工業(yè)分析與檢驗(yàn)論文

1、揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文目錄一、前言 31、山梨酸簡(jiǎn)介 32、使用范圍 43、用量介紹 54、應(yīng)用實(shí)例 55、主要測(cè)定方法 9二、實(shí)驗(yàn)部分 121、試驗(yàn)原理 122、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑 123、實(shí)驗(yàn)方法 13三、方法研究 131、吸收光譜和測(cè)量波長(zhǎng)的選擇 132、氧化反應(yīng)溫度 143、顯色酸度 154、顯色劑用量 165、工作曲線 17四、樣品測(cè)定 181、樣品溶液的制備和測(cè)定方法 182、精密度實(shí)驗(yàn) 183、樣品分析 19五、結(jié)論 20參考文獻(xiàn) 20致謝21揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文食品中山梨酸含量的測(cè)定王偉0901 工業(yè)分析摘 要 食品中添加的山梨酸超標(biāo)嚴(yán)重，消費(fèi)者長(zhǎng)期服用，在一定程度上

2、會(huì)抑制骨骼生長(zhǎng)， 危害腎、 肝臟的健康， 因此食品中山梨酸含量是一項(xiàng)極其重要的指標(biāo)。 本文采用分光光度 1-2 法測(cè)定食品中山梨酸的含量。 以雙氧水 - 硫酸溶液為山梨酸 氧化體系，氧化產(chǎn)物丙二醛進(jìn)一步與硫代巴比妥酸進(jìn)行顯色反應(yīng)。在吸收波長(zhǎng) 530nm處，氧化反應(yīng)溫度 60，顯色劑用量 4.0mL，0.15mol/LH 2SO4 溶液用量 1.4mL 測(cè)定效果最佳。 山梨酸濃度在 01.066 g/mL范圍內(nèi)呈線性相關(guān)， 線性范圍內(nèi)吸 2光度與山梨酸濃度 ( g/mL)間的關(guān)系為： A=0.3715c+0.0047 ，R2=0.9998 ，回收率 為 99.0% 101.1%。關(guān)鍵詞分光光度法

3、；山梨酸；過(guò)氧化氫 - 硫酸；硫代巴比妥酸Food in the sorbic acid content is determinedWang Wei0901 Industrial AnalysisAbstract ： The food additives sorbic acid exceed the standard seriously, the consumer long-term use, to a certain extent, inhibit bone growth, harmful to renal, liver health, so the content of sorbic ac

4、id in food is a very important index. This paper adopts spectrophotometer determination of sorbic acid content. Hydrogen peroxide sulfuric acid solution for sorbic acid oxidation, oxidation product malondialdehyde further and thiobarbituric acid chromogenic reaction. Inthe absorption wavelength of 5

5、30nm, oxidation temperature of 60, chromogenic agent4.0mL,0.15mol / LH2SO41.4mL solution dosage determination of best.concentrations in 0 1.066g/mL range showed a linear correlation, linear range and absorbance of sorbic acid2 concentration ( g/mL ) relationship is: A =0.3715c+0.0047, R2 = 0.9998,揚(yáng)州

6、工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文the recovery rate was 99% 101.1%.Key words ：Spectrophotometry ；The sorbic acid ； Hydrogen peroxide-Sulphuric acid;Sulfur generation without inflicting一、前言1、山梨酸簡(jiǎn)介山梨酸及山梨酸鉀 3 -4（以下簡(jiǎn)稱山梨酸及鉀鹽） 是一種良好的食品防腐 劑，在西方發(fā)達(dá)國(guó)家的應(yīng)用量很大，但在中國(guó)國(guó)內(nèi)的應(yīng)用范圍還不廣。作為 一種公認(rèn)安全、高效防腐的食品添加劑，山梨酸在我國(guó)食品行業(yè)的應(yīng)用必將 會(huì)越來(lái)越廣泛。 為白色或微黃白色結(jié)晶性粉末；

7、 有特臭。 本品在乙醇中易溶， 在乙醚中溶解，在水中極微溶解。我們?cè)谶x購(gòu)包裝 （或罐裝 ）食品時(shí)，配料一 項(xiàng)中常?？吹健吧嚼嫠帷钡淖謽?，人們往往會(huì)誤認(rèn)為可能是水果“梨”的成 份。其實(shí)他們是常用的食品添加劑！不管他們對(duì)人體有沒(méi)有危害，明明白白 的消費(fèi)確是非常必要的，以下是有關(guān)山梨酸的有關(guān)資料僅供參考：山梨酸 （化學(xué)名稱： 2， 4己二烯酸 分子式： C6H8O2 山梨酸是國(guó)際糧農(nóng)組織和衛(wèi)生組織推薦的高效安全的防腐保鮮劑，廣泛 應(yīng)用于食品、飲料、煙草、農(nóng)藥、化妝品等行業(yè)，作為不飽和酸 , 也可用于 樹脂、香料和橡膠工業(yè)。2、安全性 由于山梨酸（鉀）是一種不飽和脂肪酸（鹽）它可以被人體的代謝系統(tǒng) 吸

8、收而迅速分解為二氧化碳和水，在體內(nèi)無(wú)殘留。ADI 0-25mg/kg （以山梨酸計(jì)， FAO/WHO1 994）， LD50 4920mg/kg （大 鼠、經(jīng)口）， GRAS （ FDA， 182.3640 1994） ，其毒性僅為食鹽的 1/2 ，是苯 甲酸鈉的 1/40 。但是如果食品中添加的山梨酸超標(biāo)嚴(yán)重，消費(fèi)者長(zhǎng)期服用， 在一定程度上會(huì)抑制骨骼生長(zhǎng)，危害腎、肝臟的健康。3、穩(wěn)定性 山梨酸（鉀）在密封狀態(tài)下穩(wěn)定，暴露在潮濕的空氣中易吸水，氧化而 變色。山梨酸鉀對(duì)熱穩(wěn)定性較好，分解溫度高達(dá)270。4、使用范圍揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文目前已廣泛地用于食品、飲料、醬菜、煙草、醫(yī)藥、化妝品、

9、農(nóng)產(chǎn)品、 飼料等行業(yè)中，從發(fā)展趨勢(shì)看，其應(yīng)用范圍還在不斷擴(kuò)大。山梨酸（鉀）屬酸性防腐劑，在接近中性（ pH6.0 6.5） 的食品中仍有較好的防腐作用，而苯甲酸 （鈉） 的防腐效果在 pH4時(shí)，效果已明顯下降， 且有不良味道。5、主要特點(diǎn)（1）防霉效果良好。山梨酸及鉀鹽 的防霉能力明顯高于苯甲酸及 鹽類， 山梨酸鉀的防霉效果是苯甲酸鈉的 5 10 倍。山梨酸的用量一般在 0.2 1.0g/kg 之間。（2）產(chǎn)品毒性低、安全性高。山梨酸鹽的毒副作用只是苯甲酸鹽的 1/4 、 食鹽的 1/2 。山梨酸及鉀鹽在人體內(nèi)的安全使用范圍為：每天每千克體重的 使用量不超過(guò) 25 毫克。（3）不改變食品特性。

10、山梨酸是一 種不飽和脂肪酸，進(jìn)入人體后 ，參與 人體的新陳代謝過(guò)程，代謝產(chǎn)物為二氧化碳和水。所以，山梨酸可以看作是 食品的一部分，在食品中應(yīng)用，不會(huì)破壞食品的色、香、味和營(yíng)養(yǎng)成分。（4）應(yīng)用范圍寬廣。山梨酸及鉀鹽可以用于飲料、酒、調(diào)味品、肉制品、 水產(chǎn)制品、醬腌菜等多種食品的防腐之中，且對(duì)水果保鮮也有效果。（5）使用方便。在使用山梨酸及鉀 鹽時(shí)，可以直接添加，也可以 噴灑或 者浸漬。正是由于其具有使用靈活的特點(diǎn)，所以，聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織、世界衛(wèi) 生組織、美國(guó)、英國(guó)、日本以及中國(guó)、東南亞國(guó)家，都推薦山梨酸及鉀鹽作 為多種食品的防腐保鮮劑。6、主要指標(biāo)山梨酸的質(zhì)量指標(biāo)：應(yīng)符合 GB1905 2000

11、技術(shù)要求。（1）色澤及外形：白色結(jié)晶粉末。（2）熔點(diǎn)： 132 135。（3）含量（以干基計(jì)）： 99.0% 101.0%。（4）灼燒殘?jiān)?0.2%。（5）重金屬（以 Pb 計(jì)）： 0.001%。（6）砷牗以 As 計(jì)牘： 0.0002% 。揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文（7）水分： 0.5%。（8）貯存：存放在陰涼干燥處，避光，禁止與有毒有害物品共同存放。7、用量介紹 山梨酸類有山梨酸、山梨酸鉀和山梨酸鈣三類品種。山梨酸不溶于水使 用時(shí)須先將其溶于乙醇或硫酸氫鉀中，使用時(shí)不方便且有刺激性，故一般不 常用；山梨酸鈣 FAO/WHO規(guī)定其使用范圍小，所以也不常使用；山梨酸鉀則 沒(méi)有它們的缺點(diǎn)，易

12、溶于水、使用范圍廣， 我們經(jīng)?？梢栽谝恍╋嬃?、果脯、 罐頭等食品看到它的身影；在這里我重點(diǎn)介紹一下山梨酸鉀：它為不飽和六 碳酸；一般市場(chǎng)上出售的山梨酸鉀呈白色或淺黃色顆粒，含量在98%102%；無(wú)臭味、或微有臭味，易吸潮、易氧化而變褐色，對(duì)光、熱穩(wěn)定，相對(duì)密度 1.363 ，熔點(diǎn)在 270分解，其 1%溶液的 pH=78。山梨酸鉀為酸性防腐劑， 具有較高的抗菌性能，抑制霉菌的生長(zhǎng)繁殖；其主要是通過(guò)抑制微生物體內(nèi) 的脫氫酶系統(tǒng)，從而達(dá)到抑制微生物的生長(zhǎng)和起防腐作用，對(duì)細(xì)菌、霉菌、 酵母菌均有抑制作用；其效果隨 pH的升高而減弱， pH達(dá)到 3 時(shí)抑菌達(dá)到頂 峰， pH達(dá)到 6 時(shí)仍有抑菌能力，但

13、最底濃度（ MIC）不能底于 0.2%，實(shí)驗(yàn)證 明 pH=3.2 比 pH=2.4 的山梨酸鉀溶液浸漬， 未經(jīng)殺菌處理的食品的保存期短 2 4 倍。山梨酸、山梨酸鉀和山梨酸鈣它們?nèi)N的作用機(jī)理相同，毒性比苯甲酸 類和尼泊金酯要小，日允許量為 25mg/Kg ，苯甲酸 5 倍，尼泊金酯的 2.5 倍 是一種相對(duì)安全的食品防腐劑；在我國(guó)可用于醬油、醋、面醬類、果醬類、 醬菜類、罐頭類和一些酒類等等食品。8、應(yīng)用實(shí)例（1）山梨酸在酒類和飲料中的應(yīng)用。 蘇打類飲料：按照 0.03% 0.04%的比例添加山梨酸。 鮮橘汁、山楂汁等飲料：按照0.02%的比例添加山梨酸，可以將保存期延長(zhǎng)到 6 月。 其他類

14、非酒精飲料：按照 0.04% 0.05%的比例添加山梨酸。（2）山梨酸在醬油、醬制品和腌菜中的應(yīng)用。揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文 醬油：按照 0.01%的比例添加山梨酸，在高溫季節(jié)放置70 天，可以使醬油不發(fā)生長(zhǎng)霉變質(zhì)的問(wèn)題。 醬類制品：由于類品比較黏稠，山梨酸在其中不易均勻分散?？梢栽?產(chǎn)品灌裝之前，在加熱的情況下，加入相應(yīng)濃度的山梨酸溶液。 醬油腌菜：可將山梨酸溶解于冰醋酸之中，然后加入腌菜內(nèi)，添加量 在 1.0g/kg 之內(nèi)，并將 pH值控制在 4.0 4.5 之間。 酒糟腌菜：可以先將山梨酸溶解于乙醇、燒酒或者料酒中，然后加入 腌菜內(nèi)，添加量為 0.75 1.00g/kg 。 醋腌菜：

15、將山梨酸直接加入到物料之中，添加量為 0.5g/kg 。 腌小黃瓜、甜菜根及其他腌菜：可以在含有食鹽的醋中加入適量的山 梨酸鉀（按照食鹽的 0.1%的量添加）。為了防止腌菜鹽水發(fā)生混濁現(xiàn)象，可 以先將食鹽、香料和山梨酸鉀溶解于水中，然后添加醋。（3）山梨酸及鉀鹽在水產(chǎn)制品中的應(yīng)用 魚糕食品：魚糕類制品的 pH值在 6.8 7.2 之間。如果降低 pH 值， 則會(huì)影響魚糕的彈性。而山梨酸又是一種酸性防腐劑，所以，山梨酸的用量 不宜超過(guò) 1.0g/kg 為了解決 pH 值和魚糕彈性相矛盾的問(wèn)題，可以使用山梨 酸和山梨酸鉀的混合物，也可以單獨(dú)使用山梨酸鉀。 魚肉香腸： 按照 0.1% 0.2%的用量

16、向魚肉香腸中添加山梨酸和山梨酸 鉀的混合物，在 30的情況下貯藏兩個(gè)星期，這種香腸不會(huì)變質(zhì)；而對(duì)照樣 品在一個(gè)星期后就會(huì)變質(zhì)。當(dāng)將魚肉香腸的 pH值調(diào)節(jié)到小于 6 時(shí)，在 10 15的溫度下，這種魚肉香腸可以保存7 個(gè)星期而不變質(zhì)。 魚干制品：這類食品的干燥程度很高，水分含量在30%以下的魚干制品，一般不會(huì)發(fā)生細(xì)菌腐敗問(wèn)題，但會(huì)產(chǎn)生霉變現(xiàn)象。添加山梨酸，可以有 效防止魚干制品中霉變問(wèn)題的發(fā)生，山梨酸的用量為 1.0g/kg 。 熏魚制品：在熏魚制品上噴灑濃度為5%10%的山梨酸鉀溶液，噴灑過(guò)程可以在熏制前進(jìn)行，也可以在熏制中或者熏制后實(shí)施。 醬油烹煮的魚蝦： 按照 0.1%用量添加山梨酸的此類

17、食品， 在 1015 的溫度下，可以貯存兩個(gè)月而不變質(zhì)。揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文 鮮魚、鮮蝦及其他水產(chǎn)品：將鮮魚等水產(chǎn)品洗凈后，浸入含有山梨酸 的保鮮溶液中 20s ，然后排去溶液，將魚冷藏。保鮮溶液的配方為：山梨酸 1.0% 5.0%、甘油 1.0% 20%、聚乙烯醇 0.3%3.0%，其余皆為水。（4）山梨酸在肉制品及香腸中的應(yīng)用 干肉、干香腸、熏火腿和其他類似的干肉制品可以浸泡在濃度為 5 15的山梨酸鉀溶液中，保持 30 秒鐘。 一般肉料：先按照 0.05%0.1%的用量向肉料中添加山梨酸或者山梨 酸鉀，接著按照 0.01% 0.5%的用量加入 C10 或者 C12脂肪酸甘油酸酯。

18、另 外，在肉料中加入亞硝酸鉀（用量為20ppm 30ppm）和六偏磷酸鈉。 肉餡：按照 0.08% 0.1%的用量添加山梨酸，或者使用山梨酸和山梨 酸鉀的混合物。 熟雞肉： 將熟雞肉放在山梨酸鉀保鮮溶液中浸泡30 秒鐘， 然后在 4的條件下貯存，可以保鮮 20 天。山梨酸鉀保鮮溶液的配方為： 10的檸檬 酸、 6的山梨酸鉀、 34的改性玉米淀粉、 50%的水、保鮮溶液的 pH 值為 3.2 。 生鮮禽肉：將含有山梨酸的保鮮液噴灑到生鮮禽肉表面，在 7的條 件下儲(chǔ)存， 18 天后，產(chǎn)品沒(méi)有發(fā)生變質(zhì)現(xiàn)象；而對(duì)照樣品在5 天后就發(fā)生變質(zhì)現(xiàn)象。保鮮液的配方為：含有 7.5%山梨酸的丙二醇 70 份，水

19、 20 份，甘油 10 份。 生鮮雞腿、雞胸：用濃度為 10%的山梨酸溶液浸泡雞腿、雞胸30 秒，在 4 的情況下，可以存放 20 天，保鮮時(shí)間是對(duì)照樣的兩倍。（5）山梨酸在蔬菜和水果保鮮中的應(yīng)用。 蔬菜、水果：將蔬菜、水果與山梨酸保鮮劑一同放入聚乙烯袋中、密 封，在 30的情況下保存一個(gè)月以上，可以保持蔬菜、水果的綠色度不變。 山梨酸保鮮劑的配方為： 80 份過(guò)氧化鈣， 3 份山梨酸， 70 份沸石，保鮮劑和 水果的重量比為 120 。 蘋果：將濃度為 0.05%的保鮮液噴灑在蘋果的表面，在常溫下貯存 4 個(gè)月，僅有 3.2% 6.0%的蘋果發(fā)生變質(zhì)。保鮮液的配方為：山梨酸 1 份，滑 石粉

20、 4 份，水 95 份。揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文 蔬菜罐頭：按照 0.1%的比例添加山梨酸，可以防止馬口鐵生銹。 番茄沙司：打開(kāi)瓶蓋后，可按照 0.025%的比例添加山梨酸。先將山梨 酸溶解于醋酸中，然后加入到番茄沙司中。 干果：用濃度為 2%5%的山梨酸鉀溶液浸泡或者噴灑干果。 煮制豆類食品：將山梨酸的添加量控制在千分之一以下。要注意調(diào)整 物料的 pH值，當(dāng) pH 值在 7.0 以上時(shí)，需要在物料中加入少量的食用酸（多 為檸檬酸，將 pH值控制在 6.3 6.5 之間。（6）山梨酸在干酪保鮮中的應(yīng)用。 硬干酪： 用濃度為 20%40%的山梨酸鉀溶液噴灑物料， 或者將物料浸 泡在山梨酸鉀溶

21、液之中。 干酪粉：可以直接添加粉末狀山梨酸或者山梨酸鈣。 食鹽鹽化干酪：使用山梨酸鉀的方法有3 種，一是在鹽溶液中加入山梨酸鉀，用量為 0.2%1.0%，然后用這種鹽溶液來(lái)制作干酪；二是在干酪成 品出售之前，用濃度為 10%的山梨酸鉀溶液浸泡或噴灑。三是用含有一定量 酒精的山梨酸溶液浸泡或者噴灑干酪。9、注意事項(xiàng)（1）山梨酸只有透過(guò)細(xì)胞壁進(jìn)入微生物體內(nèi)才能起作用，分子態(tài)的抑菌活 性比離子態(tài)強(qiáng)。當(dāng)溶液 pH小于 4時(shí)，抑菌活性強(qiáng)，而 pH 大于 6時(shí)，抑菌活性 降低。（2）山梨酸與過(guò)氧化氫溶液混合使用時(shí)，抗微生物活性會(huì)顯著增強(qiáng)。（3）山梨酸主要對(duì)霉菌、酵母和好氣性腐敗菌有效，而對(duì)厭氣性細(xì)菌 和乳

22、酸菌幾乎無(wú)作用。山梨酸在微生物數(shù)量過(guò)高的情況下發(fā)揮不了作用，因 此它只適用于具有良好的衛(wèi)生條件和微生物數(shù)量較低的食品的防腐。（4）山梨酸為酸型防腐劑，其作用受pH 值影響。但它的酸性較苯甲酸弱，適宜 pH 范圍較苯甲酸廣。配制山梨酸溶液時(shí)，可先將山梨酸溶解在乙 醇、碳酸氫鈉或碳酸鈉的溶液中，隨后再加入食品中。溶解時(shí)不要使用銅、 鐵容器。（5）山梨酸為酸型防腐劑，其作用受pH 值影響。但它的酸性較苯甲酸弱，適宜 pH 范圍較苯甲酸廣。配制山梨酸溶液時(shí)，可先將山梨酸溶解在乙揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文醇、碳酸氫鈉或碳酸鈉的溶液中，隨后再加入食品中。溶解時(shí)不要使用銅、 鐵容器。（6）山梨酸用于需要加

23、熱的產(chǎn)品中，為防止山梨酸受熱揮發(fā)，應(yīng)在加 熱過(guò)程的后期添加。10、測(cè)定方法 ：（1）紫外分光光度法 5-6紫外分光光度法為采用紫外分光光度計(jì) , 通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線法而實(shí)現(xiàn)食品中山 梨酸鉀含量的測(cè)定。山梨酸為共扼型有機(jī)化合物 , 在近紫外光區(qū)具有較強(qiáng)的吸 收。并通過(guò)實(shí)測(cè)證實(shí) , 山梨酸在 263nm處具有最大吸收。另一方面 , 山梨酸在水 中具有適當(dāng)?shù)娜芙舛?。山梨酸?20時(shí)溶解度為 0.21g/100mL 水, 在 30時(shí)為 0.25g/100mL 水 。因此可將標(biāo)樣和樣品處理成水溶液。 采用紫外分光光度計(jì) , 通 過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線法而實(shí)現(xiàn)山梨酸鉀含量的測(cè)定。該方法具有簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)。（2） 氣相色譜

24、法氣相色譜法是在以適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ嘧龀傻闹軆?nèi)， 利用氣體（載氣） 作為移動(dòng) 相，使試樣（氣體、液體或固體）在氣體狀態(tài)下展開(kāi)，在色譜柱內(nèi)分離后，各種 成分先后進(jìn)入檢測(cè)器，用記錄儀記錄色譜譜圖。 在對(duì)裝置進(jìn)行調(diào)試后，按各單 體的規(guī)定條件調(diào)整柱管、 檢測(cè)器、 溫度和載氣流量。 進(jìn)樣口溫度一般應(yīng)高于柱溫 3050。色譜上分析成分的峰的位置， 以滯留時(shí)間 （從注入試樣液到出現(xiàn)成分 最高峰的時(shí)間） 和滯留容量（滯留時(shí)間載氣流量） 來(lái)表示。這些在一定條件下， 就能反應(yīng)出物質(zhì)所具有特殊值， 并據(jù)此確定試樣成分。 此方法分離效率高， 分析 速度快，樣品用量少和檢測(cè)靈敏度高， 選擇性好，應(yīng)用范圍廣， 應(yīng)用的主要領(lǐng)域

25、 有石油工業(yè)、 環(huán)境保護(hù)、臨床化學(xué)、 藥物學(xué)、食品工業(yè)。定量方法可分以下三種： 內(nèi)標(biāo)法：所謂內(nèi)標(biāo)法是將一定量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物，加入到準(zhǔn)確稱量的 試樣中，根據(jù)被測(cè)物和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量及在色譜圖上相應(yīng)的峰面積比， 求出某組分 的百分含量。 當(dāng)只需測(cè)定試樣中某幾各組分時(shí)， 而且試樣中所有組分不能全部出 峰時(shí)，可用此法。此法適合于微量物質(zhì)的分析。該法的計(jì)算公式如下：m s f si A ix i % 100 %mA揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文其中， f si 是被測(cè)組分相對(duì)于內(nèi)標(biāo)物的相對(duì)校正因子。該法的優(yōu)點(diǎn)是：受操作 條件的影響較小， 定量結(jié)果較為準(zhǔn)確， 使用上不象歸一化法那樣受到限制。 該法 的缺點(diǎn)是

26、：每次分析必須準(zhǔn)確稱量被測(cè)物和內(nèi)標(biāo)物，不適合于快速分析。內(nèi)標(biāo)物的選擇十分重要。它應(yīng)該是試樣中不存在的物質(zhì)；加入的量應(yīng)接近于 被測(cè)組分色譜；同時(shí)要求內(nèi)標(biāo)物的色譜峰位于被測(cè)組分色譜附近或幾個(gè)被測(cè)組分 色譜峰的中間，并與這些組分完全分離；內(nèi)標(biāo)物必須不與樣品發(fā)生反應(yīng)等。標(biāo)準(zhǔn)曲線法：取標(biāo)準(zhǔn)被測(cè)成分，按依次增加或減少階段法，各自調(diào)制成標(biāo) 準(zhǔn)液， 注入一定量后， 按色譜圖取標(biāo)準(zhǔn)被測(cè)成分的峰面積或峰高為縱坐標(biāo)， 而以 標(biāo)準(zhǔn)被測(cè)成分的含量為橫坐標(biāo)， 制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。 然后按單體中所規(guī)定的方法制備 試樣液。取試樣液按制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)相同的條件作出色譜， 求出被測(cè)成分的峰面積 和峰高，再按標(biāo)準(zhǔn)曲線求出被測(cè)成分的含量。歸一

27、化法：當(dāng)試樣中各組分都能流出色譜柱且在檢測(cè)器上均有響應(yīng)，各組 分的相對(duì)校正因子已知時(shí)， 可用此法定量。 組分 i 在混合物中的百分含量可由下 式計(jì)算：f i A ix i % 100 %ifi Ai其中 fi 可為質(zhì)量校正因子，也可為摩爾校正因子。若各組分的定量校正因 子相近或相同（如同系物中沸點(diǎn)接近的組分），則上式可簡(jiǎn)化為：Aix i % 100 %iA i該法簡(jiǎn)稱為歸一化法。歸一化法的優(yōu)點(diǎn)是：簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，當(dāng)操作條件如進(jìn)樣 量、流速變化時(shí)，對(duì)定量結(jié)果影響很小。 缺點(diǎn)是： 對(duì)該法的苛刻要求限制了該法 的使用。該法適合于常量物質(zhì)的定量。（3）高效液相色譜法 HPLC高效液相色譜法是以液體為流動(dòng)相

28、， 采用高壓輸液系統(tǒng)， 將具有不同極性的 單一溶劑或不同比例的混合溶劑、 緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱， 在 柱內(nèi)各成分被分離后， 進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)， 從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。 高效液相 色譜法有“三高一廣一快”的特點(diǎn)：10揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文 高壓：流動(dòng)相為液體， 流經(jīng)色譜柱時(shí)， 受到的阻力較大， 為了能迅速通過(guò) 色譜柱，必須對(duì)載液加高壓。 高效：分離效能高。 可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果， 比工業(yè) 精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。 高靈敏度：紫外檢測(cè)器可達(dá) 0.01ng ，進(jìn)樣量在 uL 數(shù)量級(jí)。 應(yīng)用范圍廣： 百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析

29、， 特別 是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢(shì)。 分析速度快、 載液流速快： 較經(jīng)典液體色譜法速度快得多， 通常分析一個(gè) 樣品在 1530 分鐘，有些樣品甚至在 5 分鐘內(nèi)即可完成，一般小于 1 小時(shí)。此 外高效液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、 樣品不被破壞、 易回收等優(yōu)點(diǎn)， 但也有 缺點(diǎn)，與氣相色譜相比各有所長(zhǎng)， 相互補(bǔ)充。 高效液相色譜的缺點(diǎn)是有 “柱外效 應(yīng)”。在從進(jìn)樣到檢測(cè)器之間，除了柱子以外的任何死空間（進(jìn)樣器、柱接頭、 連接管和檢測(cè)池等） 中，如果流動(dòng)相的流型有變化， 被分離物質(zhì)的任何擴(kuò)散和滯 留都會(huì)顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬， 柱效率降低。 使高效液相色譜檢

30、測(cè)器的靈敏度 不及氣相色譜。（4）薄層色譜法 7-8薄層色譜，或稱薄層層析 （thin layer chromatography） ，是以涂布于支持 板上的支持物作為固定相， 以合適的溶劑為流動(dòng)相， 對(duì)混合樣品進(jìn)行分離、 鑒定 和定量的一種層析分離技術(shù)進(jìn)一步說(shuō)， 它就是利用各成分對(duì)同一吸附劑吸附能力 不同，使在移動(dòng)相（溶劑）流過(guò)固定相（吸附劑）的過(guò)程中，連續(xù)的產(chǎn)生吸附、 解吸附、再吸附、再解吸附， 從而達(dá)到各成分的互相分離的目的。 這是一種快速 分離諸如脂肪酸、 類固醇、氨基酸、核苷酸、 生物堿及其他多種物質(zhì)的特別有效 的層析方法，從 50 年代發(fā)展起來(lái)至今，仍被廣泛采用。（5） 高效毛細(xì)管電

31、泳 （HPCE）高效毛細(xì)管電泳 （HPCE）技術(shù)對(duì)具有電化學(xué)活性的物質(zhì)的分離檢測(cè)具有優(yōu)勢(shì) . 它是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道， 以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力， 依據(jù)樣品中各組 分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。 他的優(yōu)點(diǎn)是高 靈敏度、高分辨率、高速度。當(dāng)然 HPCE還是一種正在發(fā)展中的技術(shù) , 有些理論研 究和實(shí)際應(yīng)用正在進(jìn)行與開(kāi)發(fā)。11揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文二、實(shí)驗(yàn)部分1、實(shí)驗(yàn)原理采用雙氧水硫酸溶液氧化山梨酸， 之后進(jìn)一步與硫代巴比妥酸進(jìn)行顯色反 應(yīng)，采用分光光度法測(cè)定食品中山梨酸的含量。2、儀器與試劑儀器722E型可見(jiàn)分光光度計(jì)水浴裝置25mL比色管容量瓶試劑山梨酸

32、標(biāo)準(zhǔn)貯備液 (213.2mg/L) ：準(zhǔn)確稱取山梨酸 0.2132g 于 100mL燒杯中， 用 0.1mol/LNaOH 溶解后，移入 1000mL容量瓶中，用上述 NaOH溶液稀釋，定容 至刻度，備用。山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 (5.33mg/L) ：準(zhǔn)確吸取 6.25mL 213.2mg/L 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液 于250mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度。5g/L 硫代巴比妥酸溶液：稱取 0.50g 硫代巴比妥酸溶于 20mL蒸餾水中，加 1.0mol/L NaOH溶液10mL，使之完全溶解以后，加 1.0mol/L HCL溶液1lmL, 用蒸餾 水稀釋至 100mL，搖勻。0.1 H202溶液：用

33、量筒量取 1.3mL密度為 1.11g/mL，質(zhì)量百分?jǐn)?shù)含量為 30% 的H2O2，移入加有 100mL水的燒杯中，轉(zhuǎn)移至 250mL試劑瓶中稀釋至 250mL，, 蓋上 瓶塞搖勻。0.15mol/L H 2S04溶液：用量筒量取 1.1mL密度為 1.84g/mL，質(zhì)量百分?jǐn)?shù)含量 為 95.6%的濃硫酸，緩緩注入水中，冷卻后稀釋至 250mL，貯存于試劑瓶中。0.1mol/L NaOH溶液：稱取 1.0g 固體氫氧化鈉于 250mL燒杯中，加入 100mL水 溶解后移入試劑瓶中，稀釋至 250mL，蓋上瓶塞，搖勻。1.0mol/L NaOH溶液：稱取 10.0g 固體氫氧化鈉于 250mL燒

34、杯中，加入 100mL 水溶解后移入試劑瓶中，稀釋至 250mL，蓋上瓶塞，搖勻。1.0mol/L HCl溶液：用量筒量取 20.0mL密度為 1.19g/mL ，質(zhì)量百分?jǐn)?shù)含量為12揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文37%的濃鹽酸，移入加有 100mL水的燒杯中，轉(zhuǎn)移至 250mL試劑瓶中稀釋至 250mL， 蓋上瓶塞，搖勻。0.25mol/L NaHC30溶液：稱取 5.25g 固體 NaHC30于 250mL燒杯中，加入 100mL 水溶解后移入試劑瓶中，稀釋至 250mL，蓋上瓶塞，搖勻。所用試劑均為分析純?cè)噭?，所使用蒸餾水均為二次去離子水3、試驗(yàn)方法準(zhǔn)確吸取 5.33mg/L山梨酸標(biāo)準(zhǔn)液

35、4.00mL于 25mL比色管中，加入 0.1%H202溶液 1.0mL和0.15mol/L H2S04 1.2mL，搖勻后至 60水浴中加熱 40min，冷水流冷卻后 加5g/L 硫代巴比妥酸溶液 4.0mL，搖勻，置沸水浴中加熱 20min，冷卻后用蒸餾水 稀釋至刻度， 以試劑空白作參比， 采用1cm比色皿，于 530nm波長(zhǎng)處測(cè)定溶液的吸 光度。三、方法研究1、吸收光譜和測(cè)量波長(zhǎng)的選擇取4.00mL 5.33mg/L 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)液，按實(shí)驗(yàn)步驟方法用試劑空白作參比，采 用 lcm比色皿，在 500560nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)每隔 10nm波長(zhǎng)測(cè)定一次溶液的吸光度， 在最大吸收峰附近每隔 2nm波長(zhǎng)

36、測(cè)定一次溶液的吸光度，不同波長(zhǎng)對(duì)應(yīng)的吸光度 曲線。表1 不同波長(zhǎng)下的吸光度波長(zhǎng)/nm500510520522524526528530A0.1700.1850.2060.2310.2630.2950.3130.321續(xù)表1波長(zhǎng)/nm532534536538540550560570A0.3160.3040.2950.2830.2710.1570.0840.033由上表數(shù)據(jù)繪制以波長(zhǎng)（ nm）為橫坐標(biāo)，吸光度（ A）為縱坐標(biāo)作吸收曲線 如圖 1。13揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文圖1 吸收曲線 測(cè)定結(jié)果表明，最大吸光度對(duì)應(yīng)的吸收波長(zhǎng)為 530nm，故選此波長(zhǎng)為測(cè)定條 件波長(zhǎng)。2、氧化反應(yīng)溫度在不同的氧

37、化反應(yīng)溫度時(shí)， 氧化反應(yīng)進(jìn)行的程度是不同的， 因此測(cè)定體系吸 光度也是不同的。按試驗(yàn)方法，改變氧化反應(yīng)溫度，在 1080水浴中 （ 溫度間 隔10）加熱20min。數(shù)據(jù)見(jiàn)表 2。表 2 氧化反應(yīng)溫度對(duì)吸光度的影響溫度/01020304050607080A00.0680.1360.2010.2630.3090.3160.3120.258由上表數(shù)據(jù)繪制以溫度（）為橫坐標(biāo)，吸光度（ A）為縱坐標(biāo)作工作曲線如圖2。14揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文圖2 氧化反應(yīng)溫度影響曲線測(cè)定結(jié)果表明，在 5070溫度范圍內(nèi)，反應(yīng)體系具有較大吸光度且穩(wěn)定， 選擇氧化反應(yīng)溫度為 60。氧化反應(yīng)溫度高于 70時(shí)，由于丙二醛

38、被進(jìn)一步氧化 生成酸，導(dǎo)致體系吸光度下降。3、顯色酸度顯色反 應(yīng)的 酸度 條件同 樣直 接影 響顯 色反 應(yīng)程度 。在 反應(yīng) 體系 中加入 015mol/L H2S04溶液分別為 0.0 2.0mL的用量（用量間隔 0.2mL）條件下，按試驗(yàn) 方法測(cè)定不同酸度對(duì)吸光度的影響。表3 顯色酸度對(duì)吸光度的影響H2S04用量/mL0.20.4 0.6 0.8A00.0620.1310.2030.284續(xù)表2H2S04用量/mL1.01.21.41.61.82.0A0.3320.4460.4510.4480.4300.40915揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文由上表數(shù)據(jù)繪制以 0.15mol/L H 2S0

39、4用量（ mL）為橫坐標(biāo)，吸光度（ A）為縱坐標(biāo)作工作曲線如圖 3圖 3 顯色酸度對(duì)吸光度的影響曲線測(cè)定結(jié)果表明，在 0.15mol/LH 2SO4溶液用量為 1.2 1.6mL范圍內(nèi)，體系的吸 光度較大且穩(wěn)定，故采用 0.15mol/L H 2S04溶液用量為 1.4mL。4、顯色劑用量顯色劑硫代巴比妥酸的用量對(duì)測(cè)定體系吸光度的影響顯著。 在體系中分別加入05.0mL 5g/L硫代巴比妥酸溶液 （用量間隔 0.5mL），按試驗(yàn)方法測(cè)定溶液的吸 光度。表4 顯色劑用量對(duì)吸光度的影響顯色劑/mL01.02.03.04.05.0A0.000.1890.2830.3090.3190.315由上表數(shù)據(jù)

40、繪制以顯色劑用量（ mL）為橫坐標(biāo)，吸光度（ A）為縱坐標(biāo)作工作曲線如圖 416揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文圖4 顯色劑用量對(duì)吸光度的影響曲線結(jié)果表明，當(dāng)顯色劑硫代巴比妥酸的用量在 3.5mL以上時(shí)，測(cè)定體系的吸光 度較大且保持穩(wěn)定，實(shí)際測(cè)定時(shí)選用顯色劑硫代巴比妥酸的用量為 4.0mL。5、工作曲線分別取不同量 （0 7mL）的5.33mg/L 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)液于 25mL比色管中，以下試 驗(yàn)方法操作，繪制工作曲線如圖 5所示。表 5 工作曲線表濃度1.21.4/ g/mL0.00.20.40.60.81.0A00.0830.1560.2250.3030.3770.4510.523由上表數(shù)據(jù)繪制以

41、濃度（ g/mL）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)作工作曲 線曲線如圖 5。17揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文圖5 工作曲線結(jié)果 表明在 線性范圍內(nèi)吸 光度與山梨酸濃度 ( g/mL)間的 關(guān)系為 ：2A=0.3715c+0.0047 ，R =0.9998 。四、樣品測(cè)定1、樣品溶液的制備和測(cè)定方法精確稱取 3.9100g已磨細(xì)的樣品溶入 50mL水中，轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中用蒸餾水 定容、搖勻。移取 10mL此溶液于 250mL分液漏斗中，滴加 0.15mol/L H 2S04溶液調(diào) 整pH至2.0 ，加入l00mL氯仿振蕩提取山梨酸 10min。靜置后將大部分氯仿有機(jī)相 轉(zhuǎn)移至碘量瓶中，加入 5.0g 無(wú)水Na2SO4振蕩后靜置。移取上述氯仿溶液 50mL轉(zhuǎn)移 至盛有25ml0.25mol/L NaHC03溶液的100mL分液漏斗中，振蕩提取山梨酸鈉 5min 后，靜置分層， 小心分離棄去氯仿層， 得25mL樣品水溶液待測(cè)定； 以不加樣品的 空白同上處理作空白液，進(jìn)一步按試驗(yàn)方法分別測(cè)定。2、精密度實(shí)驗(yàn)按1中擬定的樣品溶液的制備和測(cè)定方法， 對(duì)擬合含山梨酸防腐劑的樣品 ( 自 制山梨酸添加量分別為 0.302 、0.501mg/g的蘋果泥 )進(jìn)行了精密度實(shí)驗(yàn)，同一樣 品測(cè)定 6次，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表 6。18揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院