氨茶堿對小鼠心肺復(fù)蘇的作用.doc

成績：山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題 目：氨茶堿對小鼠心肺復(fù)蘇的作用設(shè)計(jì)者：郭小琴 李秀琪 王超 李成林 專 業(yè)：醫(yī)學(xué)影像學(xué)班 級： 醫(yī)學(xué)院 06級4班聯(lián)系電話：15966060676835122009年05月14日立題依據(jù)（主要說明本研究的目的、意義、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及主要參考文獻(xiàn)）近來的研究已表明心跳驟停后,除交感神經(jīng)系統(tǒng)和副交感神經(jīng)系統(tǒng)出現(xiàn)改變外,內(nèi)源性的腺苷系統(tǒng)起著非常重要的作用。臨床和實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)心肌缺血和缺氧時存在大量的腺苷釋放 ,后者可拮抗兒茶酚胺的興奮作用,降低起搏細(xì)胞的功能,減慢心率,抑制房室傳導(dǎo),擴(kuò)張血管,還顯著增加電除顫的閾值,因此對于心跳驟停的患者給予腺苷受體拮抗劑氨茶堿,有可能促進(jìn)心跳驟?；颊咝碾娕c血流動力學(xué)不穩(wěn)定性的恢復(fù)。早在1993 年Viskin 等學(xué)者在15 例對腎上腺素?zé)o反應(yīng)的心跳驟?；颊咧袘?yīng)用了氨茶堿(250 mg) ,有11 例恢復(fù)了心電活動,但其中有8 例死于心源性休克,2 例死于缺氧性腦病,1 例出院,但文中未交代自主循環(huán)恢復(fù)情況。近年來國內(nèi)的研究表明早期腎上腺素聯(lián)合氨茶堿用于心臟停搏的治療可能優(yōu)于單純應(yīng)用腎上腺素,它有助于心電活動的恢復(fù)和近期存活時間的延長。但是否氨茶堿能取代腎上腺素的作用還有待于探討。另外,人們對心臟驟停和心肺復(fù)蘇的研究大多局限在大動物,近年來應(yīng)用家兔和大鼠進(jìn)行CPR 研究的逐漸增多 ,但應(yīng)用小鼠進(jìn)行CPR 研究的報(bào)道還很少。國外現(xiàn)在多采用電擊法或靜脈注射藥物來復(fù)制小鼠心臟驟停模型,兩者都存在一定缺陷。靜脈注射藥物雖然簡單,但用藥劑量不易控制,且藥物在體內(nèi)堆積給后續(xù)研究尤其是在觀察復(fù)蘇藥物療效時帶來困難。電擊誘發(fā)室顫的模型發(fā)生心臟驟停的時間短,更接近臨床,但其操作復(fù)雜。研究者必須將電極經(jīng)右心導(dǎo)管送至右心室,再把一定能量的交流電引至心內(nèi)膜誘發(fā)室顫。陳蒙華等在研究中發(fā)現(xiàn): 經(jīng)食管心室快速起搏能導(dǎo)致小鼠血壓迅速下降至10mmHg 以下,但個體差異較大。究其原因主要是呼吸的影響。由于研究中未使用肌松藥,在起搏刺激的同時小鼠仍有呼吸運(yùn)動,而心臟在呼吸時發(fā)生移位,使部分起搏脈沖不能捕獲心室,導(dǎo)致心室仍能間歇搏動、維持一定的排血量。隨著起搏刺激時間的延長,小鼠呼吸運(yùn)動逐漸減弱到消失,所有起搏脈沖均能捕獲心室,造成“室顫樣效應(yīng)”,血壓迅速下降至0 mmHg。綜上所述,經(jīng)食管心室快速起搏誘發(fā)小鼠心臟驟停具有操作簡單、重復(fù)性好、可控性強(qiáng)等特點(diǎn),該模型穩(wěn)定,復(fù)蘇成功率高,能夠滿足心肺復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)研究的需要,尤其適用于復(fù)蘇藥物的療效鑒定和篩選,有推廣應(yīng)用的價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)通過設(shè)立不同的實(shí)驗(yàn)組和小鼠心肺復(fù)蘇模型的制備來研究氨茶堿對小鼠心肺復(fù)蘇的影響。參考文獻(xiàn)：氨茶堿和腎上腺素合用在心臟停搏患者中的療效馬勇中國急救醫(yī)學(xué)2003/04氨茶堿在腎上腺素?zé)o效心臟驟?；颊咧袘?yīng)用的初步研究孟慶義中國急救醫(yī)學(xué)2001/04中華老年心腦血管病雜志2004年2月第6卷第1期氨茶堿與腎上腺素合用在大鼠心臟停搏中的療效 馬勇,孟慶義,王志忠,錢遠(yuǎn)宇中國急救醫(yī)學(xué)2005年12月第25卷第12期小鼠心臟驟停動物模型的建立 陳蒙華1實(shí)驗(yàn)材料（包括動物的品種、規(guī)格、數(shù)量和來源；藥品的名稱、規(guī)格和來源；儀器設(shè)備等）實(shí)驗(yàn)動物：小鼠 20只 3050 g （山東大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心 ）藥品：烏拉坦 肝素鈉 腎上腺素 氨茶堿 儀器設(shè)備：18 g 套管； 4 倍放大鏡 ； 24 G靜脈留置管 ；皮下針頭 ； 4 極5 F 起搏電極 ； 定容型小動物呼吸機(jī)(DH - 150 , 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器公司)；壓力換能器與BL - 420E 生物機(jī)實(shí)驗(yàn)方法（詳細(xì)寫明實(shí)驗(yàn)步驟，尤其動物分組、給藥途徑和劑量、觀察指標(biāo)及數(shù)據(jù)處理等）動物的準(zhǔn)備選用健康小鼠20 只,體質(zhì)量3050 g ,雌雄不限。隨即均分為四組。小鼠經(jīng)腹腔注射烏拉坦(1 g/ kg) 麻醉、氣管切開并插入18 g 套管以備接呼吸機(jī)用。分離并切開左頸總動脈,借助4 倍放大鏡插入預(yù)充肝素鈉的24 G靜脈留置管,通過壓力換能器與BL - 420E 生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)連接以監(jiān)測動脈壓。同時經(jīng)四肢皮下針頭記錄標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)聯(lián)心電圖。經(jīng)食管心臟起搏誘發(fā)室顫4 極5 F 起搏電極經(jīng)口插入食管約4 cm ,電極近端與BL - 420E 生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的電生理刺激輸出端相連。先測定心室起搏閾值(通常起搏電壓為1518 V ,脈寬58 ms) ,誘發(fā)室顫電壓應(yīng)高于起搏閾值35 V。采用連續(xù)快速起博誘發(fā)室顫,所需參數(shù)為:電壓20 V、脈寬10 ms、頻率20 Hz。當(dāng)起搏90 s 后暫停起搏并觀察12 s ,如心電圖顯示,起搏誘發(fā)出來的室顫自動轉(zhuǎn)律時,應(yīng)立即再起搏30 s ,直至誘發(fā)出的室顫持續(xù)存在、或出現(xiàn)無脈性電活動或一條直線(無心電活動) 為止,通常需要起搏90180 s 不等。起博刺激后4 min 開始心肺復(fù)蘇CRP。采用定容型小動物呼吸機(jī)(DH - 150) 行機(jī)械通氣(室內(nèi)空氣) ,通氣頻率70 次/ min ,潮氣量為4 mL/ kg 。一組：人工手法行胸外心臟按壓,頻率200 次/ min。按壓深度為小鼠胸廓前后徑1/ 3 。二組：胸外按壓的同時經(jīng)動脈注射腎上腺素100g/ kg 。實(shí)驗(yàn)全程連續(xù)監(jiān)護(hù)心電和血壓。三組：在二組的基礎(chǔ)上經(jīng)動脈注射氨茶堿68g/ kg。實(shí)驗(yàn)全程連續(xù)監(jiān)護(hù)心電和血壓。四組：二三聯(lián)合判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷誘發(fā)心臟驟停的標(biāo)準(zhǔn)為有創(chuàng)血壓監(jiān)測顯示平均動脈壓 20 mmHg ,持續(xù)1 min 以上。 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法本組資料采用.x s 表示,并采用stata 4. 0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料的比較采用Pearson 2 檢驗(yàn)或Fisher 精確檢驗(yàn),非正態(tài)分布或方差不齊用kwallis 秩和檢驗(yàn),計(jì)量資料的比較采用Student t 檢驗(yàn)或方差分析。P 0. 05) 。起效時間氨茶堿+ 腎上腺素組、氨茶堿組，顯著快于腎上腺素組 ( P 0. 05)。對照組小鼠成活率較低。自主循環(huán)恢復(fù)的比較氨茶堿+ 腎上腺素組恢復(fù)自主循環(huán),腎上腺素組恢復(fù)自主循環(huán),氨茶堿組恢復(fù)自主循環(huán);3 組差異無顯著性意義( P 0. 05) 。循環(huán)開始恢復(fù)時間氨茶堿+ 腎上腺素組,腎上腺素組,氨茶堿組。循環(huán)開始恢復(fù)時間和作用持續(xù)時間3 組差異無顯著性意義( P 0. 05) 。氨茶堿+ 腎上腺素組平均血壓,顯著高于腎上腺素組和氨茶堿組。結(jié)果分析：氨茶堿可舒張支氣管平滑肌， 增加內(nèi)源性