基因診斷和基因治療參考PPT

1、學(xué)會(huì)選擇 懂得放棄 愿意奮斗 知道感恩,二代基因測(cè)序技術(shù)用于臨床診斷,2011，臨床研究性應(yīng)用 無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè) 癌癥及其他疾病風(fēng)險(xiǎn)的基因檢測(cè) 神話般的“基因體檢” 國(guó)內(nèi)基因測(cè)序診斷產(chǎn)品無一經(jīng)過醫(yī)療器械審批注冊(cè),二、自本通知發(fā)布之日起，包括產(chǎn)前基因檢測(cè)在內(nèi)的所有醫(yī)療技術(shù)需要應(yīng)用的檢測(cè)儀器、診斷試劑和相關(guān)醫(yī)用軟件等產(chǎn)品，如用于疾病的預(yù)防、診斷、監(jiān)護(hù)、治療監(jiān)測(cè)、健康狀態(tài)評(píng)價(jià)和遺傳性疾病的預(yù)測(cè)，需經(jīng)食品藥品監(jiān)管部門審批注冊(cè)，并經(jīng)衛(wèi)生計(jì)生行政部門批準(zhǔn)技術(shù)準(zhǔn)入方可應(yīng)用。已經(jīng)應(yīng)用的，必須立即停止,基因診斷,Gene Diagnosis,李文強(qiáng),生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室 河南省生物精神病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,一.

2、基因診斷的基本概念和特點(diǎn),一.基因診斷的基本概念和特點(diǎn),25%的生理缺陷、30%的兒童死亡都是由遺傳病引起，基因與人類健康的關(guān)系如此緊密，實(shí)現(xiàn)基因診斷成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)必然需求,主要內(nèi)容,基因診斷的基本概念和特點(diǎn) 基因診斷的內(nèi)容和基本策略 基因診斷的基本步驟 基因診斷的常用技術(shù)方法 基因診斷的應(yīng)用及意義,一.基因診斷的基本概念和特點(diǎn),生化診斷,免疫診斷,臨床診斷,一.基因診斷的基本概念和特點(diǎn),DNA確定為遺傳物質(zhì) 1976年加州大學(xué)華裔科學(xué)家 簡(jiǎn)悅威用核酸分子雜交首次 對(duì)珠蛋白生成障礙性貧血進(jìn)行診斷 人類基因組計(jì)劃 人類單體型計(jì)劃 千人基因組計(jì)劃,疾病與基因的關(guān)系愈加明晰，基因診斷進(jìn)入快速發(fā)展期,一

3、.基因診斷的基本概念和特點(diǎn),狹義:在基因（DNA或RNA)水平，用PCR、核酸雜交、基因重組、基因芯片等各種分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)特定基因存在與否、結(jié)構(gòu)變異和表達(dá)狀態(tài)的過程，對(duì)疾病作出診斷。 廣義：應(yīng)用于DNA指紋分析、個(gè)體識(shí)別、親子鑒別等司法鑒定，動(dòng)植物檢疫以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物中陽(yáng)性基因的檢測(cè)等方面,一.基因診斷的基本概念和特點(diǎn),目標(biāo)疾病：與基因有關(guān) 內(nèi)源性基因變異疾?。ㄏ忍?后天） 單基因病 多基因病 獲得性基因病 外源性基因（如病毒等）侵入機(jī)體引起的疾病,一.基因診斷的基本概念和特點(diǎn),特點(diǎn) 針對(duì)性強(qiáng)：特定基因 特異性高：針對(duì)序列的定性定量 靈敏度高：實(shí)現(xiàn)單分子診斷 穩(wěn)定性高：遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性，相

4、對(duì)于表型 應(yīng)用范圍廣：早期診斷，全程診斷,一.基因診斷的基本概念和特點(diǎn),實(shí)現(xiàn)基因診斷的要素 疾病或個(gè)體表型的本質(zhì)明確 遵循生物遺傳學(xué)基本規(guī)律 分子生物學(xué)技術(shù)與方法可靠完備,二.基因診斷的基本策略和內(nèi)容,基本策略,基因診斷策略,致病基因檢測(cè),連鎖遺傳標(biāo)志檢測(cè),基因表達(dá)定量分析,表型克隆基因分析,二.基因診斷的基本策略和內(nèi)容,基本內(nèi)容 檢測(cè)個(gè)體的基因序列的特征(多態(tài)性） 鐮刀狀紅細(xì)胞貧血:珠蛋白基因的第六個(gè)密碼子AT,表達(dá)產(chǎn)物：谷氨酸纈氨酸 基因突變分析（堿基插入，缺失，倒位等） 杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良：DMD基因突變以缺失,二.基因診斷的基本策略和內(nèi)容,基本內(nèi)容 基因表達(dá)產(chǎn)物分析 對(duì)mRNA進(jìn)行分析（A

5、FP） 檢測(cè)是否存在外源基因 感染性疾病 基因連鎖分析 存在遺傳標(biāo)記的疾病,三.基因診斷的基本步驟,獲得待檢樣品 分離純化DNA或RNA 選擇合適的技術(shù)手段 基因檢測(cè)分析,技術(shù)上已無任何障礙，繼續(xù)向簡(jiǎn)便化、高通量、低成本努力,四.基因診斷的常用技術(shù)方法,核酸分子雜交 PCR及相關(guān)技術(shù) 核酸序列分析技術(shù) 限制性酶譜分析技術(shù) 基因芯片,核酸分子雜交和PCR是基因診斷的基本技術(shù),四.基因診斷的常用技術(shù)方法,核酸分子雜交 Southern blot Northern blot Dot hybridization Reverse dot hybridization FISH: fluorescence

6、in situ hybridization,四.基因診斷的常用技術(shù)方法,核酸分子雜交 是指單鏈核酸分子（DNA或RNA）在特定條件下，與另一條互補(bǔ)的特異核酸鏈形成穩(wěn)定雙鏈的過程。 堿基互補(bǔ)： DNA與DNA雜交： A=T、 GC DNA與RNA雜交: A=U、 GC 變性：在一定溫度下，使核酸雙鏈解開為兩條單鏈； 復(fù)性：隨溫度逐漸恢復(fù)，變性的兩條單鏈重新形成互補(bǔ)雙鏈,四.基因診斷的常用技術(shù)方法,核酸分子雜交 利用核酸雙鏈的堿基互補(bǔ)、變性和復(fù)性的原理，可以用已知堿基序列的單鏈核酸片段作為探針，與待測(cè)樣本中的單鏈核酸互補(bǔ)配對(duì)，以判斷有無互補(bǔ)的同源核酸序列的存在,四.基因診斷的常用技術(shù)方法,Sout

7、hern blot是早期基因診斷的主力,四.基因診斷的常用技術(shù)方法,FISH,FISH熒光染色體原位雜交應(yīng)用最為廣泛,四.基因診斷的常用技術(shù)方法,點(diǎn)雜交Dot hybridization,探針雜交,NC膜,探針,正常人,突變純合子,突變雜合子,突變型,野生型,PCR及相關(guān)技術(shù),四.基因診斷的常用技術(shù)方法,PCR及相關(guān)技術(shù),四.基因診斷的常用技術(shù)方法,正常人,患者,擴(kuò)增,電泳,四.基因診斷的常用技術(shù)方法,核酸序列分析技術(shù),正常對(duì)照,病例SOX9基因HMG box內(nèi)發(fā)生單堿基置換突變,患兒,最直接、最確切的基因診斷方法,四.基因診斷的常用技術(shù)方法,限制性酶譜分析技術(shù),最經(jīng)典的基因診斷方法,H M

8、N,四.基因診斷的常用技術(shù)方法,基因芯片,基因芯片技術(shù)是應(yīng)用前景廣闊的基因診斷技術(shù),多基因多位點(diǎn)，基因表達(dá)分析，藥物敏感分析,五.基因診斷的應(yīng)用及意義,遺傳性疾病的基因診斷 腫瘤的基因診斷 傳染病的基因診斷 個(gè)體識(shí)別和物證分析,五.基因診斷的應(yīng)用及意義,遺傳性疾病的基因診斷 輔助遺傳病的臨床診斷 單基因遺傳病的基因診斷 ：已不存在任何技術(shù)障礙 產(chǎn)前診斷：高危人群，優(yōu)生優(yōu)育,1.1kb,五.基因診斷的應(yīng)用及意義,1.3kb,1.1kb,0.2kb,1,2,3,1、正常人 2、突變攜帶者 3、患者,1.1 kb,1.3kb,正常基因,突變基因,PCR-RE分析 MstII CCTGAGG-CCTG

9、TGG,鐮狀紅細(xì)胞貧血HBS-Beta株蛋白基因突變,五.基因診斷的應(yīng)用及意義,遺傳性疾病的基因診斷 疾病易感性及患病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè) 遺傳病患病風(fēng)險(xiǎn)分析： 常見遺傳病遺傳篩查， 疾病易感性預(yù)測(cè)性診斷：疾病易感基因檢測(cè),在一些有明顯遺傳傾向的腫瘤中，這二類基因的突變與腫瘤發(fā)生有密切關(guān)系 例： 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤與RB基因 李-佛美尼癥候群綜合征與p53基因 乳腺癌與BRCA-1基因,五.基因診斷的應(yīng)用及意義,腫瘤的基因診斷 檢測(cè)異常表達(dá)基因：甲胎蛋白 檢測(cè)腫瘤細(xì)胞基因變異：甲基化改變，序列改變 腫瘤易感基因變異：易感基因p53、p21,五.基因診斷的應(yīng)用及意義,傳染病的基因診斷 檢測(cè)病原體的遺傳物質(zhì) 檢測(cè)

10、病原體引起的基因表達(dá),多采用熒光定量PCR,HBV病毒,HIV病毒,SARS病毒,五.基因診斷的應(yīng)用及意義,個(gè)體識(shí)別和物證分析 嫌疑人生物材料的物證分析 親緣關(guān)系,物證,1,2,3,4,五.基因診斷的應(yīng)用及意義,意義 疾病診斷和風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)的有力工具 是遺傳病預(yù)防的基本支撐 可用于療效評(píng)價(jià)和個(gè)體化用藥指導(dǎo) 未來醫(yī)學(xué)基本支撐點(diǎn) 是個(gè)體識(shí)別和法醫(yī)學(xué)的核心技術(shù) 存在的問題 技術(shù)上需要簡(jiǎn)便、可靠、低成本 理論上需要普及 降低專業(yè)依賴性臨床化,基因治療,Gene Therapy,李文強(qiáng),生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室 河南省生物精神病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,2012年11月3日，歐盟委員會(huì)批準(zhǔn)了西方世界首個(gè)基因治療藥物G

11、lybera，標(biāo)志著修復(fù)基因缺陷的新穎醫(yī)療技術(shù)的一個(gè)里程碑。該藥用于治療一種極其罕見的遺傳性疾病脂蛋白脂肪酶缺乏癥。 預(yù)計(jì)每名患者的花費(fèi)將高達(dá)125萬歐元（約合160萬美元），該藥將創(chuàng)造昂貴現(xiàn)代醫(yī)藥的新紀(jì)錄,1990年，美國(guó)批準(zhǔn)了第一例臨床基因治療申請(qǐng)。患者為四歲女孩，由于缺失腺苷脫氨酶（ADA)基因而患有嚴(yán)重綜合性免疫缺陷癥,腺苷脫氨酶(ADA)缺乏的嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID,病因: 淋巴細(xì)胞缺乏ADA 腺苷、dATP堆積 破壞免疫功能 患兒很少活到成年,第一個(gè)基因臨床治療的方案(1990.9.14,NIH,治療策略： 淋巴細(xì)胞ADA酶 恢復(fù)至正常水平的 5%-10% 維持免疫系統(tǒng)功能 改

12、善病人癥狀,Ashanti de Silva, Now 26,主要內(nèi)容,基因治療的概念和特點(diǎn) 基因治療的基本策略 基因治療的基本方法 基因治療的應(yīng)用 基因治療的意義及前景,基因治療的概念和特點(diǎn),經(jīng)典概念(狹義概念)： 將具有正常功能的基因置換或增補(bǔ)患者體內(nèi)缺陷的基因，從而達(dá)到治療疾病的目的。 廣義概念： 將某些遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移至患者體內(nèi)，使其在體內(nèi)表達(dá)，或者在基因水平改變基因的表達(dá)，最終達(dá)到治療某種疾病的方法，均稱之為基因治療,基因治療的概念和特點(diǎn),拓展了傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的理論體系 從病因上解決部分疾病的治療問題 為大量遺傳病提供了治療手段 能帶動(dòng)醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)的整體進(jìn)展,基因治療的基本策略,基因置換 基

13、因增補(bǔ) 基因干預(yù) “自殺基因” 免疫基因治療 耐藥基因治療,基因治療的基本策略,基因置換 基因增補(bǔ) 基因干預(yù) “自殺基因” 免疫基因治療 耐藥基因治療,基因治療的基本策略,基因置換 定義：指將特定的目的基因?qū)胩囟?xì)胞，通過定位重組，以導(dǎo)入的正?；蛑脫Q基因組內(nèi)原有的缺陷基因。 目的：將缺陷基因的異常序列進(jìn)行橋正。對(duì)缺陷基因的缺陷部位進(jìn)行精確的原位修復(fù)，不涉及基因組結(jié)構(gòu)的任何改變,基因治療的基本策略,基因置換 要實(shí)現(xiàn)基因置換，需要采用同源重組技術(shù)使相應(yīng)的正?；蚨ㄏ?qū)胧荏w細(xì)胞的基因缺陷部位。 定向?qū)氲陌l(fā)生率約1/100萬，采用胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的方法，這種同源重組的檢出率最高可達(dá)1/10,基因

14、治療的基本策略,基因增補(bǔ) 定義：通過導(dǎo)入外源基因使靶細(xì)胞表達(dá)其本身不表達(dá)的基因。 類型： A:在有缺陷基因的細(xì)胞中導(dǎo)入相應(yīng)的正?；?，補(bǔ)償缺陷基因的功能而細(xì)胞內(nèi)的缺陷基因并未除去； B:向靶細(xì)胞中導(dǎo)入靶細(xì)胞本來不表達(dá)的基因，利用其表達(dá)產(chǎn)物達(dá)到治療疾病的目的,基因治療的基本策略,基因增補(bǔ),目標(biāo)位點(diǎn),目的基因,基因載體,染色體,基因治療的基本策略,基因干預(yù) 定義：采用特定的方式抑制某個(gè)基因的表達(dá)，或者通過破壞某個(gè)基因的結(jié)構(gòu)而使之不能表達(dá)，以達(dá)到治療疾病的目的。（區(qū)別于抗生素的基因水平調(diào)節(jié),基因治療的基本策略,自殺基因” 定義：自殺基因又稱前體藥物酶轉(zhuǎn)化基因，這種基因?qū)胧荏w細(xì)胞后可產(chǎn)生一種酶，它可

15、將原來無細(xì)胞毒性或低毒藥物前體轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒性物質(zhì)，將細(xì)胞本身殺死，這種基因被稱為“自殺基因”，可以通過整合位點(diǎn)等選擇目標(biāo)細(xì)胞,基因治療的基本策略,免疫基因治療 定義：通過將抗癌免疫增強(qiáng)細(xì)胞因子或MHC基因?qū)肽[瘤組織，以增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境中的抗癌免疫反應(yīng)。 耐藥基因治療 定義：化療過程中， 把產(chǎn)生抗藥物毒性的基因?qū)牖颊唧w內(nèi)，從而使患者能耐受更大劑量的化療,基因治療的基本方法,治療性基因的獲得 在了解疾病發(fā)生的分子機(jī)制基礎(chǔ)上， 選擇對(duì)疾病有治療作用的特定基因。 如，對(duì)單基因缺陷遺傳病，可用野生型（非突變）基因即可用于治療； 對(duì)于腫瘤，最好選擇某些與該類腫瘤密切相關(guān)的癌基因或抑癌基因用于基因治療。

16、治療性基因的獲得有賴對(duì)疾病病因和病理機(jī)制的深入研究,基因治療的基本方法,基因載體的選擇 基因治療關(guān)鍵步驟之一，是將治療基因高效轉(zhuǎn)移入患者體內(nèi)、并能調(diào)控其適度表達(dá)。 常用的載體有兩類：病毒載體和非病毒載體。 病毒載體：逆轉(zhuǎn)錄病毒載體， 腺病毒載體， 腺相關(guān)病毒載體等； 非病毒載體：脂質(zhì)體，受體介導(dǎo)等采用理化方法將治療基因轉(zhuǎn)移入患者體內(nèi),基因治療的基本方法,基因載體的選擇 容易生產(chǎn) 持續(xù)表達(dá) 弱免疫源 復(fù)制、分裂和整合能力 能感染分裂期細(xì)胞和未分裂期細(xì)胞,主要病毒載體的特點(diǎn)比較,基因治療的基本方法,靶細(xì)胞的選擇,體細(xì)胞,生殖細(xì)胞,只限于某一體細(xì)胞的基因的改變 限于個(gè)體當(dāng)代,對(duì)缺陷的生殖細(xì)胞進(jìn)行矯正

17、 當(dāng)代及子代,對(duì)生殖細(xì)胞進(jìn)行基因治療，可使該生殖細(xì)胞分化發(fā)育成長(zhǎng)的個(gè)體及其后代均具有正?；?，理論上講是根治遺傳病的理想方法。 但由于涉及安全性和倫理學(xué)問題，目前基因治療中禁止使用生殖細(xì)胞作為靶細(xì)胞,基因治療的基本方法,靶細(xì)胞的選擇 較堅(jiān)固，耐受處理，易于由人體分離，便于輸 回體內(nèi) 具有增殖優(yōu)勢(shì)，生命周期長(zhǎng)，能存活幾個(gè)月或幾年，至病人的整個(gè)生命 易于受外源遺傳物質(zhì)的轉(zhuǎn)化。 在選用病毒載體時(shí)，目的基因具表達(dá)最好具有組織特異 性的細(xì)胞 成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞、造血細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌細(xì)胞,基因治療的基本方法,基因轉(zhuǎn)移方法 導(dǎo)入方法：直接體內(nèi)療法 間接體內(nèi)療法,化學(xué)方法 物理方法 膜融合法 載體

18、法 直接注射,磷酸鈣法 DEAE葡聚糖法,電穿孔法 粒子轟擊法（基因槍法,間接體內(nèi),直接體內(nèi),基因治療的基本方法,基因治療的基本方法,治療基因的受控表達(dá) 時(shí)間：在患者需要實(shí)施治療時(shí)才表達(dá)，而平時(shí)不需要進(jìn)行治療時(shí)則處于關(guān)閉狀態(tài) 空間：限制治療基因只在靶細(xì)胞中表達(dá)，避免治療基因指導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)干擾非靶細(xì)胞的正常生活，產(chǎn)生毒副作用 表達(dá)水平：既要考慮治療效果，又要避免副作用 基因內(nèi)部調(diào)節(jié)機(jī)制、基因外部調(diào)節(jié)機(jī)制、利用病灶微環(huán)境,基因治療的基本方法,治療基因的受控表達(dá) 基因內(nèi)部調(diào)節(jié)機(jī)制 使用正常細(xì)胞或病變細(xì)胞的組織特異性啟動(dòng)子、增強(qiáng)子元件,酪氨酸酶是皮膚細(xì)胞產(chǎn)生色素途徑中的一種酶，可利用其啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)治療

19、基因只在皮膚細(xì)胞中表達(dá)，治療某些皮膚病。 甲胎蛋白(AFP)基因在成年肝臟細(xì)胞中表達(dá)，可利用該基因啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)治療基因(如自殺基因)在癌細(xì)胞中表達(dá)，殺死癌細(xì)胞,基因治療的基本方法,治療基因的受控表達(dá) 基因外部的調(diào)節(jié)機(jī)制 基因攜帶調(diào)控序列，通過施加外部刺激，促進(jìn)治療基因在特定細(xì)胞或組織中表達(dá),熱休克蛋白基因的表達(dá)調(diào)控元件來啟動(dòng)治療基因，可以通過對(duì)病灶局部進(jìn)行熱處理，達(dá)到使治療基因特異性表達(dá)的目的。 電離輻射可以誘導(dǎo)Egr-1基因表達(dá)，將其調(diào)控序列啟動(dòng)的治療基因(如腫瘤壞死因子基因)導(dǎo)入腫瘤組織，可在電離輻射作用下，使治療基因獲得暫時(shí)性的局部表達(dá)，殺死腫瘤細(xì)胞。 四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá),基因治療的基本方法,

20、治療基因的受控表達(dá) 利用病灶微環(huán)境使治療基因特異性表達(dá) 病灶微環(huán)境與正常時(shí)往往不同，因此可利用這些變化控制治療基因的表達(dá),機(jī)體發(fā)炎可產(chǎn)生許多急性期蛋白，其基因的啟動(dòng)子可以控制發(fā)炎條件下治療基因的表達(dá)，炎癥消失治療基因的表達(dá)也終止。 腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)速度快于形成血管的內(nèi)皮細(xì)胞，造成腫瘤內(nèi)部缺氧，缺氧條件可以通過缺氧誘導(dǎo)因子和缺氧響應(yīng)元件(HRE)相互作用，調(diào)節(jié)治療基因的表達(dá)，而在正常組織中不表達(dá),基因治療的基本方法,體外細(xì)胞回輸體內(nèi) 基因修飾的淋巴細(xì)胞以靜脈注射的方式回輸?shù)窖褐校?將皮膚成纖維細(xì)胞以細(xì)胞膠原懸液注射至患者皮下組織； 采用自體骨髓移植的方法輸入造血細(xì)胞； 或以導(dǎo)管技術(shù)將血管內(nèi)皮細(xì)胞定

21、位輸入血管等,基因治療的應(yīng)用,遺傳病的基因治療 腫瘤的基因治療 病毒性疾病的基因治療,基因治療的應(yīng)用,遺傳病的基因治療 單基因缺陷疾病 僅限體細(xì)胞的基因治療 靶細(xì)胞易獲取、培養(yǎng)、及回輸體內(nèi) 治療效果應(yīng)勝過對(duì)病人的危害 表達(dá)水平無需調(diào)控且無副作用 需經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證安全可行 可供選擇并符合上述4條以上要求的不過只有30余種遺傳病,基因治療的應(yīng)用,遺傳病的基因治療 腺苷脫氨酶(ADA)和嘌呤核苷磷酸化酶 (PNP)缺乏癥 珠蛋白生成障礙性貧血和血紅蛋白病 血友病和其他血漿蛋白缺乏癥 苯丙酮酸尿癥和其他先天性代謝缺陷病 萊-納(Lesch-Nyhan)綜合征 家族性高膽固醇血癥 囊性纖維化病,基因治療

22、的應(yīng)用,腫瘤的基因治療 通過基因置換和基因補(bǔ)充，導(dǎo)入多種抑癌基因以抑制癌癥的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移 抑制癌基因的活性，通過干擾癌基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，發(fā)揮抑癌作用 增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的免疫原性，通過對(duì)腫瘤組織進(jìn)行細(xì)胞因子修飾，刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生對(duì)腫瘤細(xì)胞的溶解和排斥反應(yīng) 通過導(dǎo)入“自殺基因”殺傷癌細(xì)胞 提高化療效果的輔助基因治療,基因治療的應(yīng)用,腫瘤的基因治療 臨床研究最多 市場(chǎng)前景最大 手段最多,基因治療的應(yīng)用,病毒性疾病的基因治療 通過導(dǎo)入免疫活化因子基因或者抗原基因調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答，增強(qiáng)免疫反應(yīng)的活性和能力 乙肝 通過導(dǎo)入抑制病毒生長(zhǎng)繁殖的基因，抑制病毒增殖 艾滋病 75%的人類傳染病是由病毒引起的,基因

23、治療的問題及前景,難以獲得真正有治療作用的基因 外源基因的表達(dá)難以在體內(nèi)精確調(diào)控 體細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)后，其生物學(xué)特性會(huì)有改變 過多的外源蛋白對(duì)機(jī)體帶來可能的影響 隨機(jī)整合潛在的威脅,36歲的喬妮莫爾患有風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，2007年2月26日第一次接受基因治療，7月2日，接受了第二次基因治療，第二天喬妮感覺周身不適，體溫上升到38.50，后上升到400，7月24日，喬妮因全身廣泛性出血和肝衰竭而死亡,進(jìn)行基因治療使用的是西雅圖的目標(biāo)遺傳公司研發(fā)的一種制劑，稱為tgAAC94,載體為腺相關(guān)病毒，攜帶一種編碼TNF抑制蛋白的基因。迄今尚未確定導(dǎo)致死亡的原因,最后安全原則：基因療法現(xiàn)在還不成熟，因此不是無法治療的疾病不宜用基因療法來試驗(yàn)的 知情同意：知情同意書需要病人帶回家中閱讀并病人仔細(xì)考慮，而不能在第一次看完協(xié)議就簽字 利益回避：二是當(dāng)病人的大夫是一項(xiàng)研究的主要研究者時(shí)，應(yīng)當(dāng)由他人提出建議，即應(yīng)該遵守回避原則 喬妮的死亡背后還有不可低估的商業(yè)因素。風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是僅在美國(guó)每年就有30億美元用于該病的治療。 2000年，N