傣藥竹葉蘭的化學成分研究.doc

傣藥竹葉蘭的化學成分研究劉美鳳1,丁怡2,杜力軍2 (1.廣州奇星藥業(yè)有限公司,廣東廣州510310; 2.清華大學生物科學與技術系,北京100084)竹葉蘭Arundina graminifolia(D. Don)Hochr.為蘭科竹葉蘭屬植物,別名長桿蘭,草姜,山荸薺,竹蘭,禾葉竹葉蘭,文哈海(傣名),廣泛分布于熱帶和亞熱帶地區(qū),植物資源豐富,為西雙版納地區(qū)傣族人民常用的植物藥。其藥用部位為根莖和莖葉,用于治療黃疸,熱淋,腳氣水腫,疝氣腹痛,風濕痹痛,胃痛,尿路感染,毒蛇咬傷,瘡癰腫毒,跌打損傷等1。初步的活性篩選結果顯示,竹葉蘭乙醇提取物具有較好抑制腫瘤(Bel-7402和BGC-823)的活性,為了闡明竹葉蘭確切的活性成分,筆者首次對云南產(chǎn)竹葉蘭的干燥根莖進行了系統(tǒng)的化學成分研究,從其乙醇提取物中的醋酸乙酯部位分離得到2個新化合物arundinan2-(對-羥基芐基)-3-羥基-5-甲氧基聯(lián)芐2和arundinaol1-(對-羥基芐基)-7-羥基-2,4-二甲氧基-9,10-二氫菲3,以及一系列菲類母核結構的化合物4。繼續(xù)對竹葉蘭進行化學成分研究的過程中,從其乙醇提取物中的醋酸乙酯和正丁醇部位分離得到9個化合物,分別為1,2-鄰苯二甲酸-二(2-甲基庚酯)1,2-benzendicarboxylic acid bis (2-methylhep-tyl ester)、反式阿魏酸二十三烷酯(2E),2-propenoic acid, 3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-tricosyl ester、反式阿魏酸二十六烷酯(2E),2-propenoic acid, 3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-hexacosyl ester、反式阿魏酸(2E),2-propenoicacid,3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)、十六烷酸(hexadecanoyl acid)、-谷甾醇(-sitosterol)、豆甾醇(stigmasterol)、葡萄糖(glucose)、蔗糖(sucrose),這9個化合物均為首次從竹葉蘭植物中分離得到。1儀器與材料熔點用X-4數(shù)字顯示顯微熔點測定儀測定;PERKIN-ELMER GX-FTIR型紅外光譜儀,KBr壓片;核磁共振譜用Bruker AM 500型核磁共振儀測定,TMS為內標物;質譜EI-MS用AEI MS-50SD90型質譜儀測定;色譜用硅膠H(100200目,200300目)均為青島海洋化工廠產(chǎn)品;SephadexLH-20為Pharmacia公司產(chǎn)品進口分裝,購自金歐亞科技發(fā)展有限公司;Silica gel 60 F254高效薄層板和反相高效薄層板為德國Merck公司產(chǎn)品。本實驗樣品為2002年4月采自云南省西雙版納地區(qū),經(jīng)中國科學院昆明植物研究所楊崇仁教授鑒定為A.graminifolia,留樣于清華大學生命科學與技術系藥物藥理研究室(編號:02041)。2提取與分離竹葉蘭干燥根莖(4 kg)粉碎,95%乙醇回流提取3次,提取液合并,減壓濃縮,與硅膠(100200目)拌樣后,置索氏提取器中,依次用石油醚、醋酸乙酯、丙酮、甲醇回流提取。醋酸乙酯提取物經(jīng)硅膠(200300目)柱色譜,石油醚-醋酸乙酯(10011100)梯度洗脫,各流份反復用硅膠和SephadexLH-20純化,得到化合物(400 mg)、(30 mg)、(10 mg)、(50 mg)、(50 mg)、(20 mg)和(10 mg);丙酮提取物經(jīng)硅膠(200300目)柱色譜,氯仿-甲醇(10000100)梯度洗脫,得到無色晶體(200 mg)和(120 mg)。3鑒定化合物:黃色油狀物,易溶于丙酮。EI-MSm/z:390 M+, 350 CH3(CH2)22CH= CH+, 166C6H4(COOH)2+,140CH3(CH2)7CH=CH+,125,111,97,83,69,57,43。1H-NMR(CDCl3):7.68(2H,dd,J=9.0,2.0 Hz,H-3,6),7.50(2H,dd,J=9.0,2.0 Hz,H-4,5),4.19(4H,m,-O-CH2-,H-1),1.66(2H,m,-C*H(CH2)3,H-2),1.30(18H,m,J=6.5 Hz,-CH2CH2-,H-3,4),0.88(12H,q,J=7.0 Hz,-CH3,H-7,8)。13C-NMR(CDCl3):167.0-(COO)2-,C-1,8,132.4(C-2,7),130.8(C-4,5),128.7(C-3,6),68.0(-O-CH2-,C-1),38.6-C*H(CH2)3,C-2,30.3(-CH2-,C-3),28.8(-CH2-,C-4),23.722.9(-CH2-,C-5,6),14.0(-CH2,C-CDCl3):4.19(H-1)/167.0(C-1),38.6(C-2),30.3(C-3),10.9(C-8)。該化合物的NMR數(shù)據(jù)與文獻報道5的1,2-鄰苯二甲酸-二(2-甲基庚酯)基本一致,故鑒定化合物為1,2-鄰苯二甲酸-二(2-甲基庚酯)?；衔?白色粉末,易溶于氯仿,mp 5658。EI-MS (Pos.)m/z:516M+。1H-NMR(CDCl3):7.60(1H,d,J=16.0 Hz,H-7),7.09(1H,dd,J=8.0,2.0 Hz,H-6),7.40(1H,d,J=2.0Hz,H-2),6.90(1H,d,J=8.0 Hz,H-5),6.30(1H,d,J=16.0 Hz,H-8),4.16(2H,t,J=7.0 Hz,H-1), 3.93 (3H, s, OCH3), 1.68 (2H, m, H-2),1.211.43(多個H,m),0.82(3H,t,J=7.0 Hz,CH3)。該化合物理化常數(shù)和NMR數(shù)據(jù)與文獻報道6的反式-2-丙烯酸,3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-二十三烷酯(反式阿魏酸二十三烷酯)基本一致,結合EI-MS數(shù)據(jù),鑒定化合物為反式阿魏酸二十三烷酯?；衔?白色粉末,易溶于氯仿。EI-MS(Pos.)m/z:558M+。其NMR數(shù)據(jù)與文獻報道6的反式-2-丙烯酸,3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-二十六烷酯(反式阿魏酸二十六烷酯)基本一致,結合EI-MS數(shù)據(jù),鑒定化合物為反式阿魏酸二十六烷酯?；衔?白色粉末,易溶于氯仿、丙酮,mp170172。EI-MSm/z:194M+。1H-NMR(CD-COCD3):7.60(1H,d,J=16.0 Hz,H-7),7.36(1H,d,J=2.0 Hz,H-2),7.10(1H,dd,J=8.0,2.0Hz,H-6),6.88(1H,d,J=8.0 Hz,H-5),6.35(1H,d,J=16.0 Hz,H-8),3.91(3H,s,OCH3),該化合物理化常數(shù)和NMR數(shù)據(jù)與文獻報道7的反式阿魏酸基本一致,故鑒定化合物為反式阿魏酸?；衔?白色粉末,mp 6162。1H-NMR(CDCl3): 10.41 (COOH), 2.28 (2H, t,J= 7.5Hz,-CH2-CH*2-COOH ), 1.60 ( 2H, m,-(CH*2CH2CH2)n-),1.201.41(多個H,m,H12),0.86(3H,t,J=7.0 Hz,CH3)。13C-NMR(CD-Cl3):174.2(COOH),33.823.0(CH2)14,14.0(CH3)。鑒定化合物為十六烷酸?；衔?白色固體,易溶于氯仿,mp 137139。薄層色譜Rf值及顯色與-谷甾醇均相同,與-谷甾醇對照品混合熔點不下降,1H-NMR數(shù)據(jù)與-谷甾醇標準圖譜一致,所以鑒定化合物為-谷甾醇?；衔?白色結晶,易溶于氯仿,mp 171172。薄層色譜Rf值及顯色與豆甾醇一致,與豆甾醇對照品混合熔點不下降,所以鑒定化合物為豆甾醇?；衔?無色長方狀結晶,mp 184186。紅外光譜、薄層色譜Rf值和mp與葡萄糖標準品一致,故鑒定化合物為葡萄糖?；衔?白色結晶,mp 173175。PC與TLC檢識與蔗糖對照品一致。薄層色譜與質譜數(shù)據(jù)證實化合物為蔗糖。致謝:核磁共振譜由北京微量化學研究所代測,質譜由中國科學院化學所代測。References:1Jiangsu New Medical College.Dictionary of Chinese MateriaMedica(中藥大辭典) M. Shanghai: Shanghai Scientificand Technical Publishers, 1986.2Liu M F, Han Y, Xing D M,et al. One new stilbenoid fromArundina graminifoliaJ.Asian J Nat Prod Res, 2004, 6(3): 229-232.3Liu M F, Han Y, Xing D M,et al. One new benzyldihy-drophenanthrene fromArundina graminifoliaJ.Asian JNat Prod Res, 2005, 7(5): 767-770.4Liu M F, Han Y, Zhang D M. Phenanthrene constituentsfrom the tuber ofArundina graminifoliaJ.China J ChinMater Med(中國中藥雜志), 2005, 30(5): 353-356.5Ahemet C, Ahemet M, Yildirim A,et al. Isolation and char-acterization of antioxidant phenolic compounds from the aerialparts ofHypericum hyssopifoliumL. by activity-guided frac-tionation J.J Ethnopharmacol, 2003, 87: 73-83.6Liu M F, Han Y, Ding Y,et al. Constituents from the tuberofArundina graminifoliaJ.China J Chin Mater Med(中國中藥雜志), 2004, 29(2): 147-149.7Sun W J, Xie S C.Determination Analysis of Natural Medi-cal Component(天然藥物成分定量分析) M. Beijing: Chi-na Medico-Pharmaceutical Science and Technology Publish-ing House, 2002.中草藥雜志被評為“第五屆中國百種杰出學術期刊”2006年10月27日中國科學技