加味爛積丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1、DOC格式論文，方便您的復(fù)制修改刪減加味爛積丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究(作者：?jiǎn)挝唬亨]編：)【摘要】目的建立加味爛積丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜法對(duì)制劑中的當(dāng)歸、吳茱萸、木香及川木香、白術(shù)進(jìn)行了定性鑒 別，并采用高效液相色譜法測(cè)定了制劑中大黃有效成分大黃素、大黃酚的含量。結(jié)果樣品中均能檢出當(dāng)歸、吳茱萸、木香及川木香、白術(shù) 的特征斑點(diǎn)；大黃素在0.015 630.390 75卩g范圍內(nèi)呈線性關(guān)系(r=0.999 9),平均加樣回收率為100.0%;大黃酚在0.034 480.862 卩g范圍內(nèi)呈線性關(guān)系(r=1.000 0 ),平均加樣回收率為99.8%。結(jié) 論該法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可以控制加

2、味爛積丸的質(zhì)量?！娟P(guān)鍵詞】 加味爛積丸；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；大黃素；大黃酚；高效液相色譜法Abstract : ObjectiveTo establish the quality standard ofBaiJiang Tablet.MethodsRadix Aangelicae Ssinensis ， Fructus Evodiae， Radix Aucklandiae and Radix Vladimiriae ， Rhizoma Atractylodis Macrocephalae were ide ntifiedby TLC.The contents0.3907 5 g , andof chry

3、sophanol and emodin were determined by HPLC.ResultsThe lin ear range of chrysopha nol was 0.015 63the average recovery was 100.0%; the linear range of emodin was 0.03448 0.862 卩 g, and the average recovery was99.8%.C on clusi on The method is simple , accurate and with a good reproducibility and may

4、 be used for quality control of Jiaweilanji Pill.Key words: Jiaweilanji Pill ; Quality standard ; Chrysophanol and emodin ; HPLC加味爛積丸由大黃、木香、川木香、當(dāng)歸、白術(shù)、吳茱萸等 中藥組成，具有消積化滯功效，可用于飲食積聚，胸滿痞悶，腹脹堅(jiān) 結(jié)，消化不良。為了有效控制其內(nèi)在質(zhì)量，筆者采用薄層色譜（TLC 法分別對(duì)處方中當(dāng)歸、吳茱萸、木香及川木香、白術(shù)進(jìn)行定性鑒別， 并采用高效液相色譜（HPLC法對(duì)有效成分大黃素、大黃酚進(jìn)行含量 測(cè)定。1儀器與試藥1.1儀器Water

5、s2695高效液相色譜儀，Waters2487紫外檢測(cè)器，Empower色譜工作站。1.2試藥乙腈、甲醇為色譜純，水為超純水，其余所用試劑均為分析純； 大黃素對(duì)照品（批號(hào)110756-200210）、大黃酚對(duì)照品（批號(hào) 110796-200309）、當(dāng)歸對(duì)照藥材（批號(hào) 120927-200310）、吳茱萸對(duì)照藥材（批號(hào)120909-200307 ）及吳茱萸次堿對(duì)照品9110801-200203）、去氫木香烴內(nèi)酯對(duì)照品（批號(hào) 111525-200103）、 白術(shù)對(duì)照藥材（批號(hào)120925-200407）均由中國(guó)藥品生物制品檢定所 提供。2方法與結(jié)果2.1薄層定性鑒別2.1.1當(dāng)歸的鑒別取本品5

6、g，研細(xì)，加乙醚20 ml，超聲處理15 min，濾過，濾 液用19氫氧化鈉溶液5 ml洗滌，棄去水層，分取乙醚液，揮干，殘 渣加乙醚1 ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0.3 g，加乙醚10 ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取缺當(dāng)歸的加味爛積丸同 法制備成陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，吸取上述3種溶液各4卩I，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上， 以正己烷-醋酸乙酯（9 : 1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外 光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位 置上。顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。結(jié)果見圖1。2.1.2吳茱萸的鑒別取本品5 g，研細(xì)，

7、加乙醇10 ml，靜置30 min，超聲處理30 min， 濾過，濾液作為供試品溶液。另取吳茱萸對(duì)照藥材0.4 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取吳茱萸次堿對(duì)照品，加甲醇制成每毫升含0.2 mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。再取缺吳茱萸的加味爛積丸同法制備成陰 性對(duì)照溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，吸取上述4種溶液各4卩I，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯-甲醇-三乙胺（19 : 5 ： 1 ： 1）為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試 品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同顏色的兩個(gè)熒光 主斑點(diǎn)；在與對(duì)

8、照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。結(jié) 果見圖2。2.1.3木香、川木香的鑒別取本品10 g，研細(xì)，加三氯甲烷 30 ml，超聲處理30 min，濾 過，濾液濃縮至約5 ml，作為供試品溶液。另取去氫木香內(nèi)酯對(duì)照 品，加三氯甲烷制成每毫升含 0.5 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。再 取缺木香、川木香的加味爛積丸同法制備成陰性對(duì)照溶液。照薄層色 譜法實(shí)驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5 I，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層 板上，以三氯甲烷-環(huán)己烷（5 : 1）為展開劑，展開，取出，晾干， 噴以1%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中， 在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。結(jié)果見圖3。

9、2.1.4白術(shù)的鑒別取本品5 g，研細(xì)，加正己烷10 ml，超聲處理15 min，濾過， 濾液作為供試品溶液。另取白術(shù)對(duì)照藥材 0.5 g，加正己烷2 ml，同 法制成對(duì)照藥材溶液。再取缺白術(shù)的加味爛積丸同法制備成陰性對(duì)照 溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，吸取上述 3種溶液各5卩I，分別點(diǎn)于同 一硅膠G薄層板上，以石油醚（6090C）-醋酸乙酯（50: 1）為展 開劑，展開，取出，晾干，噴以 5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 顏色的斑點(diǎn)。結(jié)果見圖4。2.2大黃素、大黃酚的含量測(cè)定221色譜條件色譜柱為 Waters Symmetry shie

10、ld RP18(150 mnK 3.9 mm, 5a m);流動(dòng)相為乙腈-甲醇-水-乙酸銨(70 ： 10： 20 : 0.5 );流速1.0 ml min-1 ;柱溫30C ;檢測(cè)波長(zhǎng)215 nm理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算 應(yīng)不低于3 000。2.2.2 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇 以甲醇為溶劑，在波長(zhǎng)范圍200400 nm 對(duì)大黃素、大黃酚溶液進(jìn)行光譜掃描，結(jié)果表明大黃素和大黃酚在(254 1) nm處均有最大吸收，與中國(guó)藥典規(guī)定一致，因此選擇254 nm為本品高效液相色譜法的測(cè)定波長(zhǎng)。2.2.3對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)過五氧化二磷減壓干燥12 h的大黃素對(duì)照品5.21mg置100 ml的量瓶中，加甲醇

11、溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密稱 取經(jīng)過五氧化二磷減壓干燥12 h的的大黃酚對(duì)照品8.62 mg置100 ml的量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取上述 大黃素對(duì)照品溶液15 ml，大黃酚對(duì)照品溶液20 ml，置50 ml量瓶 中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每毫升含大黃素0.015 63 mg和大黃酚0.034 48 mg )2.2.4供試品溶液的制備取本品，研細(xì)，取約1.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 ml，密塞，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱定重 量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，精密量取續(xù)濾液5 ml，置燒瓶中，水浴蒸干，加2.5 mo/L的硫酸溶

12、液10 ml，超聲處理5 min，再 加三氯甲烷10 ml,置水浴中加熱回流1 h，取出，放冷，移至分液漏斗 中，用少量三氯甲烷洗滌容器，洗液并入分液漏斗中，分取三氯甲烷 液，酸液再用三氯甲烷提取兩次，10 ml/次，合并三氯甲烷液，用2 g無水硫酸鈉脫水，再用少量三氯甲烷洗滌容器及濾器，洗液并入三 氯甲烷液中，蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45卩m）濾過，取續(xù)濾液，即得。分別精密吸取對(duì)照品溶液 5卩l(xiāng)與供試品溶液各10卩l(xiāng)， 注入液相色譜儀，按照上述測(cè)定方法，對(duì)大黃素及大黃酚對(duì)照品、加 味爛積丸樣品、缺大黃的陰性對(duì)照品進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果陰性對(duì)

13、照品在 相應(yīng)的保留時(shí)間無吸收峰出現(xiàn)，且大黃素、大黃酚對(duì)照品色譜峰峰形 尖銳，對(duì)稱性好；供試品中的大黃素、大黃酚色譜峰對(duì)稱性好，與前 后其它峰分離度大于1.5，達(dá)到基線分離。2.2.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)供試品溶液中大黃素、大黃酚的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：取新制備的供試品 溶液，每間隔2 h進(jìn)樣1次（10卩l(xiāng) ），按上述色譜條件分別測(cè)定， 記錄其大黃素、大黃酚色譜峰面積的變化，結(jié)果供試品 10 h內(nèi)穩(wěn)定, RSD分別為 0.92%和 RSD=0.30妝 n=6）。大黃素、大黃酚對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性試驗(yàn)：將新制備的的大 黃素、大黃酚混合對(duì)照品溶液，每間隔 2 h進(jìn)樣1次(5卩l(xiāng) )進(jìn)行 測(cè)定，結(jié)果，大黃素峰面積積分值的

14、RSD=0.34%大黃酚峰面積積分 值的RSD=0.96( n=6)，表明在10 h內(nèi)穩(wěn)定。226線性關(guān)系考察配制系列不同濃度(0.003 126, 0.009 378, 0.015 63, 0.021 88, 0.031 26，0.046 89，0.078 15卩g/卩I )的大黃素對(duì)照品溶液， 分別精密吸取5卩I注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，以峰面積積分值 A為縱座標(biāo)，對(duì)照品量X為橫坐標(biāo)，作線性回歸，得回歸方程A = 7 191 076.5 X -11 981.4 (r=0.999 9, n=7)。結(jié)果表明，大黃素在 0.015630.390 75卩g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。配制系列不同濃度(0

15、.006 896, 0.020 69, 0.034 48, 0.048 28, 0.068 96 , 0.103 44 , 0.172 4卩g/卩l(xiāng) )的大黃酚對(duì)照品溶液，分 別精密吸取5卩l(xiāng)注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，以峰面積積分值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，對(duì)照品量X為橫坐標(biāo)，作線性回歸，得回歸方程 Y =11073 892.6X -8 511.5 ( r=1.000 0, n=7)。結(jié)果表明，大黃酚在 0.034 48 0.862卩g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.2.7重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批號(hào)加味爛積丸樣品(060001) 6份，分別按樣品測(cè)定方 法測(cè)定大黃素、大黃酚總含量。結(jié)果平均含量為0.72mg/g , R

16、SD為1.22% (n=6)。2.2.8加樣回收實(shí)驗(yàn)大黃素：精密稱取已知大黃素含量的樣品（批號(hào)060001，大黃素含量0.288 3 mg/g） 6份，置錐形瓶中，按樣品測(cè)定方法操作，進(jìn) 行加樣回收實(shí)驗(yàn)，測(cè)定大黃素峰面積并計(jì)算加樣回收率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。表1大黃素加樣回收率考察結(jié)果（略）結(jié)果大黃素平均加樣回收率為100.0%, RSD二0.95%（n=6），表明在95%- 105%間，本方法回收率良好。大黃酚：精密量取已知大黃酚含量的樣品（批號(hào)060001，大黃酚含量0.431 6 mg/g） 6份，置錐形瓶中，按樣品測(cè)定方法操作，進(jìn) 行加樣回收實(shí)驗(yàn)，測(cè)定大黃酚峰面積并計(jì)算加樣回收率。 結(jié)果見表2。 表2大黃酚加樣回收率考察結(jié)果（略）結(jié)果大黃酚平均加樣回收率為 99.8%, RSD=0.93 %（n=6），表明 在95%- 105%間，本方法回收率良好。2.2.9樣品含量測(cè)定按樣品測(cè)定方法，測(cè)定3批加味爛積丸樣品中的大黃素、 大黃酚 總量。結(jié)果見表3。表3樣品含量測(cè)定結(jié)果（略）3討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用TLC法對(duì)加味爛積丸中當(dāng)歸、吳茱萸、 木香及川木香、白術(shù)等藥材進(jìn)行薄層色譜鑒別，經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)，均能 檢出各藥材的特征斑點(diǎn)，且陰性樣品