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文檔簡介
檢驗科標本采集指南第一章前言1、實踐證明,為保證臨床檢驗質(zhì)量,必須做到全過程質(zhì)量控制,即對實驗室檢查的全過程進行全面的質(zhì)量控制和質(zhì)量管理。這里包括實驗前分析前、實驗中分析中和實驗后分析后三個階段的質(zhì)量控制,其中實驗前質(zhì)量控制是全面質(zhì)量控制的前提。國內(nèi)外均有報道,檢驗結(jié)果誤差中70左右來自實驗前分析前,而且實驗前分析前誤差是儀器、試劑、質(zhì)控品和標準品等再好也無法解決的。因此,必須注意做好實驗前質(zhì)量管理。2、分析前程序ISO/IEC15189文件定義為按照時間順序,從臨床醫(yī)生開出醫(yī)囑開始,到分析檢驗程序。包括檢驗申請、患者準備、原始樣品采集、運送到實驗室。完成分析前程序的主體大部分工作都是醫(yī)生、護士、運輸人員、檢驗人員共同協(xié)調(diào),在實驗室檢測以外的空間完成的。3、分析前質(zhì)量管理最易出現(xiàn)問題31、臨床反饋不滿意的檢驗結(jié)果,70報告最終可溯源到標本質(zhì)量不合要求。32、可靠的檢驗結(jié)果,第一個環(huán)節(jié)必須依賴于標本的高質(zhì)量。33、要獲得高質(zhì)量的標本臨床醫(yī)生應主動明確地告之患者如何配合好,護理人員和檢驗人員采集好、檢測好標本,運輸人員及時快速規(guī)范轉(zhuǎn)運好標本4、檢驗科拒收標本標準1、患者信息不全(無姓名、科別、住院號等)及無我院授權的醫(yī)師簽字。2、標簽不清或無標識,不具備識別系統(tǒng)的唯一性3、抗凝不當,標本凝固4、時間延誤5、溶血標本6、采自輸液管7、樣本外漏,容器破損8、明顯受污染的樣本9、標本量不符合檢測要求10、標本項目與申請項目不符11、標本容器使用錯誤12、申請單書寫過于潦草,不能辨認。第二章、臨床血液標本采集指南一、檢驗申請申請單填寫要點每個檢驗項目或組合檢驗項目送一份標本,每一份標本附一張申請單。按照檢驗項目申請單的要求,采集特定的標本,并將標本送到指定的實驗室。因此,檢驗申請單是實驗檢查的第一步。()病人身份識別信息申請者必需清楚填寫病人的姓名、性別、年齡、或其它有效識別身份的編號;()病人的病歷信息申請者必需清楚填寫病人所在臨床科室名稱、病歷號、床號、臨床診斷、臨床樣本、樣本的采集日期和時間年、月、日、時、分、申請者姓名、申請檢驗日期;()申請的檢驗項目申請者必需清楚填寫檢驗項目名稱,項目名稱應規(guī)范、準確,特別是申請組套項目時,一定要與本中心檢驗目錄的組套內(nèi)容一致,否則需填寫具體單項;二、病人準備醫(yī)護、檢驗人員指導病人做好準備??紤]飲食、運動、生理周期、疾病及藥物等對檢驗結(jié)果可能產(chǎn)生的影響,指導病人正確采集標本。(一)控制飲食1大多數(shù)檢驗項目都要求在早晨空腹采血。2肝功、血脂等項目要求禁食1216小時,且提前一天的晚餐應當避免飲酒、禁食高脂肪、高蛋白飲食。3飲食對血脂檢驗影響重大,至少應當在抽血前的3天以內(nèi)注意保持正常飲食。(二)避免藥物影響許多藥物(如VITC、雌激素、降血脂藥等)對檢驗結(jié)果尤其是血、尿、便的生化檢驗結(jié)果產(chǎn)生影響,抗生素應用將對微生物培養(yǎng)檢驗結(jié)果產(chǎn)生直接的影響。申請檢驗前醫(yī)生應該了解待檢者近期及當前相關藥物使用情況并給予適當指導,在對檢驗結(jié)果可能產(chǎn)生明顯的影響時,應當在檢驗申請單上注明。如不能停藥,應記錄用藥情況,恰當評估藥物對檢驗結(jié)果的影響。(三)避免運動影響1劇烈運動可以使許多血液成份發(fā)生改變,甚至持續(xù)24小時以上,因此劇烈運動之后不應立即抽血;快步行走之后,至少應休息1015分鐘然后再抽血。2應在平靜狀態(tài)抽血,避免情緒激動。(四)注意生理差異(五)注意體位要求1許多血漿生化成份在站、坐、臥三種不同體位時有明顯的濃度差異。2靜坐510分鐘后以坐位(從肘靜脈)采血為最佳。3臥床患者可臥位采血。三、器材選擇采集抗凝血液標本時,血標本管采用的抗凝劑的種類及濃度、體積必須正確無誤。四、采血操作一)正確選擇血標本種類1大多數(shù)檢驗項目(生化、免疫、凝血、血培養(yǎng)、交叉配血等)采用靜脈血標本。2血氣分析最好采用動脈血標本,也可從動脈化毛細血管采血(如新生兒)。3血常規(guī)檢驗(血細胞分析)可以采用靜脈血或手指末梢血,但除非靜脈抽血確實存在困難者(如新生兒、幼兒、老人、肥胖者、嚴重燒傷患者、出血傾向嚴重的患者、病?;颊撸蛘弑仨殲橹委煴A綮o脈者(如腫瘤化療患者)可考慮采用手指末梢血外,其他人應采用靜脈血。(二)正確選擇采血部位1末梢血標本可從手指采集,采用耳垂末梢血作為血常規(guī)檢驗標本的做法已經(jīng)廢止。新生兒可以從足跟、大趾采集。2動脈血標本常從股動脈、肱動脈、橈動脈采血,新生兒及嬰兒可從頭皮動脈或臍動脈采血。3靜脈血標本常從肘前靜脈、腕背靜脈采血,小兒和新生兒有時從頸靜脈和前囟靜脈采血。4禁止從輸液三通管采血(輸液成份回流、輸液管內(nèi)殘留輸液成份都將極大地影響檢驗結(jié)果)。(三)盡量避免輸液時采血1一般應在輸液結(jié)束30分鐘以后再采血。2搶救過程中必須一邊輸液一邊采血時,應避免從正在輸液的肢體上采血,應避免輸液成份混入血液標本。3輸液時采血應當遵從“遠端原則”A選擇在輸液的對側(cè)肢體或無輸液的其他肢體(如足部)靜脈采血。B在四肢靜脈都輸液時,可以選擇在輸液靜脈的遠心端(靜脈血流的上游)采血。4急診、搶救過程中在輸液的同時采血,應在檢驗申請單上注明。(四)避免消毒酒精引起溶血靜脈穿刺處消毒酒精未干就采血,容易引起標本溶血。(五)合理使用止血帶1止血帶不應扎得太緊,使用時間應盡量縮短。2血脂項目、出凝血項目、血常規(guī)項目抽血時止血帶使用應限定在1分鐘以內(nèi)。3止血帶束縛太緊、時間過長(如超過3分鐘),會造成血行阻滯時間過長,因溶血、血小板激活、纖溶系統(tǒng)激活等原因?qū)⑹挂陨蠙z驗項目的結(jié)果產(chǎn)生偏差,甚至誘導錯誤診治。4需要重新采血時,在止血帶束縛時間太長的情況下,應當在對側(cè)手臂重新采血。(六)“一針見血”、抽血順暢1許多檢驗項目,尤其是涉及出凝血機能的項目(如血小板計數(shù)、出凝血項目等)均要求做到“一針見血”、抽血順暢。2“一針見血”、采血順暢,可以有效防止溶血、減少血管及組織細胞損傷導致血液成份改變對檢驗結(jié)果的影響。溶血造成紅細胞內(nèi)成份的釋放、血管損傷導致凝血機制的激活,對很多檢驗項目將產(chǎn)生明顯影響。(七)血液標本采集順序1注射器采血可以一次采集足量血液,然后立即依如下順序分裝各標本管血常規(guī)、出凝血、生化、免疫。2使用配套的真空采血管采血針時,第一管最好不作為凝血檢驗標本(最大限度降低血管及組織細胞損傷造成血液成份改變對檢驗結(jié)果的影響,臨床醫(yī)生申請凝血檢驗項目時最好考慮與血常規(guī)或其他生化項目一起采血)。3使用配套的真空采血管采血針時,采血順序應當是血常規(guī)、不含添加劑的采血管(血清標本管,紅色、桔紅色或黃色)、凝血標本管(淺藍色)、其他標本管。(九)準確控制標本量1抗凝血液標本的體積必須準確真空采血管的標簽紙上都有體積標志;抗凝血液標本的體積誤差應控制在5以內(nèi)(如2ML凝血標本管的血液體積誤差應不大于01ML)。2抗凝血液標本的體積不合要求可能產(chǎn)生的主要影響血液體積太多一抗凝劑比例太少,易產(chǎn)生血凝塊;血液體積太少抗凝劑體積相對剩余,血液成分過度稀釋,且易使血細胞因滲透壓降低而產(chǎn)生變形或溶血,PT和APTT時間將假性延長。(十)盡快與抗凝劑徹底混合1需要抗凝的血液標本,抽血后應立即將血液注入含抗凝劑的標本管,并使血液與抗凝劑徹底混合,避免血液凝固。2真空采血管以顛倒58次為標準操作,動作應迅速而輕柔。用力振蕩、產(chǎn)生氣泡都不可避免產(chǎn)生溶血。3如果管中抗凝劑為液體,應當使粘附在管壁、管蓋上的抗凝劑能夠全部與血液混合。4對于出凝血項目、血常規(guī)等項目,血液標本出現(xiàn)凝固(即使少量細胞凝集)均為不合格。五、血液標本保存(一)血液標本的保存要求1采血后應將標本管直立、靜置,避免振蕩、摔落。2所有標本最好都采用有蓋容器盛放,防止灰塵、雜物混入,減少水分、氣體蒸發(fā),避免標本濺灑污染。3標本應保存于蔭涼處,避免陽光直射。某些檢驗項目要求避光保存血液標本。4標本一般應室溫保存,避免過高或過低溫度影響。(二)血液標本應立即送檢1血液標本不應在臨床科室保留,應盡可能立即送往檢驗科室。(三)血液標本的有效檢驗時限1血氣分析必須立即送檢,應當在30分鐘內(nèi)完成檢驗。2凝血項目、電解質(zhì)項目、肝功及多數(shù)血液酶類生化項目應盡快送檢,在4小時內(nèi)檢驗。3血常規(guī)項目應在4小時內(nèi)完成檢驗4血培養(yǎng)項目應在采血后盡快放入35培養(yǎng)箱中,超過2小時可能降低微生物培養(yǎng)的陽性率。5多數(shù)抗原抗體檢測項目全血室溫(4為佳)可保存24小時,或分離血清20保存。6在環(huán)境溫度超過30的條件下,所有標本都應盡快送往檢驗科室。7有些臨床科室早晨抽血時間太早,至送檢時標本已室溫放置超過2小時,標本因細胞代謝、溶血、蒸發(fā)等原因造成許多項目的結(jié)果偏差,如鉀、乳酸脫氫酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、血紅蛋白、酸性磷酸酶等升高,鈉、血糖等降低。檢驗科建議住院病房早晨抽血時間應控制在630以后,標本應在800左右送至檢驗科。(四)血培養(yǎng)標本的特殊要求1確保無菌采血,嚴防標本被污染。2血培養(yǎng)瓶接種的血液量一般為成人10ML,兒童4ML,幼兒12ML。接種的血液過多易引起假陽性。六、血液標本運送1標本應從采集地點直接送往檢驗科室,不應在其他地點放置。2以上血液采集、保存過程對標本質(zhì)量的要求應當?shù)玫綕M足。必須避免劇烈振蕩、血液濺灑、光線照射、異物混入等情況的發(fā)生。3交叉配血的受血者血液樣本,必須由臨床醫(yī)護人員或?qū)B氝\送人員直接送往檢驗科(血庫)。禁止其他人員(包括受血者家屬)執(zhí)行血樣運送任務。最好采集兩管紅管和紫管。七、其他(一)正確處理不合格標本臨床科室在證實標本不合格之后應當重新采集標本送檢。嚴禁諸如“將因出現(xiàn)凝集而被拒收的血常規(guī)標本在挑出血凝塊之后重新送檢”之類的嚴重錯誤發(fā)生。(二)標本濺灑事故的處理1從標本管濺灑出來的血液標本不能再放回標本管作為標本送檢。2嚴禁將同一個待檢者含不同抗凝劑的血液標本進行混合,嚴禁將不同待檢者的血液標本進行混合。3如果發(fā)生標本濺灑事故,應當立即對被污染物(體表、衣物、臺面、地面等)進行有效的消毒處理。第三章尿液標本采集指南一、標本采集一般要求1患者告知尿液標本采集,首先應告知患者關于尿液標本采集的目的,尿液標本采集的一般要求見表1一般要求患者應處于安靜狀態(tài),按平常生活飲食用于細菌培養(yǎng)的尿標本須在使用抗生素治療前采集,以有利于細菌生長運動、性生活、月經(jīng)、過度空腹或飲食、飲酒、吸煙及姿勢和體位等可影響某些檢查的結(jié)果清潔外生殖器、尿道口及周圍皮膚,女性患者應特別避免陰道分泌物或經(jīng)血污染尿液如采用導尿標本或恥骨上穿刺尿標本,一般應由醫(yī)護人員先告知患者及家屬有關注意事項,然后由醫(yī)護人員進行采集。采集嬰幼兒尿,應由兒科醫(yī)護人員指導,用小兒專用尿袋收集。2明確標記在尿液采集容器和檢驗申請單上,應準確標記患者姓名、標本種類等信息,二、標本種類及采集方法尿液標本類型的選擇和收集方式取決于尿液檢查目的(通常主要包括化學檢查、尿有形成分顯微鏡檢查和細菌學檢查等,見表2)、患者狀況和檢驗要求。臨床常用的尿液標本,依據(jù)時間或檢測項目的分類如下(一)晨尿指清晨起床、未進早餐和做運動之前排出的尿液。通常晨尿在膀胱中的存留時間達68H,各種成分較濃縮,已達檢測或培養(yǎng)所需濃度??捎糜谀I濃縮功能的評價、絨毛膜促性腺激素測定以及血細胞、上皮細胞、管型及細胞病理學等有形成分分析。住院患者最適宜收集晨尿標本,然而在標本采集前1D,應提供患者尿采集容器和書面采集說明,如外陰、生殖器清潔方法、留中段清潔尿的注意事項等。晨尿采集后在2H內(nèi)送檢,否則應采取適當防腐措施。(二)隨機尿指患者無需任何準備、不受時間限制、隨時排出的尿液標本。如患者攝入大量液體或劇烈運動后可影響尿液成分,因而隨機尿不能準確反映患者狀況。隨機尿標本新鮮、易得,最適合于門診、急診患者的尿液篩檢試驗。(三)計時尿1、指采集規(guī)定時段內(nèi)的尿液標本,如收集治療后、進餐后、白天或臥床休息后24H內(nèi)的全部尿液。準確的計時和規(guī)范的操作(包括防腐方法、食物或藥物禁忌等)是確保計時尿檢驗結(jié)果可靠的重要前提。計時尿常用于物質(zhì)的定量測定、肌酐清除率試驗和細胞學研究。2、24H尿要規(guī)范采集此類尿標本最為困難,最常見的問題是未能采集到全部24H內(nèi)的尿量。因此,要求患者密切配合。(1)收集方法必須明確告知患者尿標本采集具體步驟容器容量最好大于4L,清潔,無化學污染,方法在開始標本采集的當天(如早晨8點),患者排尿并棄去尿液,從此時間開始計時并留取尿液,將24H的尿液全部收集于尿容器內(nèi)。在結(jié)束留取尿液標本的次日(如早晨8點),患者排尿且留尿于同一容器內(nèi)。測定尿量準確測量并記錄總量?;靹驑吮救磕蛞罕仨毘浞只靹颍購闹腥〕鲞m量(一般約40ML)用于檢驗,余尿則棄去。避免污染兒童24H尿標本采集過程中,應特別注意避免糞便污染。(2)主要用途24H尿主要用于肌酐清除率試驗、兒茶酚胺、17羥皮質(zhì)類固醇(17羥)、17酮類固醇(17酮)、總蛋白質(zhì)(TOTALPROTEIN,TP)、尿糖、電解質(zhì)等化學物質(zhì)定量或結(jié)核桿菌檢查等。3、尿三杯試驗患者一次連續(xù)排尿,分別留取前段、中段、末段的尿液,分裝于3個尿杯中。此試驗多用于泌尿系統(tǒng)出血部位的定位和尿道炎診斷等。4、尿紅細胞形態(tài)檢查患者清潔外陰,保持正常飲食習慣,不要飲大量水,清晨56時排去第1次尿,留取晨尿第2次的中段尿10ML送檢,主要用于泌尿系統(tǒng)出血部位的判斷。5、中段尿留尿前先清洗外陰,女性應清洗尿道旁的陰道口,男性應清洗龜頭;但不可用抗生素和肥皂等清洗尿道口,以免影響細菌生存力。在排尿過程中,棄去前、后時段排出的尿液,以無菌容器收集中間時段的尿液,主要可避免生殖道和尿道遠端細菌的污染。中段尿一般用于細菌培養(yǎng)6、導管尿、恥骨上穿刺尿主要用于尿潴留或排尿困難時的尿液標本采集(2歲以下小兒慎用),但要征得患者或家屬同意。以無菌術采集尿液標本。三、標本保存和處理尿標本應在采集后2H內(nèi)分析完畢,對不能及時檢驗的尿標本,必須進行適當處理或以適當?shù)姆绞奖4妫山档鸵驑吮舅蜋z延時引起的尿液理化性狀改變。四、標本運送與接收(一)應盡量減少運送環(huán)節(jié)和縮短儲存時間,標本傳送應做到專人、專業(yè)且有制度約束,才能避免標本傳送過程中因客觀、主觀因素造成檢測結(jié)果的不準確。運送過程中同時要注意生物安全,防止標本漏出或側(cè)翻,污染環(huán)境、器材和衣物。(二)實驗室拒收尿液標本的標準1實驗申請單化驗報告單填寫的內(nèi)容必須與尿液標本容器標簽填寫內(nèi)容完全一致,否則拒收。2尿液常規(guī)檢查的標本必須在留取標本后2小時之內(nèi)送到,否則拒收。3申請24小時尿液定量檢查的標本必須是24小時全部尿液的混合液,并準確記錄尿量,否則拒收。4常規(guī)尿液檢查的標本最少量為10ML;其它尿液檢查的標本應5ML,否則拒收。5送檢的申請單和容器應清潔衛(wèi)生,不能濺有標本,否則拒收。第四章糞便標本采集指南一、檢查主要目的1了解消化道有無炎癥、出血、寄生蟲感染、惡性腫瘤等情況;2根據(jù)糞便的性狀、組成、間接地判斷胃腸、胰腺、肝膽系統(tǒng)的功能狀況;3了解腸道正常菌群分布是否合理,檢查糞便中有無致病菌以協(xié)助診斷腸道傳染病。二、標本采集要求1、容器收集和運送糞便標本的容器應潔凈、無吸水、防漏滲,一次性使用;做細菌培養(yǎng)的容器應用無菌有蓋的專用容器。2標本收集常規(guī)檢查標本應取新鮮標本,選取異常成分的糞便,如含有粘液、膿、血等病變成分的標本。外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞便多處取材,取35G糞便送檢。灌腸或服油類瀉劑的糞便常因過稀且混有油滴等,而不適于做檢查標本。不能采集便盆或坐廁的糞便送檢標本。糞便標本應避免混有尿液、消毒劑及污水等雜物,以免破壞有形成分,使病原蟲死亡和污染腐生性原蟲。寄生蟲檢查標本檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體從膿血和稀軟部分取材,立即送檢;轉(zhuǎn)送及檢查時均需保溫,以免滋養(yǎng)體因失去活動力而難以檢出。無糞便排出而又必須檢查時,可經(jīng)直腸指診或腸拭子取標本。糞便培養(yǎng)標本,用消毒棉簽采取糞便的異常部分于無菌杯,也可用腸拭子蘸等滲鹽水,由肛門插入直腸45CM處,輕輕轉(zhuǎn)動,取出糞便少許,放入無菌培養(yǎng)試管中,蓋好送驗。用腸拭子直接采取標本進行培養(yǎng),可提高陽性率。三、標本運送與接收1按上述要求留取的標本及時送檢。2標本的接收標準與拒收檢驗申請單應清楚填寫下列內(nèi)容患者姓名性別年齡科別床號住院號標本類型臨床診斷檢查項目采集標本日期和時間,否則拒收。標本容器及標識是否符合要求,標記內(nèi)容與醫(yī)生所填寫申請單的內(nèi)容是否完全一致,否則拒收。第五章其它體液標本采集指南一、液、漿膜腔液、關節(jié)液、前列腺、胃液、痰液、陰道分泌物均由臨床醫(yī)師采樣,檢驗科提供專用的各種試管或容器,及時送檢。二、標本留取注意事項1前列腺由臨床醫(yī)師進行,標本少時1滴,多時可達1ML左右置潔凈載物玻片上,立即送檢以防干涸2漿膜腔液、關節(jié)液由臨床醫(yī)師進行穿刺必須注意無菌操作,勿使細菌污染穿刺部位及標本,為防止細胞變性,凝塊發(fā)生或細菌溶解,應及時送檢及檢驗如不能送檢,可加適量的枸櫞酸鈉抗凝劑,混勻后立即送檢如要觀察標本有無凝固現(xiàn)象,則不能加抗凝劑3腦脊液由醫(yī)師通過腰椎穿刺采集穿刺應順利,避免將血液混入標本,標本一般收集3管,每管2ML第1管做細菌培養(yǎng)第2管做化學或免疫檢查第3管做常規(guī)及細胞計數(shù),標本應及時送檢,及時檢驗久置可致細胞破壞,變性,自溶,糖分解及病原菌破壞或溶解等影響檢驗結(jié)果4痰液標本采集晨間第一口痰,多用于細胞學及微生物學檢查。采樣前應先反復漱口,經(jīng)深呼吸數(shù)次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培養(yǎng)取樣應在抗生素等藥物治療開始之前,如已用藥,則應選血液藥物濃度最低水平時采樣。5陰道分泌物由婦產(chǎn)科醫(yī)師采樣后即時送檢,否則影響滴蟲動力,易于漏檢。第六章微生物標本采集指南一、血液及骨髓的微生物檢驗血液、骨髓液的細菌培養(yǎng)標本采集【標本采集前的注意事項】應在抗生素應用前或停藥一周后采集標本,如不能停用抗生素,應于下次抗生素應用前采集?!緲吮舅蜋z指征】病人出現(xiàn)以下臨床表現(xiàn),或同時具備以下幾種臨床表現(xiàn)時應采集血培養(yǎng)。1發(fā)熱(38)或低溫(36)2寒戰(zhàn)3白細胞增多(10109/L,特別有“核左移”時)4粒細胞減少(成熟的多形核白細胞1109/L)5血小板減少6皮膚、粘膜出血7昏迷8多器官衰竭9血壓降低10呼吸加快幾種特殊情況1可疑新生兒敗血癥時,除發(fā)熱或低溫外,很少培養(yǎng)出細菌,應增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。2老年菌血癥病人可能不發(fā)熱或不低溫,如伴有身體不適、肌痛或中風,可能是感染性心內(nèi)膜炎,也應采取血培養(yǎng)。骨髓培養(yǎng)與血液培養(yǎng)的送檢指征是基本一致的,臨床常規(guī)血液感染有指征時以抽取血培養(yǎng)為主。但當骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者,抽取骨髓培養(yǎng)陽性率會遠高于血培養(yǎng)?!緲吮静杉娜萜鳌扛鞣N血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)瓶或手工血培養(yǎng)瓶?!緲吮镜牟杉椒ā糠乐蛊つw寄生菌或環(huán)境微生物引起的污染是血培養(yǎng)的關鍵問題,采血前嚴格執(zhí)行消毒程序是十分重要的。1皮膚消毒程序175酒精擦拭靜脈穿刺部位待30S以上。2碘伏棉簽消毒皮膚,作用60S,從穿刺點向外以152CM直徑畫圈進行消毒。375酒精脫碘。對碘過敏的病人只能用75酒精消毒,消毒60S,待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。2培養(yǎng)瓶消毒程序1用75酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。酒精作用60S。2在血液注入血培養(yǎng)瓶之前,用棉簽清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。3培養(yǎng)瓶接種程序抽取血液后,不要換針頭,直接注入血培養(yǎng)瓶中,輕輕顛倒混勻,以防血液凝固。如果同時作需氧和厭氧培養(yǎng),應先將標本接種到厭氧瓶中,然后再注入需氧瓶,嚴格防止將空氣注入?yún)捬跗恐??!緲吮静杉⒁馐马棥?血培養(yǎng)采集的時間和頻率1采血培養(yǎng)應盡量在抗菌藥物使用之前,在24H內(nèi)采集23份血培養(yǎng)(一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應視為單份血培養(yǎng)),每次2瓶。因為研究已證實,23份血培養(yǎng)足以檢測所有的菌血癥和真菌血癥。2入院前2周內(nèi)接受抗菌藥物治療的患者,連續(xù)3天,每天采集2份。3對間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱的患者,應在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前051H采集血液,或于寒戰(zhàn)或發(fā)熱后1H采集。因為發(fā)熱時血液中可能沒有細菌。4可疑為急性原發(fā)性菌血癥、真菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關節(jié)炎或肺炎的患者,應在不同部位采集23份血培養(yǎng)。5不明原因發(fā)熱,如隱性膿腫、傷寒熱和波浪熱,先采集23份血標本,2436H后估計體溫升高之前,再采集2份以上。6可疑為細菌性心內(nèi)膜炎,在12H內(nèi)多部位采集3份血標本,如果24H陰性,再采取3份以上的血標本。2采血量成人推薦每個血培養(yǎng)瓶應加的血量為10ML,血液和肉湯比為1510(體積體積)。兒童因很難獲得大量的血液,一般靜脈采血15ML用于血培養(yǎng)。血液量太多或太少都不利于細菌的檢出,血液的培養(yǎng)量每增加1ML,陽性率增加35。人體血液內(nèi)包含各種抑制細菌生長的因子或抗生素,注入血液太多可能會抑制細菌的生長。骨髓采血量一般為12ML?!緲吮镜谋4妗亢獦拥呐囵B(yǎng)瓶應立即送往實驗室;如不能及時送檢,應將其放在室溫,切忌冰箱存放。因為某些苛氧菌可在冰箱溫度中死亡,而使培養(yǎng)陽性率下降。在運往實驗室的途中如果天氣寒冷,應采取一定的保溫措施。二、痰標本的微生物檢驗痰液的細菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、真菌涂片、結(jié)核菌涂片。【標本采集前的注意事項】應在抗生素應用前或停藥一周后采集標本,如不能停用抗生素,應于下次抗生素應用前采集?!緲吮舅蜋z指征】1咳嗽、咳痰痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。2咯血肺結(jié)核病人常痰中帶血。3呼吸困難4發(fā)熱5胸痛當炎癥病變累及壁層胸膜時,會發(fā)生胸痛。肺部感染的患者有2550可能發(fā)生菌血癥,應同時作血培養(yǎng)?!緲吮静杉萜鳌恳淮涡詿o菌杯?!緲吮静杉椒ā?自然咳痰法咳痰前,先用清水或漱口液反復漱口(為減少口腔正常菌群污染標本),然后用力自氣管中咳出第一口痰于無菌容器內(nèi)。對于痰量少或無痰的患者可采用霧化吸入4510NACL水溶液,使痰液易于排出。對咳痰少的幼兒,可輕輕壓迫胸骨上部的氣管,使其咳嗽。2氣管鏡采集法用支氣管鏡在肺內(nèi)病灶附近用導管吸引或用支氣管刷直接取得標本。3氣管穿刺法主要用于厭氧菌培養(yǎng)4小兒取痰法用彎壓舌板向后壓舌,用棉拭子深入咽部,小兒受到刺激咳嗽時,可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上?!緲吮静杉⒁馐马棥?采集時間(1)以晨痰為好。多數(shù)病人清晨痰較多,易于采集。且清晨痰含有的病理成分較多。會增加培養(yǎng)的陽性率。(2)最好在應用抗菌藥物之前采集標本。2送檢采集后應立即送檢,以防止某些細菌在外環(huán)境中死亡。三、上呼吸道標本的微生物檢驗上呼吸道標本的細菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、真菌涂片、結(jié)核菌涂片?!緲吮静杉暗淖⒁馐马棥繎诳股貞们盎蛲K幰恢芎蟛杉瘶吮?,如不能停用抗生素,應于下次抗生素應用前采集?!緲吮舅蜋z指征】1病毒性普通感冒伴有明顯咽痛時,懷疑為咽部鏈球菌感染,應做細菌培養(yǎng)。2細菌性咽扁桃體炎明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱,體溫可達39以上。3上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管支氣管炎,需送相應部位分泌物或痰液進行細菌培養(yǎng)?!緲吮静杉萜鳌垦适米踊虮茄适米??!緲吮镜牟杉椒ā繃诨颊哂们逅磸褪冢蓹z查者將舌向外拉,使腭垂盡可能向外牽引,用無菌棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè),涂抹數(shù)次,拭子要避免接觸口腔和舌粘膜?!緲吮静杉⒁馐马棥?采集時間應于抗生素應用之前。時間上可無嚴格限制,但咽部是呼吸和食物的通路,也應晨起后采集為佳。2送檢應立即送檢。四、尿液標本的微生物檢驗液的細菌培養(yǎng),真菌培養(yǎng)、真菌涂片、結(jié)核菌涂片?!緲吮静杉暗淖⒁馐马棥繎诳股貞们盎蛲K幰恢芎蟛杉瘶吮?,如不能停用抗生素,應于下次抗生素應用前采集。【標本送檢指征】1有典型的尿路感染癥狀;2肉眼膿尿或血尿;3尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細胞和/或亞硝酸鹽陽性;4不明原因的發(fā)熱,無其他局部癥狀;5留置導尿管的病人出現(xiàn)發(fā)熱;6膀胱排空功能受損;7泌尿系統(tǒng)疾病手術前?!緲吮静杉萜鳌繜o菌試管或無菌尿液標本留取容器。【標本的采集方法】1清潔中段尿標本,囑咐患者睡前少飲水,清晨起床后用肥皂水清洗會陰部,仔細清洗,再用清水沖洗尿道口周圍,開始排尿,將前段尿排去,插入性接取中段尿約10ML于無菌容器中,立即送檢,于一小時內(nèi)接種。該方法簡單、易行,是最常用的尿培養(yǎng)標本收集方法,但很容易受到會陰部細菌污染,應由醫(yī)護人員采集或在醫(yī)護人員指導下由患者正確留取。2恥骨上膀胱穿刺使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮穿入膀胱吸取尿液,是評估膀胱內(nèi)細菌感染的“金標準”方法,但有一定的痛苦,病人難以接受。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標本困難的嬰兒尿標本的采集。3直接導尿按常規(guī)方法對會陰部進行清洗消毒后,用導尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱,獲取膀胱尿液??蓽p少尿液標本的污染,準確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道的細菌引入膀胱,導致繼發(fā)感染,一般不提倡使用。4留置導尿管收集尿液利用留置導尿管采集標本時,應先消毒導尿管外部,按無菌操作方法用注射器穿刺導尿管吸取尿液,操作時應防止混入消毒劑,不能從收集袋中采集尿液。長期留置導尿患者,應在更換新尿管時留取尿標本?!緲吮静杉⒁馐马棥恳话阌诔科鸬谝淮文蛞核蜋z。應選在抗菌藥物應用之前。五、便標本的微生物檢驗糞便標本的細菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、腸道菌群、真菌涂片、結(jié)核菌涂片?!緲吮静杉暗淖⒁馐马棥繎诳股貞们盎蛲K幰恢芎蟛杉瘶吮荆绮荒芡S每股?,應于下次抗生素應用前采集?!緲吮舅蜋z指征】1急性腹瀉大便次數(shù)明顯增多,腹痛,里急后重,往往伴有發(fā)熱,大便性狀為粘液便或膿血便。2慢性腹瀉大便次數(shù)多,多為稀便,伴有全身乏力等癥狀。3無痛性大量水樣便或米泔樣稀便。4先吐后瀉惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。有集體發(fā)病史,多為細菌性食物中毒所致。5抗生素治療后腹瀉常發(fā)生于長期抗生素治療后,糊狀便,排便次數(shù)增加。6高熱驚厥通常為中毒性痢疾,多見于嬰幼兒和小兒。【標本的采集容器】一次性無菌杯。【標本的采集方法】1自然排便采集法自然排便后,調(diào)取有膿血粘液部位的糞便23G,液狀糞便取絮狀物盛于無菌的容器內(nèi)或置于保存液或增菌液中送檢。2直腸拭子法如不易獲得糞便時或排便困難的患者及幼兒,可采用直腸拭子方法采集,取出后置于滅菌容器內(nèi)送檢?!緲吮静杉⒁馐马棥?采集時間應在急性期采樣,以提高檢出率,最好在用藥前。2送檢應立即送檢,六、化膿和創(chuàng)傷標本的微生物檢驗膿汁和創(chuàng)傷部位分泌物的細菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、一般細菌涂片、真菌涂片、結(jié)核菌涂片。【標本采集前的注意事項】應在抗生素應用前或停藥一周后采集標本,如不能停用抗生素,應于下次抗生素應用前采集?!緲吮舅蜋z指征】1局部癥狀紅、腫、熱、痛和功能障礙是化膿性感染的五個典型特征。2全身癥狀輕重不一。感染較重者常有發(fā)熱、頭痛、全身不適、乏力食欲減退等,一般均有白細胞計數(shù)增加和核左移。3疑為下列疾病時需送檢軟組織的急性化膿性炎癥如癤、癰、急性蜂窩織炎、丹毒等?;撔约膊∪缂诇涎?、化膿性關節(jié)炎、化膿性骨髓炎、氣性壞疽、細菌性結(jié)膜炎、鼻竇炎、化膿性扁桃體炎、急性化膿性中耳炎、急性化膿性乳突炎、急性乳房炎、急性膽囊炎、急性梗阻性化膿性膽管炎、心包炎、結(jié)核性腹膜炎。膿腫扁桃體膿腫、咽部膿腫、咽旁膿腫、腦膿腫、肺膿腫、肝膿腫、膿胸、腹腔膿腫、腎皮質(zhì)化膿性感染、腎周圍炎和腎周膿腫、直腸肛管周圍膿腫。創(chuàng)傷感染術后切口感染、導管感染、臍帶殘端感染?!緲吮静杉萜鳌繜o菌試管或無菌拭子。【標本的采集方法】1開放性感染和已潰破的化膿灶先用滅菌生理鹽水沖洗表面的污染菌,用滅菌拭子采取膿液及病灶深部的分泌物。注意盡量取化膿組織與正常組織交界處的膿汁,因為膿汁中心的細菌大部分已死亡,交接處的活菌較多,會提高陽性率。對于慢性感染,因污染嚴重,很難分離到致病菌,可取感染部位下的組織,研磨成組織勻漿接種于培養(yǎng)基。2閉鎖性膿腫一般采用穿刺或手術引流的方法采取采集前先用碘伏消毒周圍皮膚?!緲吮静杉⒁馐马棥?采集時間應在用藥之前采取。2送檢應立即送檢。七、腦脊液標本的微生物檢驗腦脊液的細菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、一般細菌涂片、真菌涂片、結(jié)核菌涂片、墨汁染色查新型隱球菌?!緲吮静杉暗淖⒁馐马棥繎诳股貞们盎蛲K幰恢芎蟛杉瘶吮?,如不能停用抗生素,應于下次抗生素應用前采集?!緲吮舅蜋z指征】成人發(fā)熱、頭痛、惡心、嘔吐、頸強直和反射增強等癥狀,懷疑為腦膜炎的患者。兒童因兒童和新生兒的臨床表現(xiàn)不明確,因此對于嬰兒不明原因發(fā)熱,應懷疑為腦膜炎,采取腦脊液。作腦脊液培養(yǎng)的患者,建議同時做血培養(yǎng)?!緲吮静杉萜鳌繜o菌試管或小瓶?!緲吮镜牟杉椒ā坑醚┑姆椒ú杉X脊液,如果用于檢測細菌或病毒,腦脊液量應大于或等于1ML,如果用于檢測真菌或抗酸桿菌,腦脊液量應大于或等于2ML。【標本采集注意事項】1采集時間應立即采集,且最好于抗生素使用之前。2送檢收集標本后,常溫下15分鐘內(nèi)送到實驗室。腦脊液標本不可放冰箱保存,會使一些細菌死去(如腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌)。常溫下可存放24小時。八、胸腹水標本微生物檢驗細菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、一般細菌涂片、真菌涂片、結(jié)核菌涂片。【標本采集前的注意事項】應在抗生素應用前或停藥一周后采集標本,如不能停用抗生素,應于下次抗生素應用前采集?!緲吮舅蜋z指征】多伴有胸痛及發(fā)熱。懷疑為下列疾病結(jié)核性胸膜炎、細菌性肺炎引起的胸膜炎、肺部真菌感染引起的胸腔積液。腹痛可局限于炎癥局部也可遍布全腹。嘔吐常為早期癥狀之一,較輕。如發(fā)生麻痹性腸梗阻會出現(xiàn)持續(xù)性嘔吐。腹部壓痛、肌緊張、腸鳴音減弱或消失?!緲吮静杉萜鳌繜o菌試管或無菌容器。【標本的采集方法】1首先用碘伏毒穿刺要通過的皮膚。2用針穿刺法或外科手術引流法采集標本,然后放入無菌試管或小瓶內(nèi)。為防止凝固,應在試管中先加入滅菌肝素。3盡可能采取更多的液
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