糖尿病的實驗室檢ppt課件

.,糖尿病的實驗室檢查,.,糖尿?。╠iabetesmellitus，DM）,由遺傳和環(huán)境因素共同引起的一組以糖代謝紊亂為主要表現(xiàn)的臨床綜合征。,.,分類,1型糖尿病2型糖尿病其他特殊類型糖尿病妊娠糖尿病,.,診斷標準（WHO，1999）,癥狀+隨機血糖11.1mmol/L空腹血糖7.0mmol/L75g葡萄糖負荷后2小時血糖11.1mmol/L,.,實驗室檢查,OGTT-胰島素（或C-肽）釋放試驗HbA1c胰島自身抗體尿系列蛋白,.,1.禁食12-14小時，早晨空腹采抗凝靜脈血2ml，測血糖，口服75克葡萄糖（溶入200-300ml水中），3-5分鐘內(nèi)全部服完，記錄開始服糖時間，在服糖后2小時（2小時的血糖值是診斷糖耐量異常或糖尿病的重要指標）采抗凝靜脈血2ml，測血糖，必要時可采服糖后第1、3、4小時的血。,一、口服葡萄糖糖耐量試驗（OGTT）,.,2正常參考值：空腹靜脈血漿血糖6.1mmol/L服糖2小時靜脈血漿血糖7.8mmol/L3注意事項和影響因素：試驗中禁用茶、咖啡、食物和乙醇，禁煙，可站立、慢走和端坐，不能激烈活動。對糖代謝有影響的主要藥物包括噻嗪類利尿劑、受體阻斷劑、口服避孕藥、甲狀腺激素、煙酸、利福平和水楊酸等，試驗前應(yīng)停用3天以上，正在服用糖皮質(zhì)激素者不適于作糖耐量試驗。,一、口服葡萄糖糖耐量試驗（OGTT）,.,病人無急性疾病和影響試驗的慢性疾病，每天至少攝入碳水化合物150g，3天以上。如已診斷糖尿病，可不作該試驗（除非為作胰島素或C肽釋放試驗）。兒童服葡萄糖按每公斤體重1.75g計算，總量不超過75g。血糖測定采用葡萄糖氧化酶法，血清與血漿血糖無明顯差別，采血后應(yīng)盡早測血糖，不要超過3時，否則血糖會降低。根據(jù)WHO糖耐量試驗要求，葡萄糖應(yīng)是75g無水葡萄糖或82.5g含一分子水的葡萄糖。由于受體內(nèi)吸收等因素的影響糖耐量試驗的結(jié)果重復(fù)性較差。,一、口服葡萄糖糖耐量試驗（OGTT）,.,2試驗方法：3正常參考值（化學(xué)發(fā)光免疫測定法）：采用75克葡萄糖法同糖耐量試驗。采用饅頭餐法，空腹采靜脈血后，吃2兩饅頭（100克面粉）空腹胰島素627mIU/L，胰島素濃度在服糖后（或饅頭餐后）0.5-1小時達高峰，可比空腹胰島素濃度高數(shù)倍至10倍，3小時后降至接近正常水平。,二、胰島素釋放試驗,.,4注意事項和影響因素：如已確診為糖尿病，為了解胰島功能可考慮用饅頭餐試驗，對糖耐量試驗有影響的藥物和疾病同樣會影響胰島素釋放試驗。試驗當天早上不能使用降糖藥物和胰島素。有些藥盒不能區(qū)分胰島素原和胰島素原裂解產(chǎn)物，注射外源性胰島素產(chǎn)生的胰島素抗體可干擾胰島素測定。正在使用胰島素的病人，特別是中長效胰島素，會影響測定結(jié)果（測定值包括了內(nèi)源性和外源性胰島素），應(yīng)測定C-肽水平。糖尿病人的胰島細胞功能受糖尿病類型、體重、病程和血糖高低等因素的影響。,二、胰島素釋放試驗,.,5臨床意義和應(yīng)用：用于了解胰島細胞的功能，協(xié)助糖尿病的分型和指導(dǎo)治療。典型1型糖尿病胰島素分泌曲線低平，2型糖尿病胰島素分泌與病程、體重和血糖高低關(guān)系密切，病程短、肥胖和血糖控制好者，胰島素分泌曲線有一定峰值，但峰值后延。病程長、消瘦和血糖控制差者，胰島素分泌曲線低平。用于胰島細胞瘤的診斷，胰島細胞瘤病人有空腹低血糖和不適當增高的胰島素水平。胰島素自身免疫綜合征時胰島素水平較高，體內(nèi)同時存在胰島素自身抗體。,二、胰島素釋放試驗,.,1原理：同胰島素釋放試驗。2試驗方法：75克葡萄糖法見糖耐量試驗。饅頭餐試驗見胰島素釋放試驗。胰高血糖素刺激試驗，胰高血糖素可刺激胰島細胞分泌胰島素，其方法如下，清晨空腹靜脈注射1mg胰高血糖素，在注射前和注射后6分鐘采靜脈血測血糖和C肽水平。,三、C肽釋放試驗,.,3正常參考值（化學(xué)發(fā)光免疫測定法）：空腹C肽2981324pmol/L，正常人采用75克葡萄糖法或饅頭餐試驗，C肽濃度在服糖后（或饅頭餐后）0.5-1小時達高峰，可比空腹C肽濃度高3-5倍，3小時后降至接近正常水平。胰高血糖素刺激后C肽峰值在6分鐘左右。4注意事項和影響因素：見胰島素釋放試驗。胰高血糖素刺激試驗禁用于對其成分過敏者和疑有腎上腺腺瘤者，空腹血糖7mmol/L時試驗結(jié)果不好分析，胰高血糖素刺激試驗與75克葡萄糖法或饅頭餐試驗比較重復(fù)性好、時間短和不受慢性高血糖的影響。,三、C肽釋放試驗,.,5臨床應(yīng)用與分析：了解胰島細胞的分泌功能,協(xié)助糖尿病的分型,特別是正在使用胰島素的病人。幫助指導(dǎo)用藥和胰島素的使用，有報告認為胰高血糖素刺激后C肽水平600pmol/L時應(yīng)考慮用胰島素治療。,三、C肽釋放試驗,.,HbA1c,HbA1c是葡萄糖分子和血紅蛋白A某些部位分子經(jīng)緩慢而不可逆非酶促反應(yīng)而形成的產(chǎn)物,.,血紅蛋白的糖基化,Glucoseentersredbloodcellswhereitreactswiththehemoglobin,.,成人糖化和非糖化的血紅蛋白,AdultHb,FetalHb,Non-glycated,Glycated,.,HbA1c形成的動力學(xué),壽命：120days.50%的HbA1c值與過去30天內(nèi)的平均血糖水平相關(guān)40%的HbA1c值與過去3190天平均血糖水平相關(guān).10%HbA1c與過去91120天平均血糖水平相關(guān).,.,檢測方法,陽離子交換樹脂微柱層析法HPLC電泳法親和色譜微柱法放免法免疫比濁法免疫競爭抑制法,.,影響因素,血紅蛋白分子病、地中海貧血、溶血性貧血、懷孕等紅細胞壽命縮短，從而糖化血紅蛋白的量降低；腎功能不全、慢性酒精中毒等減慢HB的代謝，使其壽命延長，從而使糖化血紅蛋白的量增加。,.,診斷：優(yōu)點,比血糖檢測穩(wěn)定性好，精確度高，實驗室變異系數(shù)小個體內(nèi)變異率小，日間差僅35歲，發(fā)病時沒有酮癥，發(fā)病半年內(nèi)不需要胰島素治療，但起病后功能逐步衰減，一般在56年后大多（94%)需要都需要胰島素治療。病理上亦表現(xiàn)為胰島炎。發(fā)病時自身抗體的檢測對LADA的診斷具有重要作用，有人認為自身抗體陽性是診斷LADA的必備條件。,.,a)5%10的2型糖尿病自身免疫抗體陽性；b)58的LADA表現(xiàn)為單一抗體陽性；c)51成年發(fā)病的1型糖尿病為單一抗體陽性；只有14的兒童糖尿病為單一抗體陽性，LADA的抗體滴度明顯低于典型的1型糖尿病。d)IA-2A在LADA檢出率低，幾乎與其他抗體同時存在。,.,3)自身抗體檢測對1型糖尿病的預(yù)報作用,1）自身抗體在1型糖尿病的前期就存在，而且研究發(fā)現(xiàn)自身抗體陽性者以后發(fā)生1型糖尿病的機率遠高于自身抗體陰性者，因此自身抗體的檢測在預(yù)測1型糖尿病中被廣泛采用。2）研究表明無論在1型糖尿病的1級親屬還是在普通人群（兒童）中，1型糖尿病只發(fā)生在那些最初有多個抗體陽性者，目前大多報道認為如果初查時有2個以上抗體陽性，那么6年后發(fā)生1型糖尿病的可能是50；在多項大規(guī)模的前瞻性研究中均發(fā)現(xiàn)最初自身抗體檢測陰性者在隨訪68年后不發(fā)現(xiàn)1型糖尿病。3）IA2As和GADA是最常用的作為篩查的第一線抗體。,.,4)自身抗體與糖尿病的治療,1）典型1型糖尿病發(fā)病即需要胰島素治療，因此自身抗體對其治療指導(dǎo)作用很??；2）對成人發(fā)病的糖尿病，自身抗體的檢測可以預(yù)告其胰島細胞功能衰竭的發(fā)生，因此在這類病人早期測定自身抗體，及時采取適當措施，可能保護殘存的細胞，起到穩(wěn)定病情的作用。,.,5)自身抗體與1型糖尿病的預(yù)防,預(yù)報1型糖尿病的目的是預(yù)防其進一步發(fā)展為糖尿病自身抗體的檢測可以預(yù)報1型糖尿病，從而為發(fā)現(xiàn)高危人群提供了手段在動物實驗，多種方法可以預(yù)防1型糖尿病的發(fā)生但在人類預(yù)防1型糖尿病的發(fā)生還需要經(jīng)過艱苦的努力,.,小結(jié)自身抗體的檢測對1型糖尿病的診斷與分型、預(yù)報及防治等方面均具有重要作用。,.,尿系列蛋白測定,糖尿病腎病的早期診斷十分重要，臨床上糖尿病腎病的早期診斷主要依賴于對尿蛋白的檢測。,.,尿蛋白種類,白蛋白(Alb)，最常用（中分子）轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF，中分子）IgG（大分子）微球蛋白測定（a1-或B2-微球蛋白，小分子）視黃醛結(jié)合蛋白(RBP，小分子)胱抑素-C（小分子）TammHorsfallprotein(THP，遠曲小管分泌）N-乙酰-B-氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶（NAG，近曲小管排泌）,血漿蛋白腎小球濾過,.,正常情況下血清蛋白：不易被腎小球濾過可被近端腎小管以吞飲方式重吸收,.,蛋白尿的形成原因,腎小球內(nèi)跨毛細血管壓力過高腎小球濾過屏障機制障礙，包