降膽固醇乳酸菌菌制劑的制備及應(yīng)用

1、降膽固醇乳酸菌菌制劑的制備及應(yīng)用膽固醇又稱(chēng)膽甾醇 , 是一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物, 普遍存在于動(dòng)物體內(nèi) , 是動(dòng)物組織細(xì)胞所不可或缺的重要物質(zhì)。但是如果膽固醇攝入量過(guò)高, 會(huì)使血清中膽固醇含量偏高 , 容易導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、腦中風(fēng)、高血壓等心腦血管疾病 , 嚴(yán)重威脅著人類(lèi)健康 , 所以如何降低血清中膽固醇含量對(duì)相關(guān)疾病的治療來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。乳酸菌是一類(lèi)普遍存在于人體和動(dòng)物內(nèi)的益生菌, 具備促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng) , 調(diào)節(jié)胃腸道正常菌群、維持微生態(tài)平衡 , 從而改善胃腸道功能 ; 抑制腸道內(nèi)腐敗菌生長(zhǎng) ,提高機(jī)體免疫力等許多重要生理功能。同時(shí)也有研究表明一些乳酸菌具有降膽固醇的作用 , 這為如何降低

2、血清中膽固醇含量的研究又提供了新的方向。本文研究了降膽固醇乳酸菌的分離純化和鑒定; 培養(yǎng)基的優(yōu)化 ; 菌制劑的制備工藝 ; 在發(fā)酵泡菜上的應(yīng)用。為降膽固醇乳酸菌的開(kāi)發(fā)和利用奠定了基礎(chǔ)。論文從以下四個(gè)方面進(jìn)行研究。1 降膽固醇乳酸菌的篩選及鑒定對(duì)降膽固醇乳酸菌進(jìn)行了篩選和鑒定。實(shí)驗(yàn)通過(guò)平板篩選出99 株接觸酶試驗(yàn)為陰性、革蘭氏染色為陽(yáng)性、有明顯透明鈣圈的菌株。其中膽固醇降解率大于30%的有 8 株, 降解率最高的為I4, 降解率為 37.3 1.50(%,n=3) 。通過(guò)生理生化試驗(yàn)和16S r RNA 序列分析法對(duì)菌株I4 進(jìn)行鑒定 , 菌株 I4 為植物乳桿菌 (Lactobacillusp

3、lantarum) 。對(duì)植物乳桿菌 I4 進(jìn)行了耐酸、耐膽鹽試驗(yàn)的研究 , 實(shí)驗(yàn)表明植物乳桿菌I4 具有很好的耐酸能力 , 和一定的耐膽鹽能力。2 降膽固醇植物乳桿菌I4 增菌培養(yǎng)基響應(yīng)面優(yōu)化采用響應(yīng)面法對(duì)降膽固醇植物乳桿菌 I4 增菌培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化研究。實(shí)驗(yàn)通過(guò)Plackett-Burman試驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選出影響菌體濃度的主要因素為蔗糖、酵母提取物和乙酸鈉。經(jīng)響應(yīng)面優(yōu)化后 , 得到蔗糖、酵母提取物和乙酸鈉的最佳濃度分別為2.05%、1.54%、0.31%。優(yōu)化后的增菌培養(yǎng)基中 , 菌體密度 OD620可達(dá)到 2.458, 比 MRS培養(yǎng)基 OD620值提高了 23.7%, 菌落單位提高了3.91

4、 倍。3 降膽固醇植物乳桿菌I4 菌制劑的制備及穩(wěn)定性考察對(duì)降膽固醇植物乳桿菌 I4 菌制劑的相關(guān)條件及菌制劑穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)菌制劑制備條件的選擇 , 得出在以明膠為保護(hù)劑、 菌泥與保護(hù)劑比例 1:5(w:v) 、預(yù)凍條件為 -40 下預(yù)凍 60min、裝液量為 3m L 時(shí), 制備出來(lái)的菌制劑中活菌數(shù)最高 , 為 1.15 1012CFU/g。通過(guò)對(duì)菌制劑降膽固醇能力的測(cè)試, 得出菌制劑膽固醇降解率為36.9 1.80(%,n=3), 說(shuō)明凍干對(duì)植物乳桿菌I4 的降膽固醇能力沒(méi)有明顯影響。通過(guò)對(duì)菌制劑穩(wěn)定性的考察 , 得出在常溫、 3、 -18 保存溫度下 ,90 天后活菌數(shù)分別

5、為 0.978 1011CFU/g、2.223 1011CFU/g、1.125 1011CFU/g,說(shuō)明該菌制劑具有良好的穩(wěn)定性。4 降膽固醇植物乳桿菌 I4 菌制劑在發(fā)酵泡菜中的應(yīng)用對(duì)降膽固醇植物乳桿菌 I4 菌制劑在發(fā)酵泡菜中的應(yīng)用進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)對(duì)不同菌制劑添加量發(fā)酵泡菜過(guò)程中 p H的變化、總酸含量的變化、氨基態(tài)氮含量的變化、亞硝酸鹽含量的變化以及感官值變化進(jìn)行了測(cè)試 , 并對(duì)添加過(guò)菌制劑發(fā)酵泡菜 7 天后發(fā)酵液中細(xì)菌總數(shù)、乳酸菌數(shù)、大腸桿菌數(shù)進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明 : 添加菌粉相對(duì)于沒(méi)有添加菌粉來(lái)說(shuō) , 泡菜發(fā)酵時(shí)間明顯縮短、 安全性更高、穩(wěn)定性更好。發(fā)酵后泡菜液中, 細(xì)菌總數(shù)為 2.72 106CFU/m L,乳酸菌總數(shù)為 2.33 106CFU/m