藥品注冊(cè)申報(bào)資料模版.doc

注冊(cè)分類：中藥、天然藥物第11類申報(bào)資料目錄(一) 綜述資料1、藥品名稱2、證明性文件3、立題目的與依據(jù)4、對(duì)主要研究成果的總結(jié)與評(píng)價(jià)5、藥品說(shuō)明書(shū)樣稿、起草說(shuō)明及最新參考文獻(xiàn)6、包裝、標(biāo)簽設(shè)計(jì)樣稿（二）藥學(xué)研究資料7、 藥學(xué)研究資料綜述8、 藥材來(lái)源及鑒定依據(jù)12、 生產(chǎn)工藝的研究資料及文獻(xiàn)資料，輔料來(lái)源及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)15、 藥品標(biāo)準(zhǔn)草案及起草說(shuō)明，并提供藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的有關(guān)資料16、 樣品及檢驗(yàn)報(bào)告書(shū)17、 藥物穩(wěn)定性研究的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料18、 直接接觸藥品的包裝材料和容器的選擇依據(jù)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（一）綜述資料、 藥品名稱：漢語(yǔ)拼音： 命名依據(jù)：根據(jù)中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十 冊(cè) 頁(yè)。、證明性文件： 附件藥品生產(chǎn)企業(yè)許可證復(fù)印件。附件營(yíng)業(yè)執(zhí)照復(fù)印件。附件認(rèn)證證書(shū)復(fù)印件。附件不侵權(quán)行為保證書(shū)。附件藥品包裝材料和容器注冊(cè)證復(fù)印件。、立題目的與依據(jù)中藥“ ”處方來(lái)自中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十 冊(cè) 頁(yè)。處方由 、 、 、 、 、 等十七味中藥構(gòu)成，其中 的作用為清熱解毒、消腫散結(jié)，利尿通淋； 的作用為瀉熱通腸、涼血解毒，逐淤通經(jīng)； 的作用為清熱燥濕，瀉火除蒸，解毒療瘡。因此， 具有 ，消腫止痛的功效。對(duì)于臟腑毒熱，血液不清引起的 ，血淋，白濁，尿道刺痛，大便秘結(jié)，疥瘡， ，紅腫疼痛均有很好的療效，受到廣大醫(yī)藥工作者和患者的歡迎，市場(chǎng)前景廣闊。所以，我們選擇了這個(gè)品種,通過(guò)試驗(yàn)對(duì)其生產(chǎn)工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究，進(jìn)一步加強(qiáng)了生產(chǎn)過(guò)程中的中間體及產(chǎn)品的質(zhì)量控制，提高了產(chǎn)品的質(zhì)量。、對(duì)主要研究成果的總結(jié)及評(píng)價(jià)：“ ” 收載于中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十 冊(cè)，根據(jù)國(guó)家有關(guān)藥品管理的政策要求，現(xiàn)按中藥注冊(cè)分類第11類要求開(kāi)展有關(guān)的研究工作，現(xiàn)將各項(xiàng)研究工作總結(jié)如下：4.1 工藝研究我們對(duì)的提取工藝進(jìn)行了研究。其君藥大黃的主要有效成分是蒽醌甙類物質(zhì)，我們以大黃酚作為對(duì)照品，用HPLC法測(cè)定大黃酚的含量，計(jì)算提取過(guò)程中大黃酚的轉(zhuǎn)移率，以確定最佳的提取條件。經(jīng)試驗(yàn)證明水提以20倍水量為宜，即第一次8倍水量，第二次6倍水量，第三次6倍水量，大黃酚的轉(zhuǎn)移率達(dá)到83.1%，提取收膏率為19.2%(比重為1.35,50),加入處方量的 ， 減壓干燥，粉碎后裝入膠囊，成品收率為98%以上。4.2質(zhì)量與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究根據(jù)中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十 冊(cè)“ ”項(xiàng)下質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，我們對(duì)原標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下內(nèi)容進(jìn)行了驗(yàn)證，同時(shí)在原標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上增加了高效液相色譜法測(cè)定“”中的大黃酚含量測(cè)定方法，以大黃酚為對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供），樣品在與對(duì)照品相應(yīng)保留時(shí)間均出現(xiàn)吸收峰，無(wú)陰性對(duì)照干擾，結(jié)果證明該方法靈敏、準(zhǔn)確、快速。表1 不同廠家“”質(zhì)量情況對(duì)比（n=2，mg/粒）生產(chǎn)廠家公司自行試制產(chǎn)品產(chǎn)品批號(hào)3160036200311012003110220031103性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色的粉末；氣腥，味苦澀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色的粉末；氣腥，味苦澀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色的粉末；氣腥，味苦澀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色的粉末；氣腥，味苦澀鑒別（1）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)鑒別（2）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)檢查 水份裝量差異崩解度微生物限度8.0%7.0%15分鐘符合規(guī)定7.8%7.0%15分鐘符合規(guī)定7.6%8.0%14分鐘符合規(guī)定8.1%8.0%15分鐘符合規(guī)定含量測(cè)定0.207 mg/粒0.243 mg/粒0.245 mg/粒0.241mg/粒從上述表中結(jié)果可以看出，我公司研制的產(chǎn)品質(zhì)量明顯優(yōu)于市面同類產(chǎn)品，說(shuō)明我公司已完全掌握了該產(chǎn)品的關(guān)鍵工藝條件，產(chǎn)品質(zhì)量好，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可控性強(qiáng)，操作方便，能基本真實(shí)反映該產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量。4.3初步穩(wěn)定性研究對(duì)3批試制樣品進(jìn)行6個(gè)月加速穩(wěn)定性考察實(shí)驗(yàn)，并按原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及按擬定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果均符合規(guī)定。表明該制劑在加速實(shí)驗(yàn)期內(nèi)質(zhì)量是穩(wěn)定的（具體研究見(jiàn)“藥物穩(wěn)定性研究的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料”項(xiàng)下內(nèi)容）。、藥品說(shuō)明書(shū)樣稿，起草說(shuō)明及最新參考文獻(xiàn)：5.1藥品說(shuō)明書(shū)樣稿。、包裝標(biāo)簽設(shè)計(jì)樣稿 內(nèi)標(biāo)簽（PTP鋁箔）：、藥學(xué)研究資料綜述：“” 收載于中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十冊(cè)，根據(jù)國(guó)家有關(guān)藥品管理的政策要求，現(xiàn)按中藥注冊(cè)分類第11類要求開(kāi)展有關(guān)的研究工作，研究資料綜述如下：7.1 工藝研究我們對(duì)的提取工藝進(jìn)行了研究。其君藥大黃的主要有效成分是蒽醌甙類物質(zhì)，我們以大黃酚作為對(duì)照品，用HPLC法測(cè)定大黃酚的量，計(jì)算提取過(guò)程中大黃酚的轉(zhuǎn)移率，以確定最佳的提取條件。經(jīng)試驗(yàn)證明水提以20倍水量為宜，即第一次8倍水量，第二次6倍水量，第三次6倍水量，大黃酚的轉(zhuǎn)移率達(dá)到83.1%，提取收膏率為19.2%(比重為1.35,50),加入處方量的 、 粉減壓干燥，粉碎后裝入膠囊，成品收率為98%以上。7.2 質(zhì)量及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 我們對(duì)的質(zhì)量及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)作了研究，根據(jù)中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十 冊(cè)“”質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求，對(duì)本品種作了【性狀】、【鑒別】以及【檢查】等項(xiàng)目的檢查測(cè)定；同時(shí)增加中大黃酚的HPLC法含量測(cè)定項(xiàng)目，7.2.1含量測(cè)定方面：照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2000年版一部附錄 D）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇.磷酸（75：25）為流動(dòng)相；流速為每分鐘1ml；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按大黃酚峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五氧化二磷容器中減壓干燥（減壓至16mmHg后室溫放置24小時(shí)）至恒重的大黃酚適量，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.08mg的溶液作為對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物約1g，精密稱定，加甲醇30ml超聲30分鐘，過(guò)濾，揮干甲醇，加氯仿25ml溶解，加濃鹽酸1ml，置水浴上回流30分鐘，放冷，過(guò)濾，揮干氯仿，用甲醇溶解并定容為25ml作為供試品溶液。本品每粒含大黃酚（C15H10O4）以干燥品計(jì)，不得少于0.200mg。7.2.2薄層定性鑒別方面標(biāo)準(zhǔn)正文基本采用了原標(biāo)準(zhǔn)的鑒別方法。7.3質(zhì)量穩(wěn)定性方面經(jīng)對(duì)三批試制的產(chǎn)品作為期6個(gè)月的加速穩(wěn)定性試驗(yàn)，并分別按原標(biāo)準(zhǔn)及擬提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果均符合規(guī)定，表明該產(chǎn)品的質(zhì)量在加速試驗(yàn)期內(nèi)是穩(wěn)定的，故擬定有效期為二年。綜上所述，我公司對(duì)“ ”的研制是成功的，產(chǎn)品質(zhì)量與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)均代表了同類產(chǎn)品的先進(jìn)水平。、藥材來(lái)源及鑒定依據(jù)：所用藥材均由 有限公司提供。黃柏（CORTEX PHELLODENDRI）本品為蕓香科植物黃皮樹(shù)Phellodendron chinense schneid.或黃檗Phellodendron amurense Rupr.的干燥樹(shù)皮。鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部251頁(yè)陳皮(PERICARPIUM CITRI RETICULATAE)本品為蕓香科植物Citrus reticulata Blanco及其栽培變種的干燥成熟果皮。鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部148頁(yè)金銀花（FLOS LONICERAE）本品為忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.、紅腺忍冬Lonicera hupoglauca Miq.、山銀花Lonicera confusa DC.或毛花柱忍冬 Lonicera dasystyla Rehd.的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花。鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部177頁(yè)當(dāng)歸（RADIX ANGELICAE SINENSIS）本品為傘形科植物當(dāng)歸Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根。鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部101頁(yè)乳香 (OLIBANUM) 本品為橄欖科植物卡氏乳香的膠樹(shù)脂。鑒定依據(jù)：吉林省中藥炮制規(guī)范126頁(yè)鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部316頁(yè)鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部294頁(yè)甘草（RADIX GLYCYRRHIZAE）本品為豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、脹果甘草yrrhiza Iflata Bat.或光果甘草rrhiza glabra L.的干燥根及根莖。鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部65頁(yè)蛇蛻（PERIOSTRACUM SERPENTIS）本品為游蛇科動(dòng)物黑眉錦蛇Elaphe teaniura Cope、錦蛇Elaphecarinata(Guenther)或?yàn)跎疑遉aocusdhumnades(Cantor)等蛻下的干燥表皮膜。鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部256頁(yè)芒硝（NATRII SULFAS）本品為硫酸鹽類礦物芒硝族芒硝，經(jīng)加工精制而成的結(jié)晶體。鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部96頁(yè)赤芍(RADIX PAEONIAE RUBRA)本品為毛莨科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall.川赤芍 Paeonia veitchii Lynch的干燥根。鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部125頁(yè)鑒定依據(jù)：中國(guó)藥典2000年版一部42頁(yè)12、生產(chǎn)工藝的研究資料及文獻(xiàn)資料，輔料來(lái)源及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：12.1 處方： 12.2 制備工藝研究我們以中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊(cè)“”的制備工藝為基本工藝路線，對(duì)制備工藝提取用水量進(jìn)行了重點(diǎn)研究，確定了一個(gè)較為合理的工藝路線，情況如下：考察指標(biāo)：工藝研究以君藥大黃中大黃酚的轉(zhuǎn)移率為考察指標(biāo)。大黃酚含量測(cè)定方法：照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2000年版一部附錄 D）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇.磷酸（75：25）為流動(dòng)相；流速為每分鐘1ml；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按大黃酚峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五氧化二磷容器中減壓干燥（減壓至16mmHg后室溫放置24小時(shí)）至恒重的大黃酚適量，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.08mg的溶液作為對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物約1g，精密稱定，加甲醇30ml超聲30分鐘，過(guò)濾，揮干甲醇，加氯仿25ml溶解，加濃鹽酸1ml，置水浴上回流30分鐘，放冷，過(guò)濾，揮干氯仿，用甲醇溶解并定容為25ml作為供試品溶液。本品每粒含大黃酚（C15H1004）以干燥品計(jì)，不得少于0.200mg。 提取用水量的考察表1 不同用水量提取大黃酚轉(zhuǎn)移情況表方案編號(hào) 加水方案 大黃藥材中大黃酚轉(zhuǎn)移率 方案1 4：4：2 59.17%方案2 6：4：4 71.30%方案3 8：6：4 80.52%方案4 8：6：6 83.14%方案5 10：8：6 83.51%方案6 12：10：8 83.93%從表中數(shù)據(jù)可知：當(dāng)提取用水量達(dá)到方案4的水平時(shí)，再增加用水量，大黃酚的轉(zhuǎn)移率不再有顯著的提高，本著保證產(chǎn)品質(zhì)量及節(jié)能降耗的宗旨，我們認(rèn)為選擇方案4作為提取加水工藝是符合工業(yè)化大生產(chǎn)的。12.3 制作過(guò)程及工藝條件藥材炮制：乳香 按吉林省中藥炮制規(guī)范126頁(yè)【炮制】 除凈雜質(zhì)，制成小塊，置鍋內(nèi)文火炒至表面稍溶化，取出放涼。備料：按要求洗、撿、切、干燥，天花粉、白芷粉碎過(guò)60目篩。提?。喊刺幏酵读?，提取溫度為952，一次加水量為8倍，提取時(shí)間為1.5小時(shí)；二次加水量6倍，提取時(shí)間為1小時(shí)；三次加水量6倍，提取時(shí)間為1小時(shí)。濃縮：濃縮溫度80，真空度-0.09Mpa，濃縮至比重為1.35（50）。干燥：混入天花粉、白芷細(xì)粉，干燥溫度80，真空度-0.09Mpa。粉碎整粒：粉碎過(guò)60目篩整粒，得半成品（中間體）。包裝：取上述半成品，裝入膠囊，打光，包裝，即得。12.4 中試情況統(tǒng)計(jì) 統(tǒng)計(jì)了3批的中試情況，即按處方生產(chǎn)投料，統(tǒng)計(jì)大黃酚的轉(zhuǎn)移率、收率情況及按擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）檢驗(yàn)含量情況，結(jié)果全部符合規(guī)定。具體情況如下表：批 號(hào)總處方投料量（g）大黃酚轉(zhuǎn)移率中間體重（g）成品量（粒）收率（%）大黃酚含量（mg/粒）200311012874083.10108062140099.0%0.243200311022874083.05107822130098.8%0.245200311032874083.12107652122098.5%0.241*本實(shí)驗(yàn)投料量按中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十 冊(cè) 頁(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的10倍處方量。文獻(xiàn)資料：1、中國(guó)藥典一部、二部2、畢殿洲等，藥劑學(xué)3、姚新生等，天然藥物化學(xué)4、中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十 冊(cè) 頁(yè)。5、中國(guó)藥典一部（附錄 D）15、藥品標(biāo)準(zhǔn)草案及起草說(shuō)明：15.1 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)15.1.1處方藥材來(lái)源及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)大黃（RADIX ET RHIZOMA RHEI）本品為蓼科植物掌葉大黃Rheum officinale palmatun L.,唐古特大黃Rheum tanguticum maxim.ex Balf.或藥用大黃Rheum officinale Baill.的干燥根及根莖。收載于中國(guó)藥典2000年版一部18頁(yè)。15.1.2成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）【處方】 【制法】以上十七味，除芒硝外，天花粉、白芷粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，其余大黃等十四位，加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次、第三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度1.30（50）的清膏，將芒硝粉碎，加入清膏中，攪勻，濃縮至相對(duì)密度1.35（50）的稠膏，加入上述細(xì)粉，混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，裝入膠囊，即得?！拘誀睢?本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色的粉末；氣腥，味苦澀?！捐b別】 （1）取本品內(nèi)容物約5g，加氯仿25ml，濃鹽酸1ml，置水浴上加熱回流30分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液置水浴上濃縮至約1ml，作為供試品溶液。另取大黃對(duì)照藥材1g，加氯仿10ml，鹽酸1ml,同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法（附錄 B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（3060） -甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在于對(duì)照藥材相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。（2）取本品內(nèi)容物約1g，加甲醇5ml，超聲處理5分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取黃柏對(duì)照藥材1g，加甲醇10ml，同法制層對(duì)照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（附錄 B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7：1：2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在于對(duì)照藥材相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的一個(gè)黃色熒光斑點(diǎn)?！緳z查】 應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（中國(guó)藥典2000年版一部附錄L）?！竞繙y(cè)定】照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2000年版一部附錄 D）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇.磷酸（75：25）為流動(dòng)相；流速為每分鐘1ml；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按大黃酚峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五氧化二磷容器中減壓干燥至恒重的大黃酚適量，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.08mg的溶液作為對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物約1g，精密稱定，加甲醇30ml超聲30分鐘，過(guò)濾，揮干甲醇，加氯仿25ml溶解，加濃鹽酸1ml，置水浴上回流30分鐘，放冷，過(guò)濾，揮干氯仿，殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ轂?5ml作為供試品溶液。測(cè)定法 分別取對(duì)照品和供試品溶液各10l注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每粒含大黃酚（C15H10O4）以干燥品計(jì)，不得少于0.200mg?！竟δ苤髦巍俊居梅ㄓ昧俊靠诜?，一次5粒，一日4次?！窘?忌】孕婦忌服?！疽?guī) 格】每粒裝0.5g【貯 藏】密封。15.2 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)修訂說(shuō)明【名稱】同原標(biāo)準(zhǔn)（指中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十 冊(cè)，下同），即：名稱：漢語(yǔ)拼音：【處方】同原標(biāo)準(zhǔn)，即：【制法】同原標(biāo)準(zhǔn)，即：以上十七味，除芒硝外，天花粉、白芷粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，其余大黃等十四位，加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次、第三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度1.30（50）的清膏，將芒硝粉碎，加入清膏中，攪勻，濃縮至相對(duì)密度1.35（50）的稠膏，加入上述細(xì)粉，混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，裝入膠囊，即得?！拘誀睢?同原標(biāo)準(zhǔn)，即：本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色的粉末；氣腥，味苦澀。表1、性狀觀察結(jié)果供試品批號(hào) 性狀20031101 內(nèi)容物為黃褐色的粉末；氣腥，味苦澀。20031102 內(nèi)容物為黃褐色的粉末；氣腥，味苦澀。20031103 內(nèi)容物為黃褐色的粉末；氣腥，味苦澀。根據(jù)3批樣品的性狀觀察，結(jié)果均符合規(guī)定。【鑒別】 同原標(biāo)準(zhǔn)，即：（1）取本品內(nèi)容物約5g，加氯仿25ml，濃鹽酸1ml，置水浴上加熱回流30分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液置水浴上濃縮至約1ml，作為供試品溶液。另取大黃對(duì)照藥材1g，加氯仿10ml，鹽酸1ml,同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法（附錄 B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（3060） -甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在于對(duì)照藥材相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。附紫外光下色譜示意圖：鑒別（1）薄層層析色譜圖注：1、供試品溶液（批號(hào)20031101） 2、供試品溶液（批號(hào)20031102）3、供試品溶液（批號(hào)20031103） 4、大黃對(duì)照藥材（2）取本品內(nèi)容物約1g，加甲醇5ml，超聲處理5分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取黃柏對(duì)照藥材1g，加甲醇10ml，同法制層對(duì)照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（附錄 B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7：1：2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在于對(duì)照藥材相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同的一個(gè)黃色熒光斑點(diǎn)。附紫外光下色譜示意圖：鑒別（2）薄層層析色譜圖注：1、供試品溶液（批號(hào)20031101） 2、供試品溶液（批號(hào)20031102）3、供試品溶液（批號(hào)20031103） 4、黃柏對(duì)照藥材5、鹽酸小檗堿對(duì)照品【檢查】 同原標(biāo)準(zhǔn)，即：應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（附錄L）。表2，檢查情況結(jié)果：檢查項(xiàng)目 20031101批 20031102批 20031103批水分 7.8% 8.1% 8.0%裝量差異 0.4640.538g 0.4700.541g 0.4730.531g崩解時(shí)限 14分鐘 15分鐘 14分鐘細(xì)菌總數(shù) 50個(gè)/g 60個(gè)/g 40個(gè)/g霉菌及酵母菌總數(shù) 10個(gè)/g 10個(gè)/g 10個(gè)/g大腸桿菌及活螨 未檢出 未檢出 未檢出【含量測(cè)定】原標(biāo)準(zhǔn)無(wú)含量測(cè)定方法，新建高效液相色譜含量測(cè)定方法，即：照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2000年版一部附錄 D）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇.磷酸（80：20）為流動(dòng)相；流速為每分鐘1ml；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按大黃酚峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五氧化二磷容器中減壓干燥（減壓至16mmHg后室溫放置24小時(shí)）至恒重的大黃酚適量，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.08mg的溶液作為對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物約1g，精密稱定，加甲醇30ml超聲30分鐘，過(guò)濾，揮干甲醇，加氯仿25ml,加濃鹽酸1ml，置水浴上回流提取30分鐘，放冷，過(guò)濾，揮干氯仿，殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ轂?5ml作為供試品溶液。測(cè)定法 分別取對(duì)照品和供試品溶液各10l注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每粒含大黃酚（C15H10O4）以干燥品計(jì)，不得少于0.200mg。由于本方法為新建，故本處列出方法學(xué)考察的情況，具體試驗(yàn)說(shuō)明如下：1、實(shí)驗(yàn)儀器與材料：Agilent 1100 高效液相色譜儀色譜柱：Agilent Eclipse XDB-C8分析柱（150mm4.6mm,5um）METTLER TOLEDO AG135 十萬(wàn)分之一天平大黃酚對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）樣品（ 有限公司提供）磷酸（分析純）一般用途甲醇為分析純，流動(dòng)相用甲醇為色譜純，水為重蒸水。2、提取條件的選擇根據(jù)中國(guó)藥典（2000年版一部）“大黃”藥材含量測(cè)定的樣品處理方法，并結(jié)合加樣回收率試驗(yàn)考察，最終確定的樣品處理方法為：取本品內(nèi)容物約1g，精密稱定，加甲醇30ml，超聲30分鐘，過(guò)濾，揮干甲醇，加氯仿25ml,加濃鹽酸1ml，置水浴上回流提取30分鐘，放冷，過(guò)濾，揮干氯仿，殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ轂?5ml作為供試品溶液。3、色譜條件的確定通過(guò)查閱各種藥學(xué)資料及中國(guó)藥典（2000年版）關(guān)于“大黃”藥材的含量測(cè)定方法，我們對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行篩選，最終確定的色譜條件如下：色譜柱：Agilent Eclipse XDB-C8分析柱（150mm4.6mm,5um）檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm 流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸溶液（75：25）流速：lml/分鐘 柱溫：室溫大黃酚對(duì)照品圖譜樣品陰性對(duì)照品 在該色譜條件下，對(duì)照品峰形良好，樣品相應(yīng)保留時(shí)間的峰形和分離度均良好，陰性對(duì)照品在相應(yīng)保留時(shí)間無(wú)吸收，說(shuō)明該色譜條件符合專屬性的要求。4、對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷容器中減壓干燥（減壓至16mmHg后室溫放置24小時(shí)）至恒重的大黃酚適量，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.08mg的溶液作為對(duì)照品溶液。5、線性關(guān)系試驗(yàn)5.1實(shí)驗(yàn)方法精密稱取經(jīng)五氧化二磷容器中減壓干燥（減壓至16mmHg后室溫放置24小時(shí)）至恒重的對(duì)照品大黃酚2.5mg，用甲醇定容至25ml容量瓶中，配成100ug/ml的對(duì)照品儲(chǔ)備液，吸取儲(chǔ)備液稀釋制成濃度為40ug/ml,5ug/ml的對(duì)照品溶液。按上述色譜條件，進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。5.2 線性關(guān)系結(jié)果序 號(hào) 標(biāo)準(zhǔn)品濃度 進(jìn)樣體積 進(jìn)樣量(10-3ug) 峰面積1 5ug/ml 4ul 20 114.72 40ug/ml 2ul 80 432.13 100ug/ml 6ul 600 3262.54 100ug/ml 14ul 1400 7574.65 100ug/ml 25ul 2500 13472.2以上數(shù)據(jù)，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程如下：回歸方程：y = 5.3884x + 13.856相關(guān)系數(shù)r= 0.9999檢出線性范圍：210-2 ug2.5ug6、檢出限的確定6.1實(shí)驗(yàn)方法將色譜工作站檢測(cè)儀的靈敏度調(diào)高，用1:10倍比稀釋處理的系列對(duì)照品溶液及空白溶劑進(jìn)樣，進(jìn)樣量為10ul,考察對(duì)照品與噪聲強(qiáng)度之間的關(guān)系，以信噪比為3時(shí)確定檢出限。6.2試驗(yàn)結(jié)果通過(guò)實(shí)驗(yàn)，可以確定上述圖譜為最低檢出限圖譜，該HPLC法大黃酚含量測(cè)定的最低檢出限為1ng.7、精密度試驗(yàn)7.1 實(shí)驗(yàn)方法取大黃酚對(duì)照品溶液（每1ml含大黃酚0.04mg）及供試品溶液（批號(hào)為20031101），分次進(jìn)樣（進(jìn)樣量均為10l）各5次，記錄峰面積值。7.2精密度結(jié)果序號(hào)大黃酚對(duì)照品峰面積供試品中大黃酚峰面積12180.3 2651.122183.82654.532179.32658.342188.22655.452176.72647.3平均值2182.32653.3RSD%0.20%0.16%8、重現(xiàn)性試驗(yàn)8.1 實(shí)驗(yàn)方法取本品（批號(hào)為20031101），混勻，精密稱取5份，每份1.0g，按上述擬定的含量測(cè)定方法測(cè)定大黃酚的含量。8.2 重現(xiàn)性結(jié)果（含量，mg/g n=2）序號(hào)12345平均值RSD%含量0.4860.4880.4870.4840.4860.4860.3%9、加樣回收率試驗(yàn)9.1 實(shí)驗(yàn)方法分別精密稱取已知含量的樣品（批號(hào)20031101，含大黃酚0.486mg/g）1.0g，置錐形瓶中，各精密加入大黃酚對(duì)照品溶液（每1ml含0.10mg的溶液）1ml、2ml、3ml，4ml，5ml，揮干甲醇，按樣品含量測(cè)定方法處理分析，計(jì)算加樣回收率。9.2 加樣回收率結(jié)果取樣量（g）樣品中大黃酚含量（mg）大黃酚加入量（mg）大黃酚總測(cè)得量（mg）大黃酚回收量（mg）回收率（%）1.0010.4860.10.5840.09898.001.0050.4880.20.6840.19899.001.0030.4870.30.7860.29999.671.0080.4900.40.8850.39598.751.0000.4860.50.9820.49699.20平均回收率：98.9 %；變異系數(shù)：0.62 %以大黃酚回收量為縱坐標(biāo)，大黃酚加入量為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得線性方程：回歸方程Y=0.993x-0.0007 相關(guān)系數(shù)r=0.999910、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)10.1 實(shí)驗(yàn)方法取同一（20031101批）供試品溶液，按上文擬定的含量測(cè)定條件，每隔2小時(shí)進(jìn)樣10l，測(cè)定大黃酚含量。10.2穩(wěn)定性考查結(jié)果序號(hào)12345平均值RSD%峰面積2661.42657.32653.12651.22659.92656.60.16%實(shí)驗(yàn)證明：供試品的甲醇提取液中的大黃酚在10小時(shí)內(nèi)是穩(wěn)定的。11、樣品含量測(cè)定11.1 實(shí)驗(yàn)方法精密稱取不同批次的本品1.0g，照含量測(cè)定方法提取、測(cè)定大黃酚含量。11.2 含量測(cè)定結(jié)果（mg/粒，n=2）批號(hào)20031101 20031102 20031103 平均值含量 0.243 0.245 0. 241 0.243結(jié)論：通過(guò)以上方法學(xué)的驗(yàn)證結(jié)果表明，用上述高效液相色譜條件測(cè)定中的大黃酚含量是專屬、準(zhǔn)確、可行的。通過(guò)對(duì)3個(gè)批次的含量測(cè)定結(jié)果表明，制劑中大黃酚平均含量為0.243mg/粒，根據(jù)通用含量限度確定方法（15%），確定本品的含量限度不得低于0.200 mg/粒?！竟δ苤髦巍客瓨?biāo)準(zhǔn)，即：“【用法用量】口服，一次5粒，一日4次。”【禁 忌】同原標(biāo)準(zhǔn)，即：“孕婦忌服?！?【規(guī) 格】同原標(biāo)準(zhǔn)，即：“每粒裝0.5g”【貯 藏】同原標(biāo)準(zhǔn)，即：“密封?！?【有 效 期】新增：按加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果，擬定有效期二年。參考文獻(xiàn)：（1）中國(guó)藥典(2000年版)一部、二部16、樣品及檢驗(yàn)報(bào)告書(shū)：樣品：隨材料附上，三批計(jì)480粒。檢驗(yàn)報(bào)告書(shū)見(jiàn)附頁(yè)。藥物穩(wěn)定性研究的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料1、加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表1、（批號(hào)20031101）加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果考察條件：溫度40（2）；相對(duì)濕度75%（5%）；市售鋁塑板包裝。 規(guī)格：每粒裝0.5g 生產(chǎn)日期：2003 年11月1日 放置及檢驗(yàn)時(shí)間檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目0月(2003.11.03)1月(2003.12.03)2月(2004.01.05)3月(2004.02.03)6月(2004.05.04)檢驗(yàn)依據(jù)性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色粉末；氣腥，味苦澀。&鑒別（1）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)&鑒別（2）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)&檢查（1）水分6.8%6.9%6.8%7.0%7.3%&（2）裝量差異0.4610.532g0.4730.545g0.4710.528g0.4590.536g0.4640.540g&（3）崩解時(shí)限14分鐘15分鐘14分鐘14分鐘15分鐘&微生物限度細(xì)菌總數(shù)30個(gè)/g60個(gè)/g40個(gè)/g60個(gè)/g60個(gè)/g&霉菌及酵母菌總數(shù)10個(gè)/g10個(gè)/g10個(gè)/g10個(gè)/g10個(gè)/g&大腸桿菌及活螨未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出&含量測(cè)定（以大黃酚計(jì)）0.243mg/粒0.243mg/粒0.244mg/粒0.243mg/粒0.245mg/粒注：為中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊(cè)；為提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）；&為提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）與中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊(cè)要求相同部分。從檢驗(yàn)結(jié)果看，20031101批在加速穩(wěn)定性試驗(yàn)期內(nèi)，按原標(biāo)準(zhǔn)以及按提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）檢驗(yàn)，結(jié)果均符合規(guī)定。 表2、（批號(hào)20031102）加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果考察條件：溫度40（2）；相對(duì)濕度75%（5%）；市售鋁塑板包裝。 規(guī)格：每粒裝0.5g 生產(chǎn)日期：2003 年11月3日 放置及檢驗(yàn)時(shí)間檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目0月(2003.11.07)1月(2003.12.07)2月(2004.01.07)3月(2004.02.07)6月(2004.05.07)檢驗(yàn)依據(jù)性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色粉末；氣腥，味苦澀。&鑒別（1）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)&鑒別（2）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)&檢查（1）水分6.8%6.9%6.8%7.0%7.3%&（2）裝量差異0.4640.538g0.4630.541g0.4700.538g0.4670.535g0.4630.530g&（3）崩解時(shí)限14分鐘14分鐘14分鐘15分鐘14分鐘&微生物限度細(xì)菌總數(shù)50個(gè)/g40個(gè)/g60個(gè)/g60個(gè)/g30個(gè)/g&霉菌及酵母菌總數(shù)10個(gè)/g10個(gè)/g10個(gè)/g10個(gè)/g10個(gè)/g&大腸桿菌及活螨未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出&含量測(cè)定（以大黃酚計(jì)）0.245mg/粒0.245mg/粒0.245mg/粒0.243mg/粒0.246mg/粒注：為中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊(cè)；為提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）；&為提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）與中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊(cè)要求相同部分。從檢驗(yàn)結(jié)果看，20031102批在加速穩(wěn)定性試驗(yàn)期內(nèi)，按原標(biāo)準(zhǔn)以及按提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）檢驗(yàn)，結(jié)果均符合規(guī)定。表3、（批號(hào)20031103）加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果考察條件：溫度40（2）；相對(duì)濕度75%（5%）；市售鋁塑板包裝。 規(guī)格：每粒裝0.5g 生產(chǎn)日期：2003 年11月9日 放置及檢驗(yàn)時(shí)間檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目0月(2003.11.13)1月(2003.12.13)2月(2004.01.13)3月(2004.02.13)6月(2004.05.14)檢驗(yàn)依據(jù)性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色粉末；氣腥，味苦澀。&鑒別（1）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)&鑒別（2）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)&檢查（1）水分7.8%7.9%7.8%7.8%7.9%&（2）裝量差異0.4610.532g0.4730.545g0.4710.528g0.4590.536g0.4640.540g&（3）崩解時(shí)限14分鐘15分鐘14分鐘14分鐘15分鐘&微生物限度細(xì)菌總數(shù)30個(gè)/g60個(gè)/g40個(gè)/g60個(gè)/g60個(gè)/g&霉菌及酵母菌總數(shù)10個(gè)/g10個(gè)/g10個(gè)/g10個(gè)/g10個(gè)/g&大腸桿菌及活螨未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出&含量測(cè)定（以大黃酚計(jì)）0.241mg/粒0.240mg/粒0.240mg/粒0.241mg/粒0.240mg/粒注：為中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊(cè)；為提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）；&為提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）與中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊(cè)要求相同部分。從檢驗(yàn)結(jié)果看，20031103批在加速穩(wěn)定性試驗(yàn)期內(nèi)，按原標(biāo)準(zhǔn)以及按提高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）檢驗(yàn)，結(jié)果均符合規(guī)定。2、長(zhǎng)期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表1、（批號(hào)20031101）長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果考察條件：溫度25（2）；相對(duì)濕度60%（10%）；市售鋁塑板包裝。 規(guī)格：每粒裝0.5g 生產(chǎn)日期：2003 年11月1日 放置及檢驗(yàn)時(shí)間檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目0月(2003.11.03)3月(2004.02.04)6月(2004.05.04)檢驗(yàn)依據(jù)性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃褐色粉末；氣腥，味苦澀。&鑒別（1）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)&鑒別（2）呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)呈正反應(yīng)&檢查（1）水分6.8%7.0%7.3%&（2）裝量差異0.4610.532g0.4600.532g0.4670.543g&（3）崩解時(shí)限14分鐘14分鐘15分鐘&微生物限度細(xì)菌總數(shù)30個(gè)/g60個(gè)/g6