2014篩查實驗室建設培訓

艾滋病篩查實驗室規(guī)范化建設和質(zhì)量管理,廣州市疾病預防控制中心艾滋病防制科Tel：36545132,艾滋病檢測實驗室工作依據(jù),全國艾滋病檢測技術規(guī)范 2009年修訂版全國艾滋病檢測工作管理辦法 2006年頒布,開展艾滋病檢測工作的實驗室要經(jīng)過技術和條件驗收，未經(jīng)驗收或驗收不合格的實驗室不得開展艾滋病檢測工作。 -全國艾滋病檢測工作管理辦法,2010年廣州市衛(wèi)生局出臺文件，要求二級及以上醫(yī)療機構必須建立艾滋病篩查實驗室。孕產(chǎn)婦HIV抗體免費篩查醫(yī)療機構必須建立艾滋病篩查實驗室或檢測點。轄區(qū)病例超過一定數(shù)量的社區(qū)或鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院必須建立艾滋病篩查實驗室或檢測點。,艾滋病檢測篩查實驗室類別及管理,篩查實驗室,檢測點,醫(yī)療、采供血機構等,12個區(qū)疾控中心,篩查中心實驗室,實驗室建設兩個基本條件,條件一： 人員要求、建筑要求、儀器設備要求條件二： 質(zhì)量管理體系構建,艾滋病篩查實驗室的基本條件一,1人員條件 至少由3名醫(yī)技人員組成，具有中級衛(wèi)生技術職稱人員至少1名。負責篩查試驗的技術人員需具有2年以上從事病毒性疾病血清學檢測工作經(jīng)驗，接受過省級或省級以上艾滋病檢測技術培訓，并獲得培訓證書。2建筑條件 實驗區(qū)域和辦公區(qū)域分置，實驗室或檢測區(qū)域應分為清潔區(qū)，半污染區(qū)和污染區(qū)，應符合二級生物安全實驗室（BSL-2）要求。3儀器設備條件 配備艾滋病抗體篩查試驗所需設備，至少包括酶標讀數(shù)儀（或發(fā)光檢測儀）、洗板機、加樣器（儀）、普通冰箱、低溫冰箱、離心機、溫箱或水浴箱、消毒與污物處理設備、實驗室恒溫設備、安全防護用品和生物安全柜。,生物安全柜,實驗污染區(qū),半污染區(qū),清潔區(qū),公共走廊,應急門,實驗室分區(qū)布局圖,緊急撤離路線,緊急撤離路線,清潔實驗物品柜,水槽,污染白大衣掛放處,細菌室,生化實驗區(qū)域,免疫實驗區(qū)域,生物安全柜的選擇：內(nèi)循環(huán)類型（單人、雙人） 不需要安裝排風管。30%外排類型（單人、雙人） 需要安裝排風管。,1. 人員條件 至少由2名經(jīng)過艾滋病檢測技術培訓并獲得培訓證書的專業(yè)人員組成。2. 建筑條件 實驗區(qū)域和辦公區(qū)域分置，需有艾滋病檢測區(qū)域或?qū)Ｓ脤嶒炁_，能開展簡便、快速檢測。3. 設備條件 需配備快速試驗所必須的物品，包括普通冰箱、消毒與污物處理設備、一次性消耗品、安全防護用品。,艾滋病檢測點的基本條件一,生化實驗區(qū)域,實驗操作區(qū),免疫實驗區(qū)域,細菌室,檢測點實驗室布局,門,應急門,人員進出,物品進出,要求:1、實驗區(qū)域與辦公區(qū)域分開2、實驗室內(nèi)部環(huán)境要求：實驗室清晰劃分生化、臨檢、細菌操作區(qū)；實驗儀器擺放位置合理、安全；保持實驗室環(huán)境整潔，避免雜物隨處堆放；不可放置生活物品，如水杯、茶葉、飲用水等等。,艾滋病篩查實驗室、檢測點的基本條件二,質(zhì)量體系構建：,綱領性文件,指導性文件,實施性文件,實驗室質(zhì)量體系文件應覆蓋檢測前、檢測、檢測后整個過程， 包括質(zhì)量手冊、程序文件、標準操作規(guī)程（SOP）和記錄。,全國艾滋病檢測技術規(guī)范,第一章 樣品的采集和處理 第二章 HIV抗體檢測 第三章 HIV核酸定性檢測 第四章 HIV RNA定量測定（病毒載量測定） 第五章 CD4+和CD8+T淋巴細胞檢測 第六章 HIV抗原檢測 第七章 艾滋病實驗室安全防護和職業(yè)暴露預防 第八章 艾滋病實驗室質(zhì)量管理 第九章 艾滋病實驗室質(zhì)量考評辦法 第十章 HIV診斷試劑臨床質(zhì)量評估方案,質(zhì)量體系文件內(nèi)容,主要工作制度；主要技術規(guī)范（流程）；實驗儀器和實驗方法SOP文件；主要記錄表格；需上墻的規(guī)范。,主要工作制度,初篩實驗室工作制度1.實驗室人員要嚴格遵守實驗室的各項規(guī)章制度，認真執(zhí)行操作規(guī)程。2. HIV抗體檢測實驗室分清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)，三區(qū)的器械、物品不可交叉擺放。3. 實驗室內(nèi)不準吸煙、進食、喧嘩。4. 實驗室內(nèi)應保持清潔、整齊，各種器材、儀器需定位陳設，貴重儀器需專人保管。試劑和標本要分類存放，試劑標簽要清晰。5. 嚴格遵守毒品、菌毒種、易燃易爆物品的保管和安全使用制度。6. 實驗室、無菌室、工作臺要隨時或定期消毒，凡沾有毒的器材應浸泡消毒或高壓消毒方能洗滌或丟棄，使用過的器材、工作服要及時消毒和清潔，污物要及時處理。帶傳染性的物品不得隨意帶出實驗室。7. 進入實驗室必須穿工作服或隔離衣，做好個人防護，離開實驗室要脫去工作服或隔離衣，防止污染環(huán)境。 8. 實驗室要做好原始記錄，保管好與實驗有關的各種數(shù)據(jù)、資料。9. 嚴格按儀器操作作業(yè)指導書使用儀器，貴重儀器設使用登記本，實驗人員每次使用時要做好登記，儀器需定期維護，并作記錄。10. 檢驗人員需要在實驗室加班，應經(jīng)科室負責人批準。11. 各類實驗室必須設明顯的標記，非工作人員未經(jīng)許可不得隨意進入實驗室。12.實驗室必須配備滅火器、滅火箱等消防工具，滅火器應經(jīng)常檢查，任何人不得擅自挪動位置，不得挪作他用。下半時注意關好水、電、門窗等。,主要工作制度,安全工作制度（“規(guī)范”第七章） 樣品、試劑管理制度（“規(guī)范”第一章） 事故處理制度（“規(guī)范”第七章）,主要工作制度,保密制度 1. 科室人員、新上崗人員、進修人員、實習人員在上崗前必須接受艾滋病防治工作保密內(nèi)容的培訓。2. 沒有本科室相關工作人員在場時，任何人不得進入有保密信息的工作場所。3. 外單位人員進入檢驗室工作區(qū)須經(jīng)科長同意，并有人陪同。有外單位人員在場時，本科室員工不得談論涉及病人信息的內(nèi)容，不得翻閱病人信息資料。4. 咨詢、流調(diào)、隨訪工作正在進行時，無關人員不得隨意進出工作場所。5. 艾滋病檢測確證實驗室出具的艾滋病病毒抗體確證報告應以保密方式發(fā)送，不得以書信、電郵、傳真等方式發(fā)送。艾滋病病毒抗體確證試驗結果應當告知本人；本人為無行為能力人或者限制行為能力人的，應當告知其監(jiān)護人。不可對無關人員透露檢測結果。6. 不可有意或無意向外透露病人相關信息。7.艾滋病相關材料，包括檢測、流調(diào)、隨訪、治療等資料須定期分類歸檔，設專人妥善保存，保存期不少于十年。材料不得隨意擺放，不得隨意借出，不得擅自修改和銷毀。作廢材料須用碎紙機粉碎后方可丟棄。8. 單位之間人工傳送病人資料，包裝材料須密封。9.電腦內(nèi)相關檢測、流調(diào)、隨訪、治療等資料必須加密，專用電腦由專人保管，不得隨意拷貝電腦資料，不得隨意將電腦資料以電子郵件形式發(fā)送。10. 本科室人員發(fā)表的論文、學術報告不得含有泄露病人信息的內(nèi)容。11. 保密工作執(zhí)行情況納入人員年度考核，一旦發(fā)生泄密事件，論情節(jié)嚴重性追究有關人員責任。,主要工作制度,儀器使用維護和校準制度1. 儀器設備管理1.1 每臺儀器設備設專人管理，保管人員需對所轄設備性能狀況清楚了解，對所轄儀器設備的相關資料、零部件等妥善保管，對儀器設備定期運行狀況及使用情況進行定期檢查，對陳舊設備報廢。1.2 檢測人員借閱資料需登記。1.3 外科室人員或外單位人員借閱資料或借用儀器設備需征求保管人員同意，且作登記。2. 儀器設備使用2.1 操作人員在使用前需熟悉儀器的操作規(guī)程，大型儀器設備操作人員需取得儀器使用授權書后方可上機操作。2.2 操作人員嚴格按照儀器設備說明書及作業(yè)指導書進行操作。2.3 儀器一旦出現(xiàn)故障，應立即停止使用，同時報告保管人或科室負責人，檢查原因，或請廠家前來修理，做好儀器使用情況、故障情況及維修情況登記。2.4 儀器使用完畢后，操作人員須作好儀器使用登記。3. 儀器設備維護3.1 保管人員或檢測人員需按照儀器設備說明或作業(yè)指導書對儀器設備定期進行維護保養(yǎng)。3.2 對維護操作作登記。4. 儀器設備校準4.1 酶標儀、天平、定量移液器、生物安全柜、全自動蛋白免疫印跡儀等設備每年需定期校準，由后勤管理科負責請計量局專業(yè)人員進行校準；長期不使用時，儀器保管人要定期開機檢查儀器運轉(zhuǎn)是否正常。4.2 常用儀器設備在兩次檢定/校準周期之間進行期間核查，方法采用同等精度的計量儀器設備進行比對。,主要工作制度,檢測數(shù)據(jù)的記錄和保存制度1. 數(shù)據(jù)記錄和保存操作1.1科室設計相關記錄格式，包括手寫版和電子版。1.2 艾滋病咨詢門診負責檢測標本的采集接收，將標本資料錄入手寫版和電子版表格。1.3 艾滋病咨詢門診將電子版表格通過局域網(wǎng)傳輸?shù)綄嶒炇摇?.4實驗人員按照表格內(nèi)需要檢測的項目，對標本進行檢測，同時做原始記錄，完成實驗后將檢測數(shù)據(jù)填入表格內(nèi)，保存數(shù)據(jù)和打印報告。1.5 實驗室人員用移動硬盤每月對電子版檢測數(shù)據(jù)進行備份拷貝，年終將整年數(shù)據(jù)刻錄到光盤內(nèi)保存。手寫版表格和檢測原始記錄分類歸檔保存。 2.記錄的保存要求 2.1 所有記錄應按分類編目保存，便于存取和檢索。2.2 記錄在適宜的環(huán)境中妥善保管，防潮、防火、防蟲蛀鼠咬，防止損壞、變質(zhì)和丟失。電子媒體記錄的存儲取用應適應電子媒體存儲取用的特點。對損壞或變質(zhì)的記錄、檔案資料應及時修復或復制。設專人負責妥善保存檢測記錄，不得擅自修改和銷毀。記錄保存期不少于十年。2.3 受理記錄和檢驗結果報告書由質(zhì)量控制科保存。檢驗過程的記錄（檢驗的原始記錄）由科室保存。3.記錄的安全保密3.1 所有記錄應予安全保護和保密，設專人保管，不允許隨意查借閱。3.2 檢測數(shù)據(jù)存儲電腦設專人保管，數(shù)據(jù)表格加密，不得隨意拷貝、刪除，防止原始數(shù)據(jù)的丟失和未經(jīng)授權的侵入或修改。3.3 本中心內(nèi)部人員查閱有關記錄(檔案)須經(jīng)科室負責人同意。3.4 外部人員查閱記錄，須經(jīng)中心領導同意。3.5 所有記錄只可就地查閱，不予外借。,主要工作制度,疫情報告制度（提綱） 疫情報告責任科室、責任人 疫情報告流程 人員承擔的責任,主要技術規(guī)范（流程）,檢測及結果報告操作程序1. 篩查試驗報告：對呈陰性反應的樣品，出具“HIV抗體陰性”報告；對呈陽性反應者出具“HIV抗體待復查”報告或不出具報告，須進行復檢。2. 復檢試驗報告： 篩查中心實驗室或確證實驗室對初篩呈陽性反應的上送樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復檢測。如兩種試劑復測均呈陰性反應，則報告“HIV抗體陰性”；如均呈陽性反應，或一陰一陽，不出具報告，做進一步確證。3. 檢測結果的解釋3.1 篩查陰性結果：核實最后一次高危行為已過三個月的“窗口期”，可以認為沒有感染HIV；如果沒有渡過三個月的“窗口期”，不能排除HIV感染的可能，應在“窗口期”過后再進行復查。 3.2 篩查陽性結果：篩查陽性結果不能判定對方已被HIV感染，解釋為可能是 感染HIV引起的陽性反應； 生物假陽性，體內(nèi)存在與HIV蛋白產(chǎn)生交叉反應的其它蛋白引起； 技術假陽性，由于試劑質(zhì)量或人為操作不當引起。標本須進一步做確證試驗方能下最終判斷。 3.3 確證陰性結果：核實最后一次高危行為已過三個月的“窗口期”，可以認為沒有感染HIV；如果沒有渡過三個月的“窗口期”，不能排除HIV感染的可能，應在“窗口期”過后再進行復查。 3.4 確證不確定結果：不能判定對方是否被HIV感染，解釋為可能是 HIV早期或晚期感染； 非特異性反應，是由各人體質(zhì)差異或試劑制作技術等引起。結合流行病學史對其進行評估，并建議其每3個月隨訪復檢1次，連續(xù)2次，共6個月。如果檢測時暴露時間已超過3個月，則在3個月后隨訪1次即可。3.5 確證陽性結果：表示已感染HIV，具有傳染性。結果告知同時，必須詢問受檢者是否有過高危行為。對于小于18M的嬰兒，抗體可能來自于母親，建議其十八個月后再進行檢測。,主要技術規(guī)范（流程）,質(zhì)量管理操作程序（“規(guī)范”第八章）1. 常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控1.1 實驗前質(zhì)量控制1.1.1采集標本前病人的準備。1.1.2正確的標本采集方法。1.1.3準確及時的運送標本。1.1.4實驗前，按照不同檢測項目正確地處理和保存標本。2.實驗中質(zhì)量控制2.1應用酶聯(lián)方法進行抗體實驗時，在每次實驗時應設置一個單一濃度水平的質(zhì)控品即弱陽性對照，每次實驗均加入1孔質(zhì)控品。2.2 根據(jù)質(zhì)控品OD值，作Levey-Jennings 質(zhì)控圖質(zhì)控或做“即刻法”質(zhì)控。2. 3 操作者在測定質(zhì)控品時，發(fā)現(xiàn)質(zhì)控品數(shù)據(jù)違背了控制規(guī)則，應填寫失控報告單，上交室負責人，分析失控原因，由室負責人決定是否要發(fā)出檢驗報告。2.4 每月(月末)定期召開質(zhì)量控制會，討論本月檢測的質(zhì)量控制情況。3.實驗后質(zhì)量控制3.1 實驗后準確填寫檢驗結果。3.2.及時發(fā)出報告。3.3正確地解釋檢驗結果的臨床意義,主要技術規(guī)范（流程）,實驗室安全標準操作程序(“規(guī)范”第七章31頁) 樣品采集、處理和上送操作程序 （“規(guī)范”第一、二章）廢棄物處理和消毒操作程序（“規(guī)范”第七章33頁）職業(yè)暴露處理流程（“規(guī)范”第七章34頁）,實驗儀器和實驗方法SOP文件,酶標讀數(shù)儀操作細則發(fā)光檢測儀操作細則生物安全柜操作細則 高壓滅菌器操作細則 酶聯(lián)方法檢測細則 快速方法檢測細則,儀器操作說明書試劑盒說明書,主要記錄表格,ELISA質(zhì)量控制圖表抗-HIV檢測登記表初篩試驗原始記錄 實驗差錯登記表 酶標儀使用和維護記錄 生物安全柜使用和維護記錄 高壓滅菌器使用和維護記錄 事故登記表環(huán)境溫濕度登記表 冰溫箱登記表人員健康監(jiān)護記錄職業(yè)暴露個案登記表廢棄物登記表,“已統(tǒng)一制定”,需上墻的規(guī)范,篩查實驗室工作制度安全工作守則或制度 初篩試驗流程圖 （“規(guī)范”第二章）職業(yè)暴露處理流程圖（“規(guī)范”第七章）,操作程序文件（SOP 編寫格式）,封面（1）標題（2）編寫、審核、批準人及相應日期（3）修改內(nèi)容、修改日期、修改批準人正文（1）標題和編號（2）目的、應用范圍和方法或程序（3）支持性文件（4）相應記錄（5）附錄，包括相關的附加文件如記錄表格、設備和試劑盒說明書 等。,SOP,SOP,SOP,SOP,作 業(yè) 指 導 書 目 錄 編號 標題GZCDC/WDAD01 艾滋病病毒抗體酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測細則GZCDC/WDAD02 艾滋病病毒抗體明膠凝集法（PA）檢測細則GZCDC/WDAD03 梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測細則GZCDC/WDAD04 艾滋病類樣品的管理制度GZCDC/WDAD05 DENLEY-DRAGON (MK-2)全自動酶標儀操作規(guī)程GZCDC/WDAD06 艾滋病類樣品采集、收檢程序GZCDC/WDAD07 科室安全防護和內(nèi)務管理程序GZCDC/WDAD08 艾滋病實驗室生物安全防護GZCDC/WDAD09 HIV職業(yè)暴露后預防GZCDC/WDAD10 艾滋病病毒抗體酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測細則 （國產(chǎn)）GZCDC/WDAD11 艾滋病病毒1+2型抗體免疫印跡試驗(HIV1+2 Western Blot)GZCDC/WDAD12 Forma class B2生物安全柜操作規(guī)程,廣州市疾病預防控制中心（廣州市衛(wèi)生檢驗中心）作業(yè)指導書 標題：艾滋病病毒操作危害風險評估,修改記錄,廣州市疾病預防控制中心作業(yè)指導書 文件編號：GZCDC/WDAD29標題：艾滋病病毒操作危害風險評估 版號：第 1 頁 共 2 頁1.目的明確艾滋病病毒操作危害風險，避免發(fā)生生物安全事故。2.使用范圍本操作規(guī)程適用于本實驗室危害風險評估及事故處理。3.職責操作人員：按照相關危害風險評估及事故處理進行正確實驗操作。質(zhì)量監(jiān)督員：負責監(jiān)督實驗是否按危害風險評估及事故處理原則進行?？剖邑撠熑耍贺撠熅C合管理。4.危害風險評估按照實驗室生物安全通用要求（GB 194892004），艾滋病病毒屬于危害等級病原微生物，艾滋病病毒主要通過血液傳播、性接觸傳播、母嬰傳播三種途徑傳播，一般不通過氣溶膠傳播。根據(jù)標本中艾滋病病毒含量和操作危險性評估本實驗室危害風險。4.1 艾滋病血清學檢測：艾滋病病毒含量較低、操作危險性較低，在BSL2級實驗室內(nèi)，在普通操作臺或生物安全柜內(nèi)操作，實驗人員做好個人防護。4.2 HIV感染者淋巴細胞分離：艾滋病病毒含量較高、操作危險性較高，在BSL2級實驗室內(nèi)，在生物安全柜內(nèi)操作，實驗人員做好個人防護。4.3 HIV感染者CD4T淋巴細胞檢測：艾滋病病毒含量較高、操作危險性較高，在BSL2級實驗室內(nèi)，標本前處理部分須在生物安全柜內(nèi)操作，實驗人員做好個人防護。4.4 艾滋病病毒核酸提?。喊滩〔《竞枯^高、操作危險性較高，在BSL2級實驗室內(nèi)，標本前處理部分須在生物安全柜內(nèi)操作，實驗人員做好個人防護。4.5 艾滋病病毒分離：艾滋病病毒含量較高、操作危險性較高，在BSL3級實驗室操作，實驗人員做好個人防護。4.6 根據(jù)危害風險評估制定相應實驗的操作規(guī)程。4.7 實驗人員嚴格按相應操作規(guī)程進行操作。4.8 制定緊急事故處理辦法。,廣州市疾病預防控制中心作業(yè)指導書 文件編號：GZCDC/WDAD29標題：艾滋病病毒操作危害風險評估 版號：第 2 頁 共 2 頁5.事故處理51 建立標本種丟失、破壞或?qū)嶒炇遗及l(fā)事故應急處理辦法，制定相應記錄。52 實驗室內(nèi)備有75%酒精、高效氯等消毒劑。53 制定事故登記表及事故上報程序。6.支持性文件6.1 科室安全防護和內(nèi)務管理程序 （文件編號：GZCDC/WDAD07）6.2 中華人民共和國傳染病防治法實施辦法6.3 實驗室生物安全通用要求（GB 194892004）6.4 全國艾滋病檢測技術規(guī)范7.附錄71 艾滋病防制科生物危害評估表,GZCDC/WDAD29-01,篩查實驗室驗收程序,申報單位填寫艾滋病檢測篩查實驗室技術與條件驗收申請表,申報單位將區(qū)、縣級市衛(wèi)生行政部門已蓋章的艾滋病檢測篩查實驗室技術與條件驗收申請表報廣州市疾病預防控制中心,申報單位將艾滋病檢測篩查實驗室技術與條件驗收申請表報所在區(qū)、縣級市衛(wèi)生行政部門初審，蓋章。,現(xiàn)場驗收，加具意見。,上報市衛(wèi)生行政部門審核,市衛(wèi)生行政部門審核通過后下發(fā)批準文件,報所在區(qū)、縣級市疾病預防控制中心,現(xiàn)場初評，加具意見。,艾滋病實驗室質(zhì)量管理,設備校準與維護,必須經(jīng)國家法定部門定期（每年至少1次）校準的儀器至少包括：酶標儀/洗板機，加樣器，溫度計，高壓滅菌器 。加樣器、溫濕度計須經(jīng)計量部門校準。其他儀器，如生物安全柜，離心機等也必須定期（每年1次）校準，可請生產(chǎn)廠家校準。酶標儀與洗板機定期維護、清洗。,主要記錄表格,抗-HIV檢測登記表：包括受檢者姓名或編號、性別、年齡、職業(yè)、送檢單位、人群類別、感染途徑、地址和戶口、收樣日期、收樣人、檢驗結果、備注等。 ELISA質(zhì)量控制圖表 初篩試驗原始記錄：包括檢測項目、標本性質(zhì)和狀態(tài)、測定方法、試劑盒廠家、批號、效期、環(huán)境條件等，標明空白對照、陽性對照、陰性對照、外部對照以及待檢樣品的位置，操作人員和復核人員姓名及檢測日期。 實驗差錯登記表 酶標儀使用和維護記錄 生物安全柜使用和維護記錄 高壓滅菌器使用和維護記錄 事故登記表環(huán)境溫濕度登記表 冰溫箱登記表人員健康監(jiān)護記錄職業(yè)暴露個案登記表廢棄物登記表,1.實驗原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、檢測記錄表、標本登記、標本保存記錄以及儀器設備維修和校準記錄等存檔保存一般應為10年期限。最好同時使用計算機保存各種文件和記錄。內(nèi)含病人姓名的所有工作記錄一定要保密。 2. 存檔的資料不應隨便堆放，應按一定方式編號，便于查詢。 3. 資料的存檔制度、查詢制度、借閱制度、保密制度應健全。 4. 資料是實驗室的公有財產(chǎn)，不可以任意將資料帶走、借走、丟失、不歸還或更改。 5. 實驗室應有人專職或兼職任資料保管員，以便查詢。,存檔,質(zhì)量控制（QC ）,定義 質(zhì)量控制是指為確保實驗工作正常進行而在每一次實驗過程中必須采取的各種措施。,實驗前質(zhì)量控制 采集標本前病人的準備；正確的標本采集方法；準確及時的運送標本；實驗前正確地處理和保存標本。實驗中質(zhì)量控制 質(zhì)控品的準備；試劑盒的評價；開展Levey-Jennings 質(zhì)控圖質(zhì)控（或“即刻法”質(zhì)控）。實驗后質(zhì)量控制 實驗后準確填寫檢驗結果；及時發(fā)出報告；正確地解釋檢驗結果的臨床意義。,試劑盒內(nèi)部對照 試劑盒內(nèi)部對照質(zhì)控品即為試劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對照血清。試劑盒內(nèi)部對照用于判斷每次實驗的有效性，但不能作為室內(nèi)質(zhì)控品使用。每一次檢測臨床樣品時，必須有試劑盒內(nèi)部對照，而且只能在同批號的試劑盒中使用。內(nèi)部對照結果無效，必須重新試驗。,室內(nèi)質(zhì)控品,為非試劑盒組份的外部質(zhì)控品，是為了監(jiān)控檢測的重復性而設置的，包括強陽性、弱陽性和陰性質(zhì)控血清。也可以只設置一個弱陽性質(zhì)控，以該試劑盒臨界值（Cut-off）的23倍為宜。外部質(zhì)控品的作用是，判斷該批臨床樣品檢測的有效性，因此，每次實驗必須包含室內(nèi)質(zhì)控品，其結果無效，必須重新試驗。,室內(nèi)質(zhì)控品的來源和選擇,1）通過向有關機構購買獲得2）通過實驗室制備獲得 ( 比較經(jīng)濟的方法 ) 混合試劑盒內(nèi)部對照血清，等量分裝。 混合HIV 抗體陽性或陰性人血清，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，用0.2m 生物濾膜過濾除菌后再進行56 30分鐘加熱滅活處理。弱陽性對照可以通過使用HIV抗體陰性的正常人血清梯度稀釋HIV抗體強陽性血清并經(jīng)標定后得到。,室內(nèi)質(zhì)控品的保存,1）外部對照血清或血漿的一次制備量應該足夠本實驗室 一年使用。2）外部對照血清應該均一、無菌。3）外部對照血清標定后應該等量分裝，每個分裝的量應 足夠一周使用。4）外部對照應該分類作好標記，使用不同顏色的標簽。5）外部對照血清應該存放在70 ，如無條件則存放 在非自動除霜的20 冰箱。6）外部對照血清一旦融解以后應該存放在 28 ，一 周后必須棄去，不能重新凍存。,室內(nèi)質(zhì)控品的使用,原則上每一次實驗必須使用外部對照質(zhì)控血清，建立質(zhì)控圖，以便監(jiān)控實驗操作的一致性和結果的準確性。同時可以了解各批試劑盒之間的誤差(批間差異)。,建立質(zhì)控圖參數(shù)（ELISA）,對HIV抗體檢測(ELISA)外部對照質(zhì)控血清的評價采用多次測定的OD值的均值上下各兩個標準差的范圍，即外部對照OD值的95可信限為 x 2s。各個外部對照的標定即確定外部對照的均值和可信限，可用幾個統(tǒng)計學參數(shù)如均值( x )、標準差(s)以及變異系數(shù)(cv)來確定可信限。 算術平均值( x )代表一組OD值數(shù)的平均值 標準差(s) 變異系數(shù)(cv),范例：參考鄭懷競主編免疫學檢驗室間質(zhì)評與室內(nèi)質(zhì)控，1997年出版。,x 計算公式為： x x = N s 計算公式為： ( xn - x )2 s = N cv 計算公式為： s cv = x 100 % x,通過上表，計算S/CO值的均值（x），標準差（s）和變異系數(shù)（cv） x =1.72 s =0.29 cv =16.9%根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制室內(nèi)質(zhì)控框架圖, 開始質(zhì)量控制,質(zhì)控圖(Levey-Jennings控制圖),質(zhì)控圖的判定和分析,如果檢驗進入質(zhì)控狀態(tài)時，質(zhì)控對照值超出 2s，則本次實驗結果不能被接受( 失控 )。 位移：如果幾個連續(xù)質(zhì)控對照值 (3-5次) 都落在均值(中心線)的一邊則稱之為位移，通常表示存在大的變化 ( 失控 )。 引起位移的原因有使用新批號的試劑盒、使用新試劑、實驗員的更換、孵育溫度的改變、儀器 ( 移液器 ) 故障等。 趨勢：當幾個連續(xù)質(zhì)控對照值(5-7個)幾乎按一個方向分布時稱之為趨勢(失控)，通常由參數(shù)的緩慢改變引起，如試劑失效和移液器逐漸不準確等。 發(fā)生漂移和趨勢的最常見的原因是試劑(如酶標記物)或?qū)φ盏氖А?質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點,a可以先進行最佳條件下的變異測定。b采用S/CO比值制圖要比單用OD或A值制圖的方法給出更為精確的評估，因為它將每次/