玉米病害概論玉米病害的診斷與鑒定VIP

玉米病害概論玉米病害的診斷與鑒定 【摘 要】病害的識(shí)別過(guò)程便是診斷的過(guò)程。診斷病害是研究病害發(fā)生規(guī)律和制定防治措施的前提，是一項(xiàng)技術(shù)性很強(qiáng)的工作。要正確診斷病害，首先要掌握較豐富的植物病理學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)，其次要有一套完整的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和精密分析儀器和有關(guān)文獻(xiàn)資料等硬件，還要全面了解植物病害發(fā)生特點(diǎn)、癥狀類(lèi)型、病原性狀及分類(lèi)的基礎(chǔ)知識(shí)和病害研究的基本方法。 【關(guān)鍵詞】玉米病害；診斷；鑒定 一、玉米病害診斷 主要包括田間癥狀觀察、發(fā)病特點(diǎn)調(diào)查分析和病原鑒定3個(gè)方面。 1田間癥狀觀察與診斷 田間癥狀觀察時(shí)，一要特別注意同一病害不同生育階段的癥狀變化；二要區(qū)分不同病 原可以產(chǎn)生相似癥狀的所謂同癥異源性變化；三要區(qū)別同一病原在寄主不同部位產(chǎn)生不同癥狀的所謂同源異癥性變化；四要區(qū)別一種病原先行侵染，而后另一種病原伴隨入侵形成嚴(yán)重發(fā)病的復(fù)合侵染的癥狀特點(diǎn)；五要區(qū)分玉米在發(fā)生一種病害的同時(shí)，又有另一種病害伴隨發(fā)生的所謂續(xù)發(fā)性病害的特點(diǎn)；六要區(qū)分侵染性與非侵染性病害的發(fā)生特點(diǎn)；同時(shí)還要區(qū)分急性和慢性型癥狀與抗病品種和感病品種上產(chǎn)生特異性或不同類(lèi)型的癥狀特點(diǎn)。所以，癥狀識(shí)別也是一項(xiàng)細(xì)致、復(fù)雜而又技術(shù)性很強(qiáng)的工作。有的病害單憑癥狀觀察診斷是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，要想做出正確的結(jié)論，還要結(jié)合化學(xué)診斷、指示植物鑒定、病原菌分離和接種試驗(yàn)等做出最終的判斷。當(dāng)然對(duì)一些常見(jiàn)的病害可以通過(guò)癥狀觀察得出可靠的診斷結(jié)果。 2發(fā)病特點(diǎn)調(diào)查分析 田間診斷首先要區(qū)分侵染性病害和非侵染性病害。非侵染性病害在田間分布往往沒(méi)有發(fā)病中心，多成片的或大面積的發(fā)生，注意調(diào)查發(fā)病前所采取的管理措施，如追肥、噴藥、澆水(水質(zhì)污染)、氣候的變化如干熱風(fēng)、冰雹、霜凍、刮風(fēng)、雷雨等。當(dāng)然，非侵染性病害也偶有零星點(diǎn)片發(fā)生的，如施肥不均，用藥不當(dāng)或者特殊的環(huán)境等因素的影響等。從病情看，非侵染性病害沒(méi)有病原物，在田間發(fā)病不相互傳染，植株受害的部位一般上下較為一致或者葉更為嚴(yán)重，病情比較穩(wěn)定，而且癥狀輕微的在環(huán)境條件改善后還會(huì)緩解。 侵染性病害是由病原物侵染所致，病害在田間表現(xiàn)的特點(diǎn)是多呈隨機(jī)分布，點(diǎn)片發(fā)生。有明顯的發(fā)病中心，并有明顯的傳染性。在病部往往有真菌或細(xì)菌產(chǎn)生的病癥特點(diǎn)，發(fā)病條件適宜，能造成嚴(yán)重發(fā)生或流行成災(zāi)。 玉米發(fā)生侵染性病害的病原物通常主要有四大類(lèi)，即真菌、細(xì)菌、病毒(包括類(lèi)病毒、 菌原質(zhì)體)和線(xiàn)蟲(chóng)。各類(lèi)病原物侵害玉米形成的癥狀有較明顯的區(qū)分，但也有不少癥狀難以區(qū)別。大體是：真菌病害在發(fā)病初期在發(fā)病組織中可查到菌絲體，后期在發(fā)病部位常產(chǎn)生霉?fàn)钗?、粉狀物、小粒點(diǎn)等特殊病癥。如鞭毛菌亞門(mén)的腐霉菌侵染玉米形成苗枯病或莖腐病，在致病的根部或莖部有時(shí)出現(xiàn)白毛霉?fàn)钗铮坏〔客鶗?huì)出現(xiàn)各種類(lèi)型的菌狀物或小黑點(diǎn)。 細(xì)菌病害的病斑周?chē)仕疂n狀或油漬狀，發(fā)病部位在高濕的條件下有的出現(xiàn)黃色或白色菌膿狀物，干燥后形成菌頓。是鑒定和診斷細(xì)菌病害的重要標(biāo)志。線(xiàn)蟲(chóng)病害在受害組織內(nèi)或外部可見(jiàn)到蟲(chóng)體。 病毒病害，因病毒屬活體寄生物，植物體外沒(méi)有病征可查，病毒病所產(chǎn)生的癥狀與線(xiàn)蟲(chóng)和類(lèi)病毒、缺索癥發(fā)生的癥狀有時(shí)難以區(qū)分。同時(shí)，在田間癥狀觀察時(shí)，一定要掌握一種病毒的寄主范圍及在不同寄主上的癥狀特點(diǎn)，其次要注意田間復(fù)合侵染引起的復(fù)雜癥狀特征。因此需要光學(xué)顯微鏡下檢查內(nèi)含體形態(tài)，甚至需要用電子顯微鏡檢查病毒粒體形態(tài)才能確診。 3病原物的觀察和鑒定 (1)病原真菌的觀察和鑒定。檢查真菌病害時(shí)采集鑒定的標(biāo)本癥狀要典型并富有代表性，病原菌要達(dá)到成熟的程度觀察和鑒定才有可靠性。對(duì)于實(shí)體生于植物病部組織表面的，可用解剖針直接從病組織上挑取少許病原物于載玻片水筋中，加蓋玻片直接鏡檢，對(duì)于病原體生在植物病組織內(nèi)的，可用徒手切片法制片檢查。對(duì)植物感病部位沒(méi)有產(chǎn)生子實(shí)體的，通常采用以下方法： 1)取新鮮病組織誘發(fā)法。將病組織剪成35mm小段，用清水或自來(lái)水沖洗干凈，置于事先鋪墊2層-3層濕潤(rùn)濾紙或脫脂棉的培養(yǎng)皿內(nèi)，然后加蓋，在溫暖處保溫24h培養(yǎng)，若有子實(shí)體形成，可用雙面刀片或解剖針輕輕刮取或挑取少許菌體，置于載玻片水內(nèi)，加蓋玻片，光學(xué)顯微鏡下檢查菌體的形態(tài)特征。 2)瓊脂培養(yǎng)基誘發(fā)法。在無(wú)菌條件下，取病健交界處的植物組織，切成小塊，用01升汞或2575系列梯度酒精表面消毒后，置于PDA培養(yǎng)基上，在25左右的溫箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，待菌落形成后，再?gòu)牟煌卣鞯木溥吘壢∩僭S菌絲或單個(gè)袍子進(jìn)行重培養(yǎng)，取得純培養(yǎng)物后鏡檢。并將純培養(yǎng)物再接種在健康玉米植株上，在控制條件下觀察是否引起相同的病害癥狀。 3)組織整體透明法。此方法亦可用于種子帶菌檢驗(yàn)。先將種子在含有錐蟲(chóng)藍(lán)的5氫氧化鈉溶液中，20下浸泡24h左右，再將浸泡過(guò)的種子用65左右的熱水中沖洗和小心攪拌，使種胚分離，并用不同孔徑的三層套篩收集種胚。種胚用95乙醇脫水再轉(zhuǎn)移到裝有乳酸酚和水(3：1)混合液的漏斗中，胚漂在上部，排除漏斗下部的沉雜物。將純凈的種胚用乳酸酚煮沸透明2ml，冷卻后鏡檢胚內(nèi)的菌原體。 (2)病原細(xì)菌的觀察與鑒定。在病健交界處剪取一小塊組織，放在滴有無(wú)菌水的載玻片中央，加上蓋玻片，靜止片刻，可見(jiàn)切口四周有污濁狀粘液溢出。將植物組織從載玻片水滴中移出，待載玻片上水滴干燥后，通過(guò)火焰固定再用革蘭氏染色法染色，觀察菌體的形狀、大小、鞭毛數(shù)量、染色反應(yīng)。植物組織中的細(xì)菌，一般要比培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的小一些。一般常見(jiàn)的細(xì)菌病害，可通過(guò)癥狀及病原菌觀察，也可以通過(guò)細(xì)菌的分離培養(yǎng)，查閱資料確定病害名稱(chēng)和病原種名。對(duì)少見(jiàn)和新發(fā)生的病害，病原茵除要進(jìn)行致病力測(cè)定外，還要進(jìn)行細(xì)菌形態(tài)、生理、生化的試驗(yàn)才能確定。革蘭氏染色、血清學(xué)檢驗(yàn)、噬菌體反應(yīng)都是診斷和鑒定細(xì)菌中常用的方法。 二、病原物致病性測(cè)定 對(duì)于以往少見(jiàn)或新發(fā)生的病害，在發(fā)病部位觀察到的病原物或經(jīng)組織分離培養(yǎng)的分離物，必須做致病性測(cè)定，才能做到取偽存真。致病性測(cè)定主要根據(jù)柯赫氏證病律(1888)，即分離接種再分離的證病過(guò)程。 1分離 從病組織上分離到微生物，并獲得純培養(yǎng)。 2接種 用純培養(yǎng)分離物用適當(dāng)?shù)姆椒?針刺、噴霧、注射、傷根、摩擦等)接種到無(wú)發(fā)病的相同桓物上，并觀察是否發(fā)生相同的癥狀。 3再分離 在出現(xiàn)相同癥狀的部位重新分離到與接菌相同的純培養(yǎng)物，即可證實(shí)引起病害的病原物。 柯氏證病