.3 色譜柱：2根相連的不銹鋼柱（250x4.0 mm）。a

3、.1.3.4 固定相：nucleosil 300-5，5mma.1.3.5 hplc條件流速： 0.8 ml/min進(jìn)樣量： 20 µl柱溫： 20檢測波長： 470 nm流動相： 0.15% n-乙基二異丙胺的正己烷溶液（v/v）a.1.3.6 hplc測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品5.5-6.5mg，置100ml量瓶中，加入特丁基對苯二酚（bht）穩(wěn)定的四氫呋喃5ml使溶解，用正己烷稀釋至刻度。作為hplc測定用標(biāo)準(zhǔn)品溶液。a.1.3.7 分光光度測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密量取上述hplc測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液5.0ml，置100ml量瓶中，用正己烷稀釋至刻度。作為分光光度測定用標(biāo)準(zhǔn)溶

4、液。a.1.3.8 樣品溶液精密稱取本品4.5-5.5mg，置100ml量瓶中，加入特丁基對苯二酚（bht）穩(wěn)定的四氫呋喃5ml使溶解，用正己烷稀釋至刻度。a.1.4 分析步驟與結(jié)果計算a.1.4.1 分光光度法測定番茄紅素：a.1.4.1.1 分析步驟用1cm吸收池，以正己烷為空白，在最大吸收波長處（大約470nm）測定上述分光光度測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸收值。a.1.4.1.2 結(jié)果計算： (a.1)式中：cst分光光度測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液中番茄紅素的濃度（mg/l）；a最大吸收波長處的吸收度；3450全反式番茄紅素在正己烷中的吸收系數(shù)a；10000稀釋系數(shù)。a.1.4.2 hplc分析測定：a.1.

5、4.2.1 分析步驟重復(fù)進(jìn)樣20mlhplc測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液，記錄測定出的番茄紅素異構(gòu)體的總峰面積（除去溶劑峰），從重復(fù)進(jìn)樣中計算峰面積平均值，并按下式計算番茄紅素響應(yīng)因子(rf):(a.2)式中： rf番茄紅素的響應(yīng)因子（au x l/mg）； ast番茄紅素總峰面積的平均值（au）； cst分光光度測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液中番茄紅素的濃度（mg/l）； 20由分光光度測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液制備hplc測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋系數(shù)；取樣品溶液進(jìn)樣，并記錄所有番茄紅素異構(gòu)體的峰面積。a.1.4.2.2 結(jié)果計算保留時間：番茄紅素異構(gòu)體相對保留時間*絕對保留時間（約）13-順式-番茄紅素9-順式-番茄紅素全-反式-番茄

6、紅素5-順式-番茄紅素0.60.81.01.114min19min22min24min*相對于全-反式-番茄紅素按下式計算總番茄紅素的含量：總番茄紅素(%)= (atrans+a5cis+a9cis+a13cis+axcis) ×0.1 × 100 (a.3)rf × ws式中： atrans全-反式-番茄紅素峰面積(au)； a5cis,a9cis,和a13cis5順式，9順式和13順式番茄紅素的峰面積(au)； axcis如檢測到其它順式異構(gòu)體的峰面積(au)； 0.1樣品溶解的體積(l)； rf番茄紅素的響應(yīng)因子(auxl/mg)； ws樣品取樣量(mg)。

7、按下式計算全-反式-番茄紅素的含量：全-反式-番茄紅素（） atrans × 0.1 ×100 rf×wsa.2 阿樸-12-番茄紅素醛的測定a.2.1 方法原理高效液相色譜法a.2.2 試劑(注意：所有溶劑均應(yīng)為色譜級)a.2.2.1 正己烷。a.2.2.2 三乙胺（tea）。a.2.2.3 四氫呋喃（thf）。a.2.2.4 用特丁基對苯二酚（bht）穩(wěn)定的甲苯（0.5g特丁基對苯二酚（bht）溶于1000ml甲苯中）。a.2.2.5 阿樸-12-番茄紅素醛（也叫番茄紅素c25-醛）標(biāo)準(zhǔn)品。a.2.3 儀器和設(shè)備a.2.3.1 高效液相色譜系統(tǒng)，配備合適的泵、

8、進(jìn)樣器和積分儀a.2.3.2 色譜柱：不銹鋼柱（200x4.0mm）a.2.3.3 固定相：硅膠 nucleosil si 100 3mma.2.3.4 檢測器：紫外/可見分光光度計，或可見分光光度計a.2.3.5 hplc條件：流速： 2.0 ml/min進(jìn)樣量： 5.0 ml檢測波長：435nm流動相： a正己烷 b正己烷：三乙胺（99.9:0.1）(v/v) c正己烷：四氫呋喃（80:20）(v/v)梯度：時間，分鐘a%b%c%080200166020202240204024.580200a.2.3.6 標(biāo)準(zhǔn)品溶液精密稱取阿樸-12-番茄紅素醛對照品14.5-15.5mg，置50ml量瓶

9、中，用特丁基對苯二酚（bht）穩(wěn)定的甲苯溶解并稀釋至刻度。精密量取2ml，置100ml量瓶中，用特丁基對苯二酚（bht）穩(wěn)定的甲苯稀釋至刻度。a.2.3.7 樣品溶液 精密稱取本品29.0-31.0mg，置10ml量瓶中，用特丁基對苯二酚（bht）穩(wěn)定的甲苯溶解并稀釋至刻度，將該溶液超聲處理10min。a.2.4 結(jié)果阿樸-12-番茄紅素醛的保留時間約為14min，其相對于全反式番茄紅素的相對保留時間為1.6。a.2.5 計算：阿樸-12-番茄紅素醛（） as×wst×10 ×100(a.4) ast×ws×2500式中：as樣品峰面積；ast

10、標(biāo)準(zhǔn)品峰面積；wst標(biāo)準(zhǔn)品取樣量(mg)；ws樣品取樣量(mg)；10樣品溶解的體積(ml)；2500對照品溶解體積(50ml)乘以稀釋倍數(shù)(50)。a.3 三苯基氧膦（tppo）的測定a.3.1 方法原理在下列條件下用hplc方法檢測。a.3.2 試劑a.3.2.1正己烷。a.3.2.2異丙醇。a.3.2.3 四氫呋喃（thf）。a.3.2.4三苯基氧膦 （tppo）(純度99%)注意：所有試劑均應(yīng)是色譜級。a.3.3 儀器和設(shè)備a.3.3.1 高效液相色譜系統(tǒng)，配備合適的泵、進(jìn)樣器和積分儀。a.3.3.2色譜柱：不銹鋼柱（150×4.6mm）。a.3.3.3固定相：硅膠基柱 supelcosil lc-si, 5m 或類似的柱。a.3.3.4檢測器：紫外檢測器。a.3.3.5 hplc條件：柱溫： 20。流動相：異丙醇:正己烷（1:24 v/v）。流速：1.5ml/min。進(jìn)樣量：50l。檢測波長：210nm。tppo的保留時間大約為8.1min。a.3.4 分析步驟標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取10mg的tppo標(biāo)準(zhǔn)品，用thf（四氫呋喃）溶解，定量移入1000ml容量瓶中，用四氫