維生素C標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程.doc

維生素C檢驗(yàn)操作規(guī)程起 草 人日 期20 年 月 日審 核 人日 期20 年 月 日批 準(zhǔn) 人日 期20 年 月 日生效日期頒發(fā)部門質(zhì)量部分發(fā)部門1.目的 建立維生素C檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，規(guī)范操作2.范圍 適用于維生素C的檢查3.依據(jù)： 中國(guó)藥典2010版二部4.職責(zé)4.1 起草 ：QC ，審核： QA ，批準(zhǔn)人：質(zhì)量負(fù)責(zé)人 4.2 QC實(shí)施本規(guī)程。4.3 QA監(jiān)督本規(guī)程的實(shí)施。5.內(nèi)容5.1.1性狀本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，味酸；久置色漸變微黃；水溶液顯酸性反應(yīng)。本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。5.1.2熔點(diǎn)5.1.2.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器和熔點(diǎn)儀5.1.2.1分析步驟 取供試品，置研缽中研細(xì)，移置扁形稱量瓶中，采用105干燥；取兩端熔封的毛細(xì)管，于臨用前鋸斷其一端，將開口的一端插入上述預(yù)處理后的供試品中，再反轉(zhuǎn)毛細(xì)管，并將熔封一端輕叩桌面，使供試品落入管底，再借助長(zhǎng)短適宜（約60cm）的潔凈玻璃管，垂直放在表面皿或其他適宜的硬質(zhì)物體上，將上述裝有供試品的毛細(xì)管放入玻璃管上口使其自由落下，反復(fù)數(shù)次，使供試品緊密集結(jié)于毛細(xì)管底部；裝入供試品的高度應(yīng)為3mm。放入WRS-1D 型熔點(diǎn)儀中。全熔時(shí)毛細(xì)管內(nèi)的液體應(yīng)完全澄清。個(gè)別藥品在熔融成液體后會(huì)有小氣泡停留在液體中，此時(shí)容易與未熔融的固體相混淆，應(yīng)仔細(xì)辨別。熔點(diǎn)為190-192，熔融時(shí)同時(shí)分解。5.1.3 比旋度5.1.3.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器和旋光儀5.1.3.2分析步驟 取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.10g的溶液，供試液的測(cè)定溫度應(yīng)為200.5，使用波長(zhǎng)589.3nm的鈉D線，（汞的404.7nm和546.1nm也有使用）。供試液與空白溶劑用同一測(cè)定管，每次測(cè)定應(yīng)保持測(cè)定管方向、位置不變。旋光度讀數(shù)應(yīng)重復(fù)3次，取其平均值，按規(guī)定公式計(jì)算結(jié)果。以干燥品（藥品標(biāo)準(zhǔn)中檢查干燥失重）或無(wú)水物（藥品標(biāo)準(zhǔn)中檢查水分）計(jì)算。 100 固體樣品t= 液體樣品t= lc ld式中為使用光源的波長(zhǎng)，如使用鈉光燈的D線可用D代替； t為測(cè)定溫度；l為測(cè)頂管的長(zhǎng)度，dm； 為測(cè)得的旋光度； d為液體的相對(duì)密度； c為100ml溶液中含有被測(cè)物質(zhì)的重量g，（按干燥品或無(wú)水物計(jì)算） 測(cè)定含量時(shí)，取2份供試品測(cè)定讀數(shù)結(jié)果其極差應(yīng)在0.02以內(nèi)，否則應(yīng)重做5.2鑒別5.2.1鑒別（1）5.2.1.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器 二氣靛酚鈉試液：取2，6-二氯靛酚鈉0.lg，加水100ml溶解后，濾過(guò)，即得。硝酸銀試液：取硝酸銀17.5g,加水適量使溶解成1000ml, 搖勻。5.2.1.2 分析步驟稱取本品0.2g，加水10ml溶解后，分成二等份（每份5ml），在一份中加硝酸銀試液0.5 ml，觀察：在另一份中加二氯靛酚鈉試液1-2滴，觀察。5.2.2鑒別（2） 紅外光譜5.2.2.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器和紅外分光光度計(jì)5.2.2.2分析步驟取供試品約1mg，置瑪瑙研缽中，加入干燥的溴化鉀或氯化鉀細(xì)粉約200mg，充分研磨混勻，移置于直徑為13mm的壓模中，使鋪布均勻，壓模與真空泵相連，抽氣約2分鐘后，加壓，保持2-5分鐘，除去真空，取出制成的供試片，用目視檢查后均勻，無(wú)明顯顆粒。對(duì)空氣作為背景掃描完后，立即放入供試片進(jìn)行掃描，錄制光譜圖。比較本品的紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照的圖譜（光譜集450圖）5.3檢查5.3.1溶液的澄清度與顏色5.3.1.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器5.3.1.2分析步驟稱取本品3.0g，加水15ml振搖使溶解，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯色，將溶液經(jīng)4號(hào)垂熔玻璃漏斗濾過(guò)，取濾液，測(cè)定時(shí)，以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照，采用1cm的石英吸收池，在420nm的波長(zhǎng)士 2nm以內(nèi)測(cè)試吸光度。除另有規(guī)定外，吸收峰波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長(zhǎng)2mn以內(nèi)，并以吸光度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)。一般供 試品溶液的吸光度讀數(shù)，以在0. 30. 7之間為宜。儀器的狹縫波帶寬度宜小于供試品吸收帶的半高寬度的十分之一，否則測(cè)得的吸光度會(huì)偏低；狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減小狹縫寬度時(shí)供試品的吸光度不再增大為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測(cè)定供試品的吸光度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，或由儀器自動(dòng)扣除空白讀數(shù)后再計(jì)算含量。 以空氣為空白測(cè)定溶劑在不同波長(zhǎng)處的吸收度的規(guī)定波長(zhǎng)范圍（nm）220240241250251300300以上吸光度0.40.20.10.055.3.2熾灼殘?jiān)?.3.2.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器5.3.2.2分析步驟取本品1.0g，置已熾灼至恒重的坩堝中，精密稱定，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0. 5 1ml 潤(rùn)，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，在500600；熾灼使完全灰化，移置干燥器內(nèi)，放冷，精密稱定后，再在500600熾灼至恒重，即得。計(jì)算遺留殘?jiān)?。殘?jiān)?=式中 W坩堝+樣后-熾灼后恒重的坩堝與樣品稱樣量；W坩堝-熾灼前恒重的坩堝稱樣量。5.3.3鐵5.3.3.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器和原子吸收分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液 精密稱取硫酸鐵銨863mg，置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。5.3.3.2分析步驟 稱取本品5.0g兩份，分別置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（B）；另一份中加標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液（A）。在248.3nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定。調(diào)節(jié)增益使能量值位于0.9-1.0之間，然后將顯示轉(zhuǎn)為吸光度。吸入空白溶液后按自動(dòng)調(diào)零。吸入標(biāo)準(zhǔn)溶液（A），記錄吸光度值，若儀器靈敏度低，則關(guān)閉火焰后調(diào)節(jié)噴霧狀態(tài)，之后重新點(diǎn)火測(cè)試。反復(fù)幾次，直至獲得滿意的結(jié)果。測(cè)定一組標(biāo)準(zhǔn)溶液(A)，記錄其相應(yīng)吸光度后繪制工作曲線。測(cè)定待測(cè)試樣溶液(B)，根據(jù)待測(cè)試樣吸光度在工作曲線上查得實(shí)際濃度5.3.4銅5.3.4.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器和原子吸收分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)銅溶液 精密稱取硫酸銅393mg，置1000ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。5.3.4.2分析步驟 取本品2.0g兩份，分別置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（B）；另一份中加標(biāo)準(zhǔn)銅溶液1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液（A）。在324.8nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定。調(diào)節(jié)增益使能量值位于0.9-1.0之間，然后將顯示轉(zhuǎn)為吸光度。吸入空白溶液后按自動(dòng)調(diào)零。吸入標(biāo)準(zhǔn)溶液（A），記錄吸光度值，若儀器靈敏度低，則關(guān)閉火焰后調(diào)節(jié)噴霧狀態(tài)，之后重新點(diǎn)火測(cè)試。反復(fù)幾次，直至獲得滿意的結(jié)果。測(cè)定一組標(biāo)準(zhǔn)溶液(A)，記錄其相應(yīng)吸光度后繪制工作曲線。測(cè)定待測(cè)試樣溶液(B)，根據(jù)待測(cè)試樣吸光度在工作曲線上查得實(shí)際濃度 5.3.5重金屬5.3.5.1 試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器稀鹽酸：取鹽酸234ml，加水稀釋至1000ml，即得。本液含HC1應(yīng)為9.5%10.5%。酚酞指示液：取酚酞lg ,加乙醇100m l使溶解，即得。變色范圍：PH8.310.0(無(wú)色紅）。氨試液：取濃氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得。醋酸鹽緩沖液（pH3. 5) ：取醋酸銨25g，加水25ml溶5解后，加7mol/L鹽酸溶液38ml，用2moI/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液準(zhǔn)確調(diào)節(jié)p H 值至3 . 5 (電位法指示），用水稀釋至100ml ，即得。硫代乙酰胺試液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。臨用前取混合液（由1mol/l氫氧化鈉溶液15ml、水5.0ml、）5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加熱20秒鐘，冷卻，立即使用。1mol/l氫氧化鈉溶液：取澄清的氫氧化鈉飽和溶液56ml，加新沸過(guò)的冷水使成1000ml，搖勻。5.3.5.2分析步驟取三只比色管，分別標(biāo)記為甲，乙，丙。甲管中加標(biāo)準(zhǔn) 鉛溶液1ml與醋酸鹽緩沖液（pH3.5)2ml后,加水稀釋成25ml，乙管中加本品1.0g，加水溶解成25ml，丙管中加人本品1.0g，加水適量使溶解，再加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1ml與醋酸鹽緩沖液（pH3. 5)2ml后，用水稀 釋成25ml;若供試品溶液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀 焦糖溶液或其他無(wú)干擾的有色溶液，使之與乙管、丙管一致； 再在甲、乙、丙三管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放 置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，當(dāng)丙管中顯出的顏色 不淺于甲管時(shí)，乙管中顯示的顏色與甲管比較，不得更深。5.3.6草酸 5.3.6.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀釋至1000ml，即得。氯化鈣試液：取氯化鈣7.5g，加水使溶解成100ml，即得。5.3.6.2分析步驟 取本品0.25g，加水4.5ml，振搖使維生素C溶解，加氫氧化鈉試液0.5ml，加稀醋酸1ml，加氯化鈣試液0.5ml，搖勻，放置1小時(shí)，作為供試品溶液；另精密稱取草酸75mg，置500ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，加稀醋酸1ml，加氯化鈣試液0.5ml，搖勻，放置1小時(shí)，作為對(duì)照品溶液。供試品溶液產(chǎn)生的渾濁與對(duì)照品溶液比較。5.4.含量測(cè)定5.4.1試液及儀器一般實(shí)驗(yàn)儀器稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀釋至1000ml，即得。碘滴定液（0.05mol/L) 取碘13.0g，加碘化鉀36g與水50ml溶解后，加鹽酸3滴與水適量使成1000ml，搖勻，用垂熔玻璃濾器濾過(guò)。淀粉指示液：取可溶性淀粉0.5g，加水5ml攪勻后，緩緩傾人100ml沸水中，隨加隨攪拌，繼續(xù)煮沸2分鐘，放