分子生物學(xué)講座最新課件

1、分子生物學(xué)講座最新基礎(chǔ)理論部分基礎(chǔ)理論部分第一章核酸的結(jié)構(gòu)與功能第一節(jié)核酸的化學(xué)組成第二節(jié)DNA的一級結(jié)構(gòu)與功能第三節(jié)DNA的二級結(jié)構(gòu)與功能第四節(jié)DNA的三級結(jié)構(gòu)與功能第五節(jié)RNA的結(jié)構(gòu)與功能第二章DNA的生物合成第一節(jié)DNA的復(fù)制第二節(jié)DNA的損傷與修復(fù)第三章 RNA的生物合成第一節(jié) 轉(zhuǎn)錄作用第二節(jié) RNA轉(zhuǎn)錄后的加工與修飾第三節(jié) RNA的復(fù)制課程大綱課程大綱分子生物學(xué)講座最新 第四章 蛋白質(zhì)的生物合成第一節(jié) 參與蛋白質(zhì)生物合成的物質(zhì)第二節(jié) 蛋白質(zhì)生物合成過程第三節(jié) 蛋白質(zhì)合成的抑制劑第四節(jié) 基因表達(dá)調(diào)控第五章 DNA重組與基因工程第一節(jié) 工具酶第二節(jié) 基因工程載體（略）第三節(jié) 目的序列與載

2、體的連接第四節(jié) 目的基因序列的來源和分離（略）第五節(jié) 基因序列導(dǎo)入細(xì)胞第六節(jié) 目的基因序列克隆的篩選與鑒定第七節(jié) 克隆基因的表達(dá)分子生物學(xué)講座最新專題理論部分專題理論部分電泳技術(shù)分子雜交文庫構(gòu)建遺傳工程載體和載體構(gòu)建（董）遺傳標(biāo)記及其應(yīng)用PCR及其測序技術(shù)目的基因克隆的策略植物組織培養(yǎng)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)1.植物基因工程策略分子生物學(xué)講座最新上述損傷會最終導(dǎo)致上述損傷會最終導(dǎo)致DNA分子結(jié)構(gòu)的變化，這種分子結(jié)構(gòu)的變化，這種DNA分子水平上的突變是整體遺傳突變的基礎(chǔ)。分子水平上的突變是整體遺傳突變的基礎(chǔ)。 DNA損傷后的改變，有以下幾種類型：損傷后的改變，有以下幾種類型：1. 點突變點突變(point

3、mutation)指指DNA上單一堿基的上單一堿基的變異。嘌呤替代嘌呤變異。嘌呤替代嘌呤(A與與G之間的相互替代之間的相互替代)、嘧、嘧啶替代嘧啶啶替代嘧啶(C與與T之間的替代之間的替代)稱為轉(zhuǎn)換稱為轉(zhuǎn)換(transition)；嘌呤變嘧啶或嘧啶變嘌呤則稱為顛換嘌呤變嘧啶或嘧啶變嘌呤則稱為顛換(transvertion)。2. 缺失缺失(deletion)指指DNA鏈上一個或一段核苷酸鏈上一個或一段核苷酸的消失。的消失。(二二)DNA損傷的后果損傷的后果分子生物學(xué)講座最新3. 插入插入(insertion)指一個或一段核苷酸插指一個或一段核苷酸插入到入到DNA鏈中。在為蛋白質(zhì)編碼的序列中鏈中。

4、在為蛋白質(zhì)編碼的序列中如缺失及插入的核苷酸數(shù)不是如缺失及插入的核苷酸數(shù)不是3的整倍數(shù)，的整倍數(shù)，則發(fā)生讀框移動則發(fā)生讀框移動(reading frame shift)，使，使其后所譯讀的氨基酸序列全部混亂，稱為其后所譯讀的氨基酸序列全部混亂，稱為移碼突變移碼突變(frame shift mutaion)。4. 倒位或轉(zhuǎn)位倒位或轉(zhuǎn)位(transposition)指指DNA鏈重鏈重組使其中一段核苷酸鏈方向倒置、或從一組使其中一段核苷酸鏈方向倒置、或從一處遷移到另一處。處遷移到另一處。5. 雙鏈斷裂雙鏈斷裂對單倍體細(xì)胞一個雙鏈斷裂對單倍體細(xì)胞一個雙鏈斷裂就是致死性事件。就是致死性事件。分子生物學(xué)講座

5、最新v 致死性致死性v 喪失某些功能喪失某些功能v 改變基因型改變基因型(genotype)而不改變表現(xiàn)型而不改變表現(xiàn)型(phenotype)v 發(fā)生了有利于物種生存的結(jié)果，使生物進(jìn)化發(fā)生了有利于物種生存的結(jié)果，使生物進(jìn)化 研究需要突變，如突變體庫的用途。研究需要突變，如突變體庫的用途。 突變或誘變對生物可能產(chǎn)生的后果突變或誘變對生物可能產(chǎn)生的后果分子生物學(xué)講座最新 DNA修復(fù)修復(fù)(DNA repair)是細(xì)胞對是細(xì)胞對DNA受損傷后受損傷后的一種反應(yīng)，這種反應(yīng)可能使的一種反應(yīng)，這種反應(yīng)可能使DNA結(jié)構(gòu)恢復(fù)原結(jié)構(gòu)恢復(fù)原樣，重新能執(zhí)行它原來的功能；但有時并非能完樣，重新能執(zhí)行它原來的功能；但有時

6、并非能完全消除全消除DNA的損傷，只是使細(xì)胞能夠耐受這種的損傷，只是使細(xì)胞能夠耐受這種DNA的損傷而能繼續(xù)生存，也許這種沒有完全的損傷而能繼續(xù)生存，也許這種沒有完全修復(fù)而存留下來的損傷會在適合的條件下顯示出修復(fù)而存留下來的損傷會在適合的條件下顯示出來來(如細(xì)胞的癌變等如細(xì)胞的癌變等)，但如果細(xì)胞不具備這修復(fù)，但如果細(xì)胞不具備這修復(fù)功能，就無法對付經(jīng)常發(fā)生的功能，就無法對付經(jīng)常發(fā)生的DNA損傷事件，損傷事件，不能生存。所以研究不能生存。所以研究DNA修復(fù)也是探索生命的修復(fù)也是探索生命的一個重要方面。對不同的一個重要方面。對不同的DNA損傷，細(xì)胞可以損傷，細(xì)胞可以有不同的修復(fù)反應(yīng)。有不同的修復(fù)反應(yīng)

7、。 二、二、DNA修復(fù)修復(fù)分子生物學(xué)講座最新這是較簡單的修復(fù)方式，一般都能將這是較簡單的修復(fù)方式，一般都能將DNA修修復(fù)到原樣。復(fù)到原樣。 1. 光修復(fù)光修復(fù)這是最早發(fā)現(xiàn)的這是最早發(fā)現(xiàn)的DNA修復(fù)方式。修修復(fù)方式。修復(fù)是由細(xì)菌中的復(fù)是由細(xì)菌中的DNA光解酶光解酶(photolyase)完成，完成，此酶能特異性識別紫外線造成的核酸鏈上相鄰此酶能特異性識別紫外線造成的核酸鏈上相鄰嘧啶共價結(jié)合的二聚體，并與其結(jié)合，這步反嘧啶共價結(jié)合的二聚體，并與其結(jié)合，這步反應(yīng)不需要光。應(yīng)不需要光。( (一一) )回復(fù)修復(fù)回復(fù)修復(fù)分子生物學(xué)講座最新結(jié)合后如受結(jié)合后如受300600nm波長的光照射，則此酶波長的光照射

8、，則此酶就被激活，將二聚體分就被激活，將二聚體分解為兩個正常的嘧啶單解為兩個正常的嘧啶單體，然后酶從體，然后酶從DNA鏈上鏈上釋放，釋放，DNA恢復(fù)正常結(jié)恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)。后來發(fā)現(xiàn)類似的修構(gòu)。后來發(fā)現(xiàn)類似的修復(fù)酶廣泛存在于動植物復(fù)酶廣泛存在于動植物中，人體細(xì)胞中也有發(fā)中，人體細(xì)胞中也有發(fā)現(xiàn)。現(xiàn)。分子生物學(xué)講座最新2. 單鏈斷裂的重接單鏈斷裂的重接 DNA單鏈斷裂是常見的損傷，其中單鏈斷裂是常見的損傷，其中一部分可僅由一部分可僅由DNA連接酶連接酶(ligase)參與參與而完全修復(fù)。此酶在各類生物各種細(xì)而完全修復(fù)。此酶在各類生物各種細(xì)胞中都普遍存在，修復(fù)反應(yīng)容易進(jìn)行。胞中都普遍存在，修復(fù)反應(yīng)容易進(jìn)行

9、。但雙鏈斷裂幾乎不能修復(fù)。但雙鏈斷裂幾乎不能修復(fù)。 分子生物學(xué)講座最新 3. 堿基的直接插入堿基的直接插入DNA鏈上嘌呤的脫落造成鏈上嘌呤的脫落造成無嘌呤位點，能被無嘌呤位點，能被DNA嘌呤插入酶嘌呤插入酶(insertase)識識別結(jié)合，在別結(jié)合，在K存在的條件下，催化游離嘌呤或存在的條件下，催化游離嘌呤或脫氧嘌呤核苷插入生成糖苷鍵，且催化插入的脫氧嘌呤核苷插入生成糖苷鍵，且催化插入的堿基有高度專一性、與另一條鏈上的堿基嚴(yán)格堿基有高度專一性、與另一條鏈上的堿基嚴(yán)格配對，使配對，使DNA完全恢復(fù)。完全恢復(fù)。 4. 烷基的轉(zhuǎn)移烷基的轉(zhuǎn)移在細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有一種在細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有一種O6甲基鳥甲基鳥嘌呤甲基

10、轉(zhuǎn)移酶，能直接將甲基從嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶，能直接將甲基從DNA鏈鳥嘌鏈鳥嘌呤呤O6位上的甲基轉(zhuǎn)移而修復(fù)損傷的位上的甲基轉(zhuǎn)移而修復(fù)損傷的DNA。這個。這個酶的修復(fù)能力并不很強，但在低劑量烷化劑作酶的修復(fù)能力并不很強，但在低劑量烷化劑作用下能誘導(dǎo)出此酶的修復(fù)活性。用下能誘導(dǎo)出此酶的修復(fù)活性。 分子生物學(xué)講座最新切除修復(fù)（切除修復(fù)（excision repair） 是是修復(fù)修復(fù)DNA損傷最為普遍的方式，損傷最為普遍的方式，對多種對多種DNA損傷包括堿基脫落形損傷包括堿基脫落形成的無堿基位點、嘧啶二聚體、成的無堿基位點、嘧啶二聚體、堿基烷基化、單鏈斷裂等都能起堿基烷基化、單鏈斷裂等都能起修復(fù)作用。這種修復(fù)

11、方式普遍存修復(fù)作用。這種修復(fù)方式普遍存在于各種生物細(xì)胞中，也是人體在于各種生物細(xì)胞中，也是人體細(xì)胞主要的細(xì)胞主要的DNA修復(fù)機(jī)制。修復(fù)機(jī)制。（二）切除修復(fù)（二）切除修復(fù)分子生物學(xué)講座最新首先由核酸酶識別首先由核酸酶識別DNA的損傷位點，在損傷的損傷位點，在損傷部位的部位的5側(cè)切開磷酸二酯鍵。不同的側(cè)切開磷酸二酯鍵。不同的DNA損傷損傷需要不同的特殊核酸內(nèi)切酶來識別和切割。需要不同的特殊核酸內(nèi)切酶來識別和切割。由由53核酸外切酶將有損傷的核酸外切酶將有損傷的DNA片段切除。片段切除。在在DNA聚合酶的催化下，以完整的互補鏈為聚合酶的催化下，以完整的互補鏈為模板，按模板，按53方向方向DNA鏈，填

12、補已切除的空隙。鏈，填補已切除的空隙。由由DNA連接酶將新合成的連接酶將新合成的DNA片段與原來的片段與原來的DNA斷鏈連接起來。這樣完成的修復(fù)能使斷鏈連接起來。這樣完成的修復(fù)能使DNA恢復(fù)原來的結(jié)構(gòu)恢復(fù)原來的結(jié)構(gòu)。修復(fù)需要多種酶的作用，基本步驟：修復(fù)需要多種酶的作用，基本步驟：分子生物學(xué)講座最新切除修復(fù)在切除損傷段落后是以原來正確的互補切除修復(fù)在切除損傷段落后是以原來正確的互補鏈為模板來合成新的段落而做到修復(fù)的。但在某些情鏈為模板來合成新的段落而做到修復(fù)的。但在某些情況下沒有互補鏈可以直接利用，例如在況下沒有互補鏈可以直接利用，例如在DNA復(fù)制進(jìn)復(fù)制進(jìn)行時發(fā)生行時發(fā)生DNA損傷，此時損傷，此

13、時DNA兩條鏈已經(jīng)分開，可兩條鏈已經(jīng)分開，可用用DNA重組修復(fù)（重組修復(fù)（recombinational repair）方式：）方式：受損傷的受損傷的DNA鏈復(fù)制時，產(chǎn)生的子代鏈復(fù)制時，產(chǎn)生的子代DNA在損傷在損傷的對應(yīng)部位出現(xiàn)缺口。的對應(yīng)部位出現(xiàn)缺口。完整的另一條母鏈完整的另一條母鏈DNA與有缺口的子鏈與有缺口的子鏈DNA進(jìn)行進(jìn)行重組交換，將母鏈重組交換，將母鏈DNA上相應(yīng)的片段填補子鏈缺口上相應(yīng)的片段填補子鏈缺口處，而母鏈處，而母鏈DNA出現(xiàn)缺口。出現(xiàn)缺口。（三）重組修復(fù)（三）重組修復(fù)分子生物學(xué)講座最新以另一條子鏈以另一條子鏈DNA為模為模板，經(jīng)板，經(jīng)DNA聚合酶催化合聚合酶催化合成一新成

14、一新DNA片段填補母鏈片段填補母鏈DNA的缺口，最后由的缺口，最后由DNA連接酶連接，完成修補。連接酶連接，完成修補。注意：重組修復(fù)不能完全注意：重組修復(fù)不能完全去除損傷，損傷的去除損傷，損傷的DNA段段落仍然保留在親代落仍然保留在親代DNA鏈鏈上，只是重組修復(fù)后合成上，只是重組修復(fù)后合成的的DNA分子是不帶有損傷分子是不帶有損傷的，但經(jīng)多次復(fù)制后，損的，但經(jīng)多次復(fù)制后，損傷就被傷就被“沖淡沖淡”了，在子了，在子代細(xì)胞中只有一個細(xì)胞是代細(xì)胞中只有一個細(xì)胞是帶有損傷帶有損傷DNA的。的。分子生物學(xué)講座最新 SOS修復(fù)是指修復(fù)是指DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷、細(xì)胞處于危受到嚴(yán)重?fù)p傷、細(xì)胞處于危急狀態(tài)時所誘導(dǎo)

15、的一種急狀態(tài)時所誘導(dǎo)的一種DNA修復(fù)方式，修復(fù)結(jié)果修復(fù)方式，修復(fù)結(jié)果只是能維持基因組的完整性，提高細(xì)胞的生成率，只是能維持基因組的完整性，提高細(xì)胞的生成率，但留下的錯誤較多，故又稱為錯誤傾向修復(fù)但留下的錯誤較多，故又稱為錯誤傾向修復(fù)（error-prone repair），使細(xì)胞有較高的突變率。），使細(xì)胞有較高的突變率。原則：喪失某些信息而原則：喪失某些信息而存活存活總比總比死亡死亡好。好。（四）（四）SOS修復(fù)修復(fù)分子生物學(xué)講座最新當(dāng)當(dāng)DNA兩條鏈的損傷鄰近時，損傷不能被兩條鏈的損傷鄰近時，損傷不能被切除修復(fù)或重組修復(fù)，這時在核酸內(nèi)切酶、切除修復(fù)或重組修復(fù)，這時在核酸內(nèi)切酶、外切酶的作用下造

16、成損傷處的外切酶的作用下造成損傷處的DNA鏈空缺，鏈空缺，再由損傷誘導(dǎo)產(chǎn)生的一整套的特殊再由損傷誘導(dǎo)產(chǎn)生的一整套的特殊DNA聚合聚合酶酶SOS修復(fù)酶類，催化空缺部位修復(fù)酶類，催化空缺部位DNA的合的合成，這時補上去的核苷酸幾乎是隨機(jī)的，仍成，這時補上去的核苷酸幾乎是隨機(jī)的，仍然終于保持了然終于保持了DNA雙鏈的完整性，使細(xì)胞得雙鏈的完整性，使細(xì)胞得以生存。但這種修復(fù)帶給細(xì)胞很高的突變率。以生存。但這種修復(fù)帶給細(xì)胞很高的突變率。分子生物學(xué)講座最新SOS修復(fù)修復(fù)在在SOSSOS修復(fù)中，涉及到幾個基因，其中二個基因最清修復(fù)中，涉及到幾個基因，其中二個基因最清楚，楚，recArecA和和lexAlex

17、A，它們是可以抵抗紫外線的基因。，它們是可以抵抗紫外線的基因。lexAlexA基因的產(chǎn)物是一種阻遏蛋白。平時結(jié)合在基因的產(chǎn)物是一種阻遏蛋白。平時結(jié)合在SOSSOS系系統(tǒng)的各個操縱子上，使之處于休眠狀態(tài)。統(tǒng)的各個操縱子上，使之處于休眠狀態(tài)。分子生物學(xué)講座最新第三章第三章 RNARNA的生物合成的生物合成 實質(zhì)的內(nèi)容就是轉(zhuǎn)錄的過程。實質(zhì)的內(nèi)容就是轉(zhuǎn)錄的過程。 轉(zhuǎn)錄是基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄是基因表達(dá) 第一步，也是最關(guān)鍵第一步，也是最關(guān)鍵的一步。對于絕大多數(shù)基因來說，就意味的一步。對于絕大多數(shù)基因來說，就意味著是否讓該基因轉(zhuǎn)錄。從調(diào)控的角度說，著是否讓該基因轉(zhuǎn)錄。從調(diào)控的角度說，是最重要的步驟，因為任何一個連鎖

18、反應(yīng)，是最重要的步驟，因為任何一個連鎖反應(yīng)，從源頭上的控制是最主要，也是最有效的。從源頭上的控制是最主要，也是最有效的。分子生物學(xué)講座最新第一節(jié)第一節(jié) 轉(zhuǎn)錄作用轉(zhuǎn)錄作用 前言前言 RNA的轉(zhuǎn)錄合成從化學(xué)角度來講類似于的轉(zhuǎn)錄合成從化學(xué)角度來講類似于DNA的復(fù)的復(fù)制，多核苷酸鏈的合成都是以制，多核苷酸鏈的合成都是以53的方向，但由的方向，但由于復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的目的不同，轉(zhuǎn)錄又具有其特點：于復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的目的不同，轉(zhuǎn)錄又具有其特點：（1）對于一個基因組來說，轉(zhuǎn)錄只發(fā)生在一部分）對于一個基因組來說，轉(zhuǎn)錄只發(fā)生在一部分基因，而且每個基因的轉(zhuǎn)錄都受到相對獨立的控基因，而且每個基因的轉(zhuǎn)錄都受到相對獨立的控制。制。

19、（2）轉(zhuǎn)錄是不對稱的。）轉(zhuǎn)錄是不對稱的。（3）轉(zhuǎn)錄時不需要引物，而且）轉(zhuǎn)錄時不需要引物，而且RNA鏈的合成是連鏈的合成是連續(xù)的。續(xù)的。分子生物學(xué)講座最新轉(zhuǎn)錄的過程，涉及到二個方面：轉(zhuǎn)錄的過程，涉及到二個方面：RNA合成的酶學(xué)過程合成的酶學(xué)過程RNA合成的起始信號和終止信號（特定序列）合成的起始信號和終止信號（特定序列）在細(xì)胞周期的某一階段，在細(xì)胞周期的某一階段，DNA雙鏈解開成為轉(zhuǎn)錄的模雙鏈解開成為轉(zhuǎn)錄的模板。一切細(xì)胞均具有板。一切細(xì)胞均具有RNA聚合酶。聚合酶。E.coli細(xì)胞中約有細(xì)胞中約有RNA聚合酶分子聚合酶分子3000個以上。此酶催化個以上。此酶催化RNA主鏈中核主鏈中核苷酸間的苷酸

20、間的3，5磷酸二酯鍵的形成。催化反應(yīng)速度很快，磷酸二酯鍵的形成。催化反應(yīng)速度很快，在在37時時RNA鏈的延伸可達(dá)鏈的延伸可達(dá)40個核苷酸個核苷酸/秒。但是這種秒。但是這種催化作用必須有催化作用必須有DNA(作為模板作為模板)的存在。的存在。RNA的合成的合成一定要非常精確。然而不像一定要非常精確。然而不像DNA那樣，轉(zhuǎn)錄作用并沒那樣，轉(zhuǎn)錄作用并沒有校正（有校正（proof-reading）機(jī)制。）機(jī)制。分子生物學(xué)講座最新雙螺旋雙螺旋DNA分子中僅有一條鏈可作為分子中僅有一條鏈可作為RNA的的模板。如果說，模板。如果說，DNA分子中的兩條鏈均可作分子中的兩條鏈均可作為為RNA的模板，則每個基因勢

21、必將產(chǎn)生兩條的模板，則每個基因勢必將產(chǎn)生兩條有互補順序的有互補順序的RNA。然而遺傳學(xué)證明每個基。然而遺傳學(xué)證明每個基因只控制一個蛋白質(zhì)，故實際上只合成了一因只控制一個蛋白質(zhì)，故實際上只合成了一條條RNA鏈，或者即使合成兩條鏈，或者即使合成兩條RNA鏈，其中鏈，其中也只有一條有功能。也只有一條有功能。分子生物學(xué)講座最新 將T7 DNA變性，使RNA聚合酶能與單鏈DNA結(jié)合，則兩條均能被轉(zhuǎn)錄。但如果用天然的完整雙鏈DNA為模板，則RNA聚合酶僅能和稱為啟動子的順序結(jié)合，從而只能轉(zhuǎn)錄在活體內(nèi)被轉(zhuǎn)錄的那條鏈。 將雙鏈DNA加熱到接近100以使之變性，再加入用此DNA為模板所合成的單鏈RNA，再進(jìn)行退

22、火。結(jié)果除復(fù)性的DNA雙螺旋外，還形成了DNA-RNA雜合分子，即僅有一條DNA鏈被轉(zhuǎn)錄。試驗證明試驗證明分子生物學(xué)講座最新在命名上有一些混亂：在命名上有一些混亂：正鏈，負(fù)鏈正義鏈，反義鏈模板鏈，非模板鏈有（意）義鏈，無（意）義鏈編碼鏈，非編碼鏈大多數(shù)采用：模板鏈=反義鏈(antisense strand) 非模板鏈=正義鏈(sense strand) 編碼鏈（coding strand）分子生物學(xué)講座最新 世界上第一個世界上第一個RNA聚合酶是從哺乳動物細(xì)胞中分離聚合酶是從哺乳動物細(xì)胞中分離出來的，但是遠(yuǎn)沒有了解清楚。相反，大腸桿菌的出來的，但是遠(yuǎn)沒有了解清楚。相反，大腸桿菌的RNA聚合酶是

23、目前最清楚的。聚合酶是目前最清楚的。1、原核細(xì)胞、原核細(xì)胞RNA聚合酶結(jié)構(gòu)：聚合酶結(jié)構(gòu)： 細(xì)菌的細(xì)菌的RNA聚合酶，像聚合酶，像DNA聚合酶一樣，具有很復(fù)聚合酶一樣，具有很復(fù)雜的結(jié)構(gòu)。其活性形式雜的結(jié)構(gòu)。其活性形式(全酶全酶)為為15S，由，由5種不同的多肽種不同的多肽鏈構(gòu)成，按分子量大小排列分別為鏈構(gòu)成，按分子量大小排列分別為(155000)，(151000)，(7000)，(36500)和和(11000)。每分子。每分子RNA聚合酶除有兩個聚合酶除有兩個亞基外，其余亞基均只有一個，亞基外，其余亞基均只有一個，故全酶為故全酶為2(450000)。形狀應(yīng)為橢圓球形。形狀應(yīng)為橢圓球形。一、一、R

24、NA聚合酶聚合酶分子生物學(xué)講座最新原核細(xì)胞原核細(xì)胞RNA聚合酶結(jié)構(gòu)聚合酶結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)講座最新亞基和其他肽鏈的結(jié)合不很牢固。當(dāng)亞基脫離全酶后，剩下的2稱為核心酶。核心酶本身就能催化核苷酸間磷酸二酯鍵的形成。 有二個功能：v識別啟動子v增強與啟動子的特異性結(jié)合 不論有無存在，利福平(rifampicin)和利福霉素(rifamycin)能結(jié)合在亞基上而對此酶發(fā)生強烈的抑制作用。抑制RNA合成的起始而不抑制其延長。分子生物學(xué)講座最新2、真核生物的、真核生物的RNA聚合酶：聚合酶： 真核生物中已發(fā)現(xiàn)有四種RNA聚合酶，分別稱為RNA聚合酶、和線粒體（葉綠體）RNA聚合酶，分子量大致都在50萬道爾頓左

25、右，它們專一性地轉(zhuǎn)錄不同的基因，因此由它們催化的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物也各不相同。 鵝膏蕈（xun）堿是真核生物RNA聚合酶特異性抑制劑，三種真核生物RNA聚合酶對鵝膏蕈堿的反應(yīng)不同(p408)。原核生物靠RNA聚合酶就可完成從起始、延長、終止的轉(zhuǎn)錄全過程，真核生物RNA聚合酶因為沒有亞基，還需另一此叫做“轉(zhuǎn)錄因子”的蛋白質(zhì)分子參與識別或者結(jié)合啟動子，完成轉(zhuǎn)錄過程。分子生物學(xué)講座最新3、特征、特征真核和原核細(xì)胞內(nèi)都存在RNA聚合酶，有以下特點：以DNA為模板。在DNA的兩條多苷酸鏈中只有其中一條鏈作為模板，叫模板鏈，又叫無意義鏈。DNA雙鏈中另一條不做為模板的鏈叫做編碼鏈，又叫有意義鏈。由于RNA的轉(zhuǎn)錄合成是以DNA的一條鏈為模板而進(jìn)行的，所以這種轉(zhuǎn)錄方式又叫做不對稱轉(zhuǎn)錄。都以四種三磷酸核苷為底物；都遵循DNA與RNA之間的堿基配對原則RNA鏈的延長方向是53的連續(xù)合成。需要Mg2+或Mn2+離子。并不需要引物。RNA聚合酶缺乏35外切酶活性，所以沒有校正功能。 分子生物學(xué)講座最新SARS冠狀病毒，是一類單鏈的正義冠狀病毒，是一類單鏈的正義RNA病毒病毒 這這類病毒有兩個最重要的特征：類病毒有兩個最重要的特征：1. 在其成熟的病毒顆粒中并沒有在其成熟的病毒顆粒中并沒有RNA