維生素藥物制備多糖講義.ppt

糖類藥物 概述 1819年法國(guó)科學(xué)家布拉孔諾從木屑 亞麻和樹皮中也得到葡萄糖 才認(rèn)識(shí)到組成淀粉和纖維素的基本 單元 都是葡萄糖 得實(shí)驗(yàn)式C6H12O6 1886年 德國(guó)化學(xué)家基利阿尼證明了葡萄糖的碳為直鏈 沒有與完整的水分子相結(jié)合 1812年 俄國(guó)化學(xué)家基爾霍夫在加酸煮沸的淀粉中 得到葡萄糖 隨后 糖的諸多其他生物學(xué)功能也已被逐步揭示和認(rèn)識(shí) 糖蛋白 糖脂是細(xì)胞膜的重要組成部分 它們作為生物信息的攜帶者和傳遞者 20世紀(jì)60年代以來 多糖類藥物在抗凝 降血脂 提高機(jī)體免疫 抗腫瘤和抗輻射方面都具有顯著藥理作用與療效 如從擔(dān)子菌分離得到的PS K多糖和香菇多糖對(duì)小鼠S180瘤株均有明顯的抑制作用 我國(guó)從中藥中也提取了不少多糖物質(zhì) 茯苓多糖 云芝多糖 銀耳多糖 胎盤脂多糖等均在臨床應(yīng)用 并取得了一定的治療效果 概述 分類從化學(xué)結(jié)構(gòu)看 糖是一大類多羥基醛或酮的化合物 依據(jù)其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)分為 多糖 純多糖 右旋糖酐 甘露聚糖 酵母 果聚糖 香菇多糖 茯苓多糖 淀粉等雜多糖 肝素 硫酸軟骨素 透明質(zhì)酸等 單糖 氨基糖 糖酸 糖醇聚糖 低聚糖 蔗糖 麥芽糖 乳糖 棉籽糖等 概述 性質(zhì)單糖 還原性 與苯肼反應(yīng) 在稀酸溶液中穩(wěn)定 在濃堿溶液中很不穩(wěn)定 低聚糖 多糖 相對(duì)分子質(zhì)量很大 分為直鏈和支鏈兩種 多帶有負(fù)電荷 水合度較大 水溶液具有一定的黏度 概述 真菌多糖具有哪些藥理活性作用 提高機(jī)體免疫功能提高骨髓脾臟血液細(xì)胞合成DNARNA蛋白質(zhì)和其它生物活性物質(zhì)的能力提高血紅蛋白的攜氧供氧量提高肝臟解毒的能力抗放射化學(xué)藥害提高機(jī)體清除自由基的能力加速血液循環(huán)提高細(xì)胞內(nèi)酶的活性抗疲勞 2 1水提法用水作溶劑來提取多糖是最常用的方法之一 可以用熱水浸煮提取 也可以用冷水浸提 水提取的多糖多數(shù)是中性多糖 一般植物多糖提取多數(shù)采用熱水浸提法 該法所得多糖提取液可直接或離心除去不溶物 或者利用多糖不溶于高濃度乙醇的性質(zhì) 用高濃度乙醇沉淀提純多糖 但由于不同性質(zhì)或不同相對(duì)分子質(zhì)量的多糖沉淀所需乙醇濃度不同 2 2酸提法有些多糖適合用稀酸提取 并且能得到更高的提取率 將熱水浸提過的阿魏側(cè)耳子實(shí)體殘?jiān)?倍量的3 的三氯乙酸浸提 15 過夜 過濾 離心 將提取液用20 的NaOH中和至pH為7 濃縮 醇析沉淀 丙酮洗滌 真空冷凍干燥得酸提水溶性粗多糖PFA 從對(duì)海蒿子多糖的提取方法研究發(fā)現(xiàn) 2 3堿提法與酸提類似 有些多糖在堿液中有更高的提取率 尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖 采用稀堿提取 多為0 1mol L氫氧化鈉 氫氧化鉀 為防止多糖降解 3多糖的分離和純化3 1分級(jí)沉淀法分步沉淀法是根據(jù)不同多糖在不同濃度低級(jí)醇 酮中具有不同溶解度的性質(zhì) 從小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮進(jìn)行分步沉淀 鹽析法是根據(jù)不同多糖在不同鹽濃度中溶解度不同而將其分離的一種方法 常用的鹽析劑有氯化鈉 氯化鉀 硫酸銨等 以硫酸銨最佳 3 2柱層析法凝膠柱層析法常用的凝膠有葡聚糖凝膠 Sephadex 和瓊脂糖凝膠 Sepharose 以不濃度的鹽溶液和緩沖溶液作為洗脫劑 從而使不同大小的多糖分子得到分離純化 但不適宜粘多糖的分離 一般生藥提取物得以分離多用Sepharose DEAE Toyopearl Sephacryl Sepha2dex精致得到各種多糖 海藻和海帶中的含量較高 在海藻的洗液里含量可達(dá)2 海帶的洗液里約含1 5 是提取甘露醇的好原料 用葡萄糖為原料 經(jīng)電解 脫鹽 精制等制備 電解轉(zhuǎn)化率為98 99 6 甘露醇生產(chǎn)工藝 化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)白色晶形粉末 無臭 略有甜味 不潮解 易溶于水 微溶于低級(jí)醇類和低級(jí)胺類 不溶于有機(jī)溶劑 在無菌溶液中較穩(wěn)定 不易為空氣中的氧所氧化 工藝路線 甘露醇生產(chǎn)工藝 制劑20 甘露醇注射液 稱取結(jié)晶甘露醇 用適量注射用水90 攪拌溶解 加1 活性炭 加熱50分鐘過濾 檢測(cè)pH 4 5 6 5 和含量 合格后 澄清過濾 裝入50ml 100ml 250ml輸液瓶中 甘露醇生產(chǎn)工藝 檢驗(yàn) 1 pH 用電位法 2 含量測(cè)定 碘量法 作用與用途降顱壓 眼壓 肝素 1916年研究凝血時(shí)從肝臟中發(fā)現(xiàn)的 天然抗凝血物質(zhì) 在自然界中 肝素廣泛分布在哺乳動(dòng)物的肝 肺 心 脾 腎 腦腺 腸動(dòng)膜 肌肉和血液里 此外 還具有澄清血漿脂質(zhì) 降低血膽固醇和增強(qiáng)抗癌藥物療效等作用 臨床廣泛用作各種外科手術(shù)前后防治血栓形成和栓塞 輸血時(shí)預(yù)防血液凝固和保存鮮血時(shí)的抗凝作用 小劑量時(shí)用于防治高血脂癥和動(dòng)脈粥樣硬化 肝素生產(chǎn)工藝 1 化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)白色或灰白色粉末 無臭無味 有吸濕性 鈉鹽易溶于水 不溶乙醇 丙酮 二氧六環(huán)等有機(jī)溶劑 是一種含有硫酸基的酸性黏多糖 其分子具有由六糖或八糖重復(fù)單元組成的線狀鏈狀結(jié)構(gòu) 肝素生產(chǎn)工藝 三硫酸雙糖單元 二硫酸雙糖單元 2 酶解 樹脂法 肝素生產(chǎn)工藝 2 工藝過程 酶解取100kg新鮮腸黏膜加苯酚0 2 在攪拌下加入絞碎胰0 5 1 用40 氫氧化鈉液調(diào)節(jié)pH8 5 9 升溫至40 45 保溫2 3h pH8 再加5 粗食鹽升溫至90 用6M鹽酸調(diào)節(jié)pH6 5 保溫20min 以布袋過濾 得酶解濾液 吸附 洗滌 洗脫取濾液冷至50 以下 用6M氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH7 加入5kgD 254強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂 攪拌5h左右 交換完畢 棄去液體 用水 2M和1 2M氯化鈉洗滌 用約樹脂體積一半的5M氯化鈉洗脫 后用約為樹脂體積的1 2的3M氯化鈉洗脫 合并洗脫液 生產(chǎn)工藝 2 工藝過程 沉淀 脫水 干燥濾液加入活性炭和95 乙醇處理 冷處沉淀8 12h 棄去上清液 沉淀中加蒸餾水和4倍量95 乙醇 冷處放置6h 收集沉淀 脫色 沉淀 干燥10 的肝素鈉溶液 以4 高錳酸鉀進(jìn)行氧化脫色 以滑石粉作助濾劑過濾 收集濾液 將濾液調(diào)節(jié)pH6 4 用0 9倍的95 乙醇置于冷處沉淀6h以上 收集沉淀 再用4倍量的95 乙醇 冷處放置6h以上 收集沉淀物 干燥得肝素鈉精品 生產(chǎn)工藝 鹽解 樹脂法 生產(chǎn)工藝 CTAB 十六烷基三甲基溴化胺 提取法 生產(chǎn)工藝 以牛肺為原料的提取法 生產(chǎn)工藝 注解 D 254為聚苯乙烯二乙烯苯三甲胺季銨型強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂 機(jī)械強(qiáng)度和耐磨性能差 易破碎 細(xì)碎粒易漂浮而流失 解決辦法采用負(fù)壓吸氣氣泡翻滾攪拌法 利用減壓和虹吸將液體吸入或排出反應(yīng)罐 肝素是聚陰離子 He 肝素 蛋白質(zhì)用He Pr 表示 為可溶性 酸性蛋白質(zhì) pI以6計(jì) 如果pH選擇8 5 9 Pr 濃度比Pr 濃度大很多 則酸性蛋白與肝素的復(fù)合物完全可離解 若堿性蛋白質(zhì) pI為10 選擇pH8 5 9不能促進(jìn)蛋白與肝素復(fù)合物的離解 生產(chǎn)工藝 注解 洗脫肝素要控制鹽的陽離子 其反應(yīng) 氯化鈉的濃度越大 R Cl 的濃度越小 有利于He Na 的生成 宜用動(dòng)態(tài)洗脫 因R He 結(jié)合較牢 交換需要相當(dāng)高的鹽濃度 氯化鈉常用2M 3M 能使He 近100 地洗脫下來 生產(chǎn)工藝 注解 氧化作用能除去熱原 脫色 配合調(diào)pH和加熱 除去雜質(zhì) 提高肝素的效價(jià) 有機(jī)雜質(zhì)少時(shí) 氧化時(shí)間短 否則反之 由于高錳酸鉀氧化作用較強(qiáng) 破壞肝素和增加K 的含量 故改用加入總量4 的過氧化氫 分兩次加 好于單用高錳酸鉀 不增加水溶液的新成分 1977年國(guó)內(nèi)研究成功的過氧化氫 高錳酸鉀組合氧化工藝 克服了單用高錳酸鉀氧化破壞肝素的缺點(diǎn) 具體操作是先用低濃度的過氧化氫 在堿性介質(zhì)中室溫進(jìn)行氧化 由于條件溫和 可長(zhǎng)時(shí)間放置 思考題 簡(jiǎn)述甘露醇的生產(chǎn)工藝 試討論肝素各生產(chǎn)工藝的異同點(diǎn) 脂類藥物 概述 膽固醇生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)介 脂類簡(jiǎn)介 脂類 lipids 是脂肪 類脂及其衍生物的總稱 其主要特點(diǎn)是不溶于或微溶于有機(jī)溶劑 因?yàn)樗鼈儏⑴c了生物膜的組成 單純脂脂類復(fù)合脂衍生脂其中具有特定生理作用 藥理效應(yīng)的脂類物質(zhì)統(tǒng)稱為脂類藥物 三酰甘油 蠟 磷脂 糖脂 固醇 萜 脂肪 油 甘油 脂肪酸 室溫固態(tài) 甘油 脂肪酸 室溫液態(tài) 高級(jí)醇 高級(jí)脂肪酸 三酰甘油的含磷衍生物 三酰甘油的含糖衍生物 不含脂肪酸的脂類 脂類藥物的分類及應(yīng)用 不飽和脂肪酸類包括前列腺素 亞油酸 亞麻酸 花生四烯酸及二十碳五烯酸等 前列腺素是多種同類化合物的統(tǒng)稱 生理作用極為廣泛 其中前列腺素E1和E2 PGE1和PEG2 等應(yīng)用較多 有收縮平滑肌作用 臨床上用于催產(chǎn) 早中期引產(chǎn) 抗早孕及抗男性不育癥 脂類藥物的分類及應(yīng)用 磷脂類主要包括卵磷脂和腦磷脂 它們是生物膜的主要組分 醫(yī)學(xué)上具有增強(qiáng)神經(jīng)組織及調(diào)節(jié)高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)的作用 又是血漿脂肪良好的乳化劑 有促進(jìn)膽固醇及脂肪運(yùn)輸?shù)淖饔?臨床上主要用于治療神經(jīng)衰弱及防治動(dòng)脈粥樣硬化 脂類藥物的分類及應(yīng)用 膽酸類膽酸類化合物是人及動(dòng)物肝臟產(chǎn)生的甾體類化合物 集中于膽囊 排入腸道對(duì)腸道脂肪起乳化作用 促進(jìn)脂肪消化吸收 同時(shí)促進(jìn)腸道正常菌群的繁殖 抑制致病菌生長(zhǎng) 保持腸道的正常功能 不同的膽酸衍生物具有不同的藥理效應(yīng)及臨床應(yīng)用 膽酸鈉 用于治療膽囊炎 膽汁缺乏癥及消化不良等 鵝去氧膽酸和熊去氧膽酸 具有溶石作用 治療膽石癥 還可用于治療高血壓 急性及慢性肝炎 肝硬化及肝中毒等 去氫膽酸 有較強(qiáng)的利膽作用 用于治療膽道炎 膽囊炎及膽結(jié)石 并可加速膽囊造影劑的排泄 脂類藥物的分類及應(yīng)用 膽固醇類該類藥物包括膽固醇 麥角固醇和 谷固醇等 也是甾體類化合物 膽固醇是人工牛黃的原料 是有機(jī)體不可缺少的成分 也是機(jī)體多種甾體激素及膽酸的合成前體 麥角固醇是機(jī)體合成維生素D2的原料 脂類藥物的分類及應(yīng)用 色素類包括膽紅素 膽綠素 血紅素 原卟啉 血卟啉及其衍生物等 膽紅素是抗氧化劑 有清除氧自由基的功能 可用于消炎 也是人工牛黃的重要成分 膽綠素的功效尚不清楚 但膽南星 膽黃素等消炎類中成藥都有該成分 原卟啉可促進(jìn)細(xì)胞呼吸 改善肝臟代謝功能 臨床上用于治療肝炎 血卟啉及其衍生物為光敏化劑 可在癌細(xì)胞中潴留 為激光治療癌癥的輔助劑 臨床上用于治療多種癌癥 脂類藥物的制備 直接提取法1 預(yù)處理和提取對(duì)于有利存在于生物組織中的脂類藥物可以直接破碎組織 采用相應(yīng)的溶劑進(jìn)行浸提 獲得粗品 對(duì)于結(jié)合態(tài)的脂類藥物 提取前需經(jīng)水解或其他方式進(jìn)行前處理 然后才能進(jìn)行浸提 或者先提取再水解 脂類藥物的制備 分離脂類藥物種類很多 性質(zhì)各異 其分離方法通常使用溶解法及吸附法 溶解法應(yīng)用脂類藥物在不同的溶劑中溶解度的差異進(jìn)行分離 如 卵磷脂溶于乙醇 但不溶于丙酮 吸附法是根據(jù)吸附劑對(duì)不同的脂類藥物吸附力不同進(jìn)行分離 如 膽汁中提取的鵝去氧膽酸粗品可以用硅膠柱層析及乙醇 氯仿梯度洗脫與其它雜質(zhì)分離 精制分離的脂類藥物中常常還含有微量雜質(zhì) 可以用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行精制 脂類藥物的制備 細(xì)胞培養(yǎng) 生物轉(zhuǎn)化來源于生物體的多種脂類藥物可以采用微生物發(fā)酵 動(dòng)植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng) 細(xì)胞工程 以及酶工程等生物轉(zhuǎn)化的方法生產(chǎn) 應(yīng)用微生物發(fā)酵法或煙草細(xì)胞培養(yǎng)法生產(chǎn)CoQ10 以花生四烯酸為原料 用類脂氧化酶 2和前列腺素合成酶 通過酶轉(zhuǎn)化合成前列腺素 概述 脂類物質(zhì)是廣泛存在于生物體中的脂肪及類似脂肪的 能夠被有機(jī)溶劑提取出來的化合物 能夠溶解在乙醚 氯仿 苯等有機(jī)溶劑 不溶解于水 一 簡(jiǎn)介 色素類 膽酸類 磷脂類 固醇類 分類依據(jù)脂類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)分為 脂肪類 亞油酸 亞麻酸 花生四烯酸等固醇及類固醇 膽固醇 谷固醇 膽酸和膽汁酸等磷脂類 卵磷脂 腦磷脂 斗磷脂等糖苷脂類 神經(jīng)節(jié)苷脂萜式脂類 主要有鯊烯其他 膽紅素 輔酶Ql0 人工牛黃 人工熊膽等 概述 膽固醇 Cholesterol 膽固醇是高等動(dòng)物體中的主要甾醇 為細(xì)胞膜脂質(zhì)中的一種成分 主要在肝中合成 動(dòng)物組織中膽固醇含量以腦組織為最多 在肝 骨 胰 脾和膽汁中較多 心臟次之 膽固醇生產(chǎn)工藝 化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)C27H46O膽固 5 烯 3 醇 微溶于水 能溶于醇 醚 氯仿或丙酮中 熔點(diǎn)148 5 膽固醇生產(chǎn)工藝 工藝路線 膽固醇生產(chǎn)工藝 工藝過程 原料處理取新鮮動(dòng)物腦及脊髓 除去脂肪和脊髓膜 絞碎 于40一50 烘干制成干腦粉 收率20 左右 水份低于8 提取 濃縮 溶解 結(jié)晶取干腦粉100kg加冷丙酮120L 提取4 5h 反復(fù)提取6次過濾 提取液蒸餾回收丙酮 直至出現(xiàn)大量黃色固體物為止 將此物中加入10倍量95 乙醇 加熱回流1h使之溶解 過濾 濾液在0 5 冷卻 膽固醇生產(chǎn)工藝 工藝過程 酸水解 結(jié)晶 脫色 重結(jié)晶 干燥取粗品加5倍量體積的95 乙醇及5 一6 的硫酸 加熱回流水解8h 再冷卻0 5 結(jié)晶 過濾 濾出結(jié)晶用95 乙醇洗至中性 再將膽固醇結(jié)晶加10倍量體積的95 乙醇和3 的活性炭 加熱溶解回流脫色1h 進(jìn)行保溫過濾 濾液0 5 冷卻結(jié)晶 反復(fù)3次 過濾 收集結(jié)晶 壓干 揮發(fā)去乙醇后 在70一80 真空干燥器中干燥 即得精制膽固醇 膽固醇生產(chǎn)工藝 注解 經(jīng)酸水解處理 其色澤 熔點(diǎn)不符合規(guī)定時(shí) 可用堿性乙醇 乙醇液中加氫氧化鈉 pH10一11 加熱回流 過濾 濾液放冷結(jié)晶析出 收集結(jié)晶 用30 左右水沖洗至中性 膽固醇 腦磷脂 卵磷脂在不同溶劑中的溶解度 熊去氧膽酸主要成分是3a 7 二羥基 5 膽甾烷 24 酸 為有機(jī)化合物 無臭 味苦 本品在乙醇中易溶 在氯仿中不溶 在冰醋酸中易溶 在氫氧化鈉試液中溶解 醫(yī)學(xué)上用于增加膽汁酸分泌 并使膽汁成分改變 第四節(jié)維生素生產(chǎn)工藝 維生素是一類性質(zhì)各異的低分子有機(jī)化合物 是維持人體正常生理生化功能不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 一 維生素的分類 維生素可分為脂溶性維生素和水溶性維生素兩大類 維生素的生產(chǎn)方法 生產(chǎn)維生素的方法有三種 提取法 化學(xué)合成法 生物合成法 提取法是從富含維生素的天然食物或藥用植物中濃縮 提取而得 目前只有極少數(shù)得維生素采用提取法 如維生素A原 維生素E等 微生物發(fā)酵法和微藻類的生物轉(zhuǎn)化法 統(tǒng)稱生物合成法 發(fā)展非?？?化學(xué)合成法是目前生產(chǎn)維生素得主要方法 輔酶Q10又名泛醌10 是一種脂溶性醌 其結(jié)構(gòu)類似于維生素K 因其母核六位上的側(cè)鏈 聚異戊烯基的聚合度為10而得名 是一種醌環(huán)類化合物 輔酶Q10分子結(jié)構(gòu) 一 輔酶Q10概述 化學(xué)名2 3 7 11 15 19 23 27 31 35 39 癸甲基 2 6 10 14 18 22 26 30 34 38 四十癸烯基 5 6 二甲氧基 3 甲基 p 苯醌拼音名FUMEIQ10分子量863 36英文名COENZYMEQ10CASNo 303 98 0分子式C59H90O4其受光照易分解 而受溫度 濕度影響則較小 輔酶Q10是一種脂溶性抗氧化劑 是人類生命不可缺少的重要元素之一 能激活人體細(xì)胞和細(xì)胞能量的營(yíng)養(yǎng) 具有提高人體免疫力 增強(qiáng)抗氧化 延緩衰老和增強(qiáng)人體活力等功能 醫(yī)學(xué)上廣泛用于心血管系統(tǒng)疾病 堪稱心腦保健領(lǐng)域最為重大的發(fā)現(xiàn)之一 是體內(nèi)一種自行合成的輔酶 存在于人體的每個(gè)細(xì)胞中 主要作用為驅(qū)動(dòng)人體細(xì)胞產(chǎn)生能量 尤其可強(qiáng)化心臟機(jī)能 緩解缺氧狀態(tài) 因此稱為 心臟活力之源 輔酶Q10的制備方法 輔酶Q10的制備工藝可分為生物提取法 微生物提取法 半化學(xué)合成法 化學(xué)合成法 植物細(xì)胞培養(yǎng)法等 1 化學(xué)合成法1988年Eem和Kanan開發(fā)的全化學(xué)合成生產(chǎn)輔酶Q10工藝是目前唯一成功的全化學(xué)合成技術(shù) 該技術(shù)化學(xué)合成條件苛刻 而且合成線路性不飽和側(cè)鏈存在一定難度 2 半化學(xué)合成法該方法生產(chǎn)輔酶Q10有兩個(gè)重要步驟 一是從煙葉中分離純化一種三倍半萜烯醇 茄尼醇 將茄尼醇延長(zhǎng)成為十聚睽異戊二烯 用它作為輔酶Q10的側(cè)鏈 二是人工合成一種稱為輔酶Q10化合物 即2 3 二甲氧 5 甲基1 4 苯醌 然后將兩者縮合成輔酶Q10 嗎 目前國(guó)內(nèi)茄尼醇的生產(chǎn)工藝已開發(fā)成功 實(shí)現(xiàn)年產(chǎn)100t的規(guī)模 3 微生物發(fā)酵法這是近年興起的輔酶Q10生產(chǎn)方法 由于微生物發(fā)酵原料來源廣 成本低 可以高密度 大規(guī)模生產(chǎn) 產(chǎn)品完全為天然的全反式構(gòu)型 生物利用度高 而且相對(duì)于化學(xué)合成法安全 高效 產(chǎn)品中幾乎無毒害化學(xué)物質(zhì)殘留 易于分離純化 臨床療效較好 是近幾年全球開發(fā)的熱點(diǎn) 被認(rèn)為是最具有開發(fā)前景的生產(chǎn)方法 因此 充分利用微生物本身的特定優(yōu)勢(shì) 結(jié)合現(xiàn)代生物技術(shù) 有效應(yīng)用 改造或構(gòu)件新的基因工程菌成為提高輔酶Q10的生產(chǎn)能力的關(guān)鍵 4 生物提取法 利用豬心殘?jiān)a(chǎn)輔酶Q10 1 皂化配料比 豬心殘?jiān)?95 乙醇 氫氧化鈉 焦性沒食子酸 1 1 3 0 13 0 12在反應(yīng)罐中加入乙醇?xì)溲趸c和焦性沒食子酸 攪拌后加入提取細(xì)胞色素C后的豬心殘?jiān)?2 萃取配料比 皂化液 石油醚 1 1 4在上述皂化液中加入0 6倍量的石油醚 攪拌提取 靜止分層后 吸出上清液 殘?jiān)俜謩e用0 4倍量的石油醚萃取二次 合并萃取液 用水洗至中性 直至水洗液近中性 3 濃縮 過濾將上述萃取液在40 以下減壓濃縮至原體積的1 20 冷卻 5 以下靜置后過濾 得濃縮濾液 4 吸附 洗滌 洗脫配料比 豬心殘?jiān)?硅膠 60 100目 1 0 01 在長(zhǎng)徑比等于7 1的純化柱中裝好硅膠 將上述濃縮濾液通過硅膠進(jìn)行吸附 吸附后先用石油醚或120號(hào)汽油洗柱除去雜質(zhì) 待流出液為無色時(shí) 5 濃縮 結(jié)晶 干燥將上述洗脫液在40 以下減壓濃縮 除去石油醚后得棕色油狀物 于油狀物中加入熱的無水乙醇 溶解后冷卻結(jié)晶12小時(shí) 濾干 真空干燥 得輔酶Q10 輔酶Q的生產(chǎn)輔酶Q又稱泛醌 是一種脂溶性醌類化合物 所以有人也把它算入脂類藥物之列 豬心殘?jiān)?皂化液 皂化 NaOH 提取液 石油醚提取 濃縮液 減壓濃縮 洗脫液 硅膠吸附 精制CoQ10 無水乙醇結(jié)晶 維生素類藥物 一 概述 生理作用特點(diǎn)非供能物質(zhì)和組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分 而是調(diào)節(jié)機(jī)體生理機(jī)能的活性物質(zhì)主要為小分子有機(jī)化合物 一些具有金屬活性中心 需要量微小 人體不能合成 必須從食物中攝取 人體若缺乏維生素 會(huì)出現(xiàn)維生素缺乏癥 通過輔酶或者輔基的形式參與體內(nèi)酶促反應(yīng) 調(diào)節(jié)生理代謝機(jī)能 一 概述 分類及功能脂溶性維生素維生素A 維持正常視力 預(yù)防夜盲癥 維持上皮細(xì)胞組織健康 促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育 增加對(duì)傳染病的抵抗力 預(yù)防和治療干眼病 維生素E 維持正常的生殖能力和肌肉正常代謝 維持中樞神經(jīng)和血管系統(tǒng)的完整 維生素K 止血 它不但是凝血酶原的主要成分 而且還能促使肝臟制造凝血酶原 小兒維生素K缺乏癥 一 概述 生產(chǎn)方法1 化學(xué)合成法維生素B1 B6 煙酸 煙酰胺 葉酸 維生素D E 生物素等 2 發(fā)酵法維生素B2 B12 維生素C B 胡蘿卜素3 生物提取法 二 維生素C的生產(chǎn) 化學(xué)本質(zhì)和性質(zhì)1 化學(xué)本質(zhì) 是含有6C的多羥基化合物 2 化學(xué)性質(zhì) 1 具有酸性 2 具有氧化還原性 二 維生素C的生產(chǎn) 生化功能1 作為羥化酶的輔酶 參與羥化反應(yīng)1 促進(jìn)膠原蛋白的合成2 促進(jìn)膽固醇的轉(zhuǎn)化3 促進(jìn)神經(jīng)遞質(zhì)的合成2 參與體內(nèi)的氧化還原反應(yīng)1 促進(jìn)GSH生成 保護(hù)巰基酶活性2 促進(jìn)抗體生成3 促進(jìn)造血作用3 抗病毒 抗腫瘤 羥化酶Pro LysPro OH Lys OH 合成膠原蛋白Vit C細(xì)胞間質(zhì)成分將細(xì)胞粘合起來構(gòu)成組織 缺乏Vit C 羥化酶活性下降 細(xì)胞間質(zhì)病變 導(dǎo)致壞血病 促進(jìn)GSH的生成 保護(hù)E SH免遭氧化 SGSSHEHg 2GSHHg ESGSSH 復(fù)活 二 維生素C的生產(chǎn) 生產(chǎn)方法1 萊氏法是維生素C生產(chǎn)的經(jīng)典方法 是由Reichstein和Grussner研究開發(fā)的 系以葡萄糖作為起始原料 經(jīng)催化加氫制成D 山梨醇 再經(jīng)醋桿菌深層發(fā)酵氧化制得收率很高的L 山梨糖 L一山梨糖經(jīng)丙酮和硫酸處理 生產(chǎn)上俗稱丙酸化 生成雙丙酮 L 山梨糖 簡(jiǎn)稱雙酮糖 再用苯或甲苯提取 提取液經(jīng)水法除去單酮山梨糖后蒸去溶劑而后分離出來 用高錳酸鈉氧化 水解 酯化 轉(zhuǎn)化 中和便得VC 二 維生素C的生產(chǎn) 生產(chǎn)方法2 二步發(fā)酵法維生素C生產(chǎn)的二步發(fā)酵法是由我國(guó)科學(xué)院微生物研究所和北京制藥廠合作于70年代初最先發(fā)明的 它也是目前唯一成功應(yīng)用于維生素C工業(yè)生產(chǎn)的微生物轉(zhuǎn)化法 該法遵循L 山梨糖途徑 即D 山梨醇在細(xì)菌的作用下轉(zhuǎn)化為L(zhǎng) 山梨糖 再經(jīng)細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生Vc前體2 酮基 L 古龍酸 其特點(diǎn)為第二步發(fā)酵由氧化葡萄糖酸桿菌和巨大芽孢桿菌等伴生菌混合發(fā)酵完成 涉及小菌和大菌2個(gè)菌株 其中小菌為產(chǎn)酸菌 但單獨(dú)培養(yǎng)傳代困難 且產(chǎn)酸能力很低 大菌不產(chǎn)酸 但大菌胞內(nèi)液和胞外液均可促進(jìn)小菌生長(zhǎng) 縮短小菌生長(zhǎng)的延遲期 維生素C的生產(chǎn)微生物發(fā)酵法 D 葡萄糖 D 山梨醇 D 山梨糖 加氫還原 醋酸桿菌 2 酮 L 古龍酸 2 KGA 氧化葡萄糖酸桿菌 維生素C 化學(xué)轉(zhuǎn)化 兩步發(fā)酵法是中國(guó)科學(xué)院微生物研究所和北京制藥廠在1970年代最先發(fā)明的 目前仍在使用中 第二步發(fā)酵是由氧化葡萄糖酸桿菌和巨大芽孢桿菌等伴生菌共同完成的 也有人在這步使用假單胞菌 二 維生素C的生產(chǎn) 生產(chǎn)工藝3 新二步發(fā)酵法日本園山高康等最先發(fā)明 也稱葡萄糖串聯(lián)發(fā)酵法 該法經(jīng)過的是2 5 二酮基 D 葡