實(shí)驗(yàn)室色譜柱管理規(guī)程

1、xxxx生物醫(yī)藥有限公司實(shí)驗(yàn)室色譜柱管理規(guī)程起草人年 月 日審核人年 月 日批準(zhǔn)人年 月 日共 頁(yè)生效日期年 月 日1 目的 為了規(guī)范實(shí)驗(yàn)室內(nèi)色譜柱的使用。確保操作人員能正確規(guī)范地使用色譜柱，以保證色譜柱的使用壽命，制定本規(guī)程。2 范圍 本規(guī)程適用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有分析用色譜柱的管理。3 職責(zé) QC人員對(duì)本規(guī)程的實(shí)施負(fù)責(zé)。4 程序4.1 色譜柱的采購(gòu)4.1.1 分析人員視實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的欲檢驗(yàn)樣品情況及現(xiàn)有的色譜柱使用情況，提出色譜柱的采購(gòu)申請(qǐng)，報(bào)相關(guān)負(fù)責(zé)人審核后交采購(gòu)人員采購(gòu)。4.1.2 分析人員提交申請(qǐng)時(shí)應(yīng)仔細(xì)說(shuō)明欲采購(gòu)色譜柱的型號(hào)、規(guī)格和數(shù)量及購(gòu)買期限。4.2 色譜柱的使用4.2.1 對(duì)新購(gòu)進(jìn)的色

2、譜柱，應(yīng)檢查色譜柱的外表面、封口情況，隨柱色譜圖、柱效、分離度、拖尾因子測(cè)定，說(shuō)明書等，不符合要求的應(yīng)退貨，符合要求的應(yīng)在SOP-QC020-01-R1“色譜柱登記表”上進(jìn)行登記，注明領(lǐng)用日期和開始使用日期，并且進(jìn)行統(tǒng)一的編號(hào)。4.2.2 色譜柱編號(hào)規(guī)則 QC- L 12- XX XX 表示色譜柱的流水號(hào) 表示購(gòu)入的月份 表示購(gòu)入的年份 表示液相色譜柱 表示分析部門4.2.3 液相色譜柱4.2.3.1 液相色譜柱的使用前注意事項(xiàng)色譜柱的儲(chǔ)存液若無(wú)特殊說(shuō)明，均為有機(jī)溶劑，反相柱常用甲醇、乙腈或者高比例的甲醇/乙腈-水溶液，正相柱常用脫水處理后的純正己烷。使用前，一定要注意色譜柱的儲(chǔ)存液與待分析樣

3、品的流動(dòng)相之間是否互溶。在反相色譜中，如果流動(dòng)相中緩沖鹽的濃度較高（0.1mmol/L），必須先用低濃度的甲醇/乙腈-水溶液（1020%）沖洗1020min，否則緩沖鹽在高濃度的有機(jī)相中很容易析出，從而使色譜柱堵塞，無(wú)法恢復(fù)。4.2.3.2 液相色譜柱使用方向 裝色譜柱時(shí)應(yīng)使流動(dòng)相流路的方向與色譜柱標(biāo)簽上箭頭所示方向一致。除另有規(guī)定外，不宜反向使用，否則會(huì)導(dǎo)致色譜柱柱效明顯降低，無(wú)法恢復(fù)。4.2.3.3 液相色譜柱的評(píng)價(jià)(必要時(shí)自己做，沒其它要求時(shí)以出廠報(bào)告為準(zhǔn))流動(dòng)相：反相柱（C18）一般用甲醇：水=85：15（V/V）或乙腈：水=60：40（V/V）.樣品物質(zhì)：可用預(yù)訂用途的供試品代替。除

4、另有規(guī)定外，色譜柱的理論板數(shù)應(yīng)不小于1500、分離度應(yīng)不小于1.5、重復(fù)進(jìn)樣間的RSD不超過(guò)2.0%。4.2.3.4 流動(dòng)相流動(dòng)相中所使用的各種有機(jī)溶劑應(yīng)盡可能使用色譜純，水應(yīng)為純化水或注射用水,如果流動(dòng)相含鹽，還應(yīng)將配制好的流動(dòng)相經(jīng)0.45m或0.22m 的濾膜過(guò)濾。另外，裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)的在線過(guò)濾器等裝置應(yīng)清潔，否則將影響色譜柱壽命。以硅膠為基質(zhì)的各種鍵合相對(duì)酸和堿都很敏感，一般pH使用范圍為2.08.0，應(yīng)參閱色譜柱使用說(shuō)明書使用。4.2.4 色譜柱使用后，應(yīng)填寫SOP_QC020-01-R2“色譜柱的使用日志”。使用日志的內(nèi)容應(yīng)包括以下方面的內(nèi)容：4.2.4.1 色譜柱的名稱、

5、型號(hào)、規(guī)格、編號(hào)4.2.4.2 色譜柱的使用日期、用途4.2.4.3 色譜柱的清潔/老化過(guò)程、系統(tǒng)適用性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)4.2.4.4 封柱的溶液等4.2.5 色譜柱使用時(shí)，必須對(duì)分析樣品進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。原則上一個(gè)品種專用一支色譜柱。且必須在色譜柱上標(biāo)注專用于哪個(gè)產(chǎn)品的標(biāo)識(shí)。4.3 色譜柱的維護(hù)和保養(yǎng)4.3.1 液相反相色譜柱用后長(zhǎng)時(shí)間不使用時(shí)的保存 如使用緩沖液或含鹽溶液作為流動(dòng)相，每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)用低濃度的甲醇/乙腈-水溶液（1020%）沖洗30分鐘，使色譜柱內(nèi)的鹽完全溶解洗脫出，再用較高濃度的甲醇/乙腈-水溶液（50%）沖洗10分鐘，最后用高濃度的甲醇/乙腈-水溶液（8090%）沖洗30分

6、鐘，使色譜柱中的強(qiáng)吸附物質(zhì)沖洗出來(lái)。注：常用內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱的柱內(nèi)死體積為1.8mL(150mm長(zhǎng))和2.2mL(250mm長(zhǎng))4.3.2 色譜柱的長(zhǎng)期保存反相柱，可以儲(chǔ)存于甲醇或乙腈中，并將色譜柱兩端的堵頭堵上，以免干枯，室溫保存。4.3.3 液相色譜柱的維修色譜柱使用一段時(shí)間后，會(huì)發(fā)生柱壓上升、柱效降低的現(xiàn)象。這主要是柱床上端或過(guò)濾片處積累了污染物，可通過(guò)再生予以消除。如果色譜柱性能突然變壞，可采取以下方法處理：（1）如果柱壓突然增大，可將色譜柱出、入口端顛倒過(guò)來(lái)，用1020倍柱體積的流動(dòng)相低速?zèng)_洗。如果柱壓仍然很高，可能是柱入口處的過(guò)濾片堵塞，需要更換新濾片；（2）如果峰形變壞（

7、如出現(xiàn)肩峰或雙峰），表明柱入口柱床可能有塌陷，可用同型號(hào)填料和流動(dòng)相配成勻漿，將塌陷處填平。注：經(jīng)維修后的色譜柱使用之前，必須做系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，符合規(guī)定后方能繼續(xù)使用。4.4 色譜柱的再生4.4.1 液相色譜柱的再生反相柱首先用蒸餾水沖洗，再分別用2030倍柱體積的甲醇：水=10：90（V/V），乙腈，異丙醇作為流動(dòng)相沖洗色譜柱，完成后再以相反順序沖洗，最后用流動(dòng)相平衡。4.4.2 液相色譜柱在使用過(guò)程中易出現(xiàn)的問(wèn)題和解決方法4.4.2.1 液相色譜柱頭的過(guò)濾篩板堵塞或污染；將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力，或者卸下色譜柱頭，將其放在10的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘，后再用純水超聲10分鐘，重

8、新裝入色譜柱。4.4.2.2 液相色譜柱頭的填料被樣品污染；解決方法：如確定色譜柱頭的填料被污染，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內(nèi)前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔細(xì)修復(fù)后，重新安裝上柱頭螺絲。4.4.2.3 色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機(jī)溶劑，形成結(jié)晶析出； 解決方法：如確定是鹽結(jié)晶，用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解.4.4.2.4 流動(dòng)相pH值過(guò)大或過(guò)小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解。解決方法：如果因pH值使用不當(dāng)，很難恢復(fù) 。4.5 色譜柱的報(bào)廢4.5.1 已判定為報(bào)廢的色譜柱，應(yīng)在色譜柱上貼上報(bào)廢的標(biāo)簽，并在“色譜柱登記表”上注明報(bào)廢原因及報(bào)廢時(shí)間。4.5.2 已報(bào)廢的色譜柱應(yīng)與正常使用的色譜柱分開存放，以防色譜柱的非預(yù)期使用。4.6 任何色譜柱的老化、清潔、維修、再生以及報(bào)廢的操作，都應(yīng)在使用日志上予以記錄。5 記錄記錄一 色譜柱登記表 SOP-QC020-01-R1記錄二 色譜柱使用日志 SOP-QC020-01-R26 歷史版本號(hào)01，修訂日期2014年10月15