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第三節(jié)除草劑生物測(cè)定 一 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 試材的選擇和培養(yǎng) 穩(wěn)定的試驗(yàn)環(huán)境條件 科學(xué)的試驗(yàn)方法 合理的試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)和數(shù)據(jù)處理二 除草劑混合使用配比篩選及評(píng)價(jià)方法 除草劑混用的目的和意義 除草劑混用后的聯(lián)合作用類型 除草劑混用聯(lián)合作用類型的評(píng)價(jià)方法三 除草劑混用配方篩選試驗(yàn)及評(píng)價(jià)方法的具體應(yīng)用 確定混劑配比篩選評(píng)價(jià)方法的原則 除草劑混合使用聯(lián)合作用類型評(píng)價(jià)實(shí)例 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 應(yīng)用于除草劑的發(fā)現(xiàn) 活性測(cè)定以及作用特性和應(yīng)用技術(shù)等研究 規(guī)范除草劑生物活性試驗(yàn)方法的目的在于 使之達(dá)到真正意義上為田間試驗(yàn)和應(yīng)用優(yōu)化做技術(shù)支撐 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 試材的選擇和培養(yǎng) 應(yīng)選擇 在分類學(xué)上 經(jīng)濟(jì)上或地域上有一定代表性的栽培植物或雜草等 對(duì)藥劑敏感性符合要求 且對(duì)藥劑的反應(yīng)便于定性 定量測(cè)定 達(dá)到劑量 反應(yīng)相關(guān)性良好 易于培養(yǎng) 繁育和保存 能為試驗(yàn)及時(shí)提供相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)一致的試材 試驗(yàn)的靶標(biāo)植物 可以選擇栽培植物 雜草或其他組織器官細(xì)胞以及藻類等生物靶標(biāo) 用于研究除草劑特性的較為規(guī)范的室內(nèi)方法大都以栽培植物為試材 比如 玉米根長(zhǎng)法 高梁法 小麥去胚乳法等 溫室盆栽法 稗草中胚軸法等試驗(yàn)方法所用的雜草 需要對(duì)種子采集 儲(chǔ)藏 打破休眠和發(fā)芽率測(cè)定等處理后使用 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 試材的選擇和培養(yǎng) 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)常用靶標(biāo)雜草 溫室盆栽法 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 穩(wěn)定的試驗(yàn)環(huán)境條件 在試驗(yàn)中 土壤 光照 溫度 濕度等環(huán)境條件不僅影響靶標(biāo)生物的生長(zhǎng)狀態(tài) 也影響藥劑的吸收 傳導(dǎo)及藥效的發(fā)揮 在試驗(yàn)時(shí) 土壤性質(zhì)如 OM pH等要明確 選擇中性輕質(zhì)土壤 光照 溫度 濕度等環(huán)境條件應(yīng)在具有一定控制系統(tǒng)的硬件配套設(shè)施中進(jìn)行 要保證所有處理在相對(duì)一致的環(huán)境下測(cè)試 結(jié)果具有重現(xiàn)性和可行性 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 科學(xué)的生測(cè)試驗(yàn)方法 室內(nèi)方法如下 以植物整株測(cè)試的試驗(yàn)方法有 溫室盆栽法 培養(yǎng)皿法 小杯法 高粱法 玉米根長(zhǎng)法 稗草中胚軸法 用于篩選 除草活性和安全性大小的定性定量評(píng)價(jià) 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 科學(xué)的生測(cè)試驗(yàn)方法 以單細(xì)胞藻類或其器官測(cè)試的試驗(yàn)方法 蘿卜子葉法 黃瓜幼苗形態(tài)法 小麥去胚乳法 燕麥法 菜豆葉片法 葉鞘滴注法 浮萍法 小球藻法 光合呼吸儀測(cè)定法等 用于不同類別除草劑的作用特性研究 以組織細(xì)胞為靶標(biāo)的試驗(yàn)方法 測(cè)定有絲分裂指數(shù) 光合 呼吸 蒸騰 膜透性 酶活力 葉綠素含量等生理生化指標(biāo) 用于除草劑生理作用機(jī)理影響研究 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 科學(xué)的生測(cè)試驗(yàn)方法 溫室盆栽方法最為有效定性定量應(yīng)用廣泛與田間結(jié)果相關(guān)遵守的原則 針對(duì)測(cè)定藥劑的應(yīng)用范圍選擇代表性的2 6種主要雜草作為測(cè)試靶標(biāo) 根據(jù)藥劑特性選擇芽前或芽后早期土壤噴霧處理 或苗后一定植物葉齡的莖葉噴霧處理 噴霧設(shè)施的噴頭霧滴 壓力 速度等條件要相對(duì)穩(wěn)定 要求在溫室內(nèi)對(duì)處理前后的試材統(tǒng)一培養(yǎng)和管理 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 合理的試驗(yàn)設(shè)計(jì) 生物的復(fù)雜性 多樣性 需掌握以下原則 設(shè)空白對(duì)照 不含有效成分的對(duì)照 必要時(shí) 和標(biāo)準(zhǔn)藥劑的對(duì)照 以排除偶然性誤差 取得可信的試驗(yàn)數(shù)據(jù) 應(yīng)有一定的數(shù)量并設(shè)置重復(fù) 減輕個(gè)體反應(yīng)程度的差異 以保證其代表性和結(jié)果的可靠性 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)和數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)結(jié)果與藥劑 靶標(biāo) 測(cè)試條件等多種因素相關(guān) 故在記錄和評(píng)價(jià)活性時(shí) 要有詳細(xì)的試驗(yàn)原始記錄 并隨試驗(yàn)報(bào)告一起歸檔保存 原始記錄應(yīng)記載藥劑的特性 劑型 含量 生產(chǎn)日期 樣品提供者 配制過程 施藥方法 靶標(biāo)生育期 培養(yǎng)條件 噴霧速度壓力霧滴情況等基礎(chǔ)數(shù)據(jù) 以及處理后的試材培養(yǎng)條件及管理方法 結(jié)果調(diào)查方法與調(diào)查結(jié)果等 調(diào)查方法有視植物受害癥狀及程度的綜合評(píng)價(jià)目測(cè)法和根長(zhǎng) 鮮重 株高 分枝 蘗 數(shù) 株數(shù) 葉面積等的定量化指標(biāo)測(cè)定 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)和數(shù)據(jù)處理 除草活性和作物安全性目測(cè)法評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)和數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)處理對(duì)于試驗(yàn)得到的大量數(shù)據(jù) 通過計(jì)算機(jī)如DPS數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件的處理才能發(fā)現(xiàn)其內(nèi)在關(guān)系與規(guī)律 如 建立相關(guān)系數(shù)R 0 9的劑量 反應(yīng)相關(guān)模型 獲得ED90或ED50 ED10 能正確闡述試驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性 除草劑室內(nèi)試驗(yàn)技術(shù) 試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)和數(shù)據(jù)處理 結(jié)果分析以藥劑對(duì)主要敏感雜草的最低有效劑量ED90為除草劑活性評(píng)價(jià)指標(biāo) 以藥劑對(duì)應(yīng)用作物的抑制率不超過10 時(shí)的最高安全劑量ED10 NOEL 為作物安全性評(píng)價(jià)指標(biāo) 以gai ha或gai hm2 克有效成分 公頃 為劑量單位 選擇性系數(shù)為ED10 ED90 2時(shí) 認(rèn)為藥劑具有一定選擇性 可以進(jìn)行田間試驗(yàn) 結(jié)論和討論對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析后 根據(jù)試驗(yàn)的研究目的和性質(zhì) 需要在結(jié)論部分給出客觀的結(jié)論 并進(jìn)行相關(guān)討論 除草劑混合使用配比篩選及評(píng)價(jià)方法 將兩種或兩種以上的除草劑混配在一起應(yīng)用的施藥方法叫做除草劑的混用 常用的有2種混用形式 現(xiàn)混現(xiàn)用或桶混 習(xí)慣上簡(jiǎn)稱除草劑混用 除草混劑 是由兩種或兩種以上的有效成份 助劑 填料等按一定配比 經(jīng)過加工而成的農(nóng)藥制劑 除草劑混用的目的和意義 擴(kuò)大殺草譜 減少用藥次數(shù) 減少用藥量 降低成本 取長(zhǎng)補(bǔ)短 提高防效 降低使用成本 延長(zhǎng)施藥適期 減少殘留活性 延緩抗藥性 耐藥性 雜草的發(fā)生與發(fā)展 除草劑混合使用配比篩選及評(píng)價(jià)方法 除草劑混用后的聯(lián)合作用類型 兩種或兩種以上的除草劑混用后 較單用相比對(duì)雜草的防除效果可能是增加 降低 或不增不減 混用后的聯(lián)合作用類型主要表現(xiàn)為以下三種情況 相加作用additivity 增效作用synergism 拮抗作用antagonism 除草劑混合使用配比篩選及評(píng)價(jià)方法 混用聯(lián)合作用類型的評(píng)價(jià)方法 Gowing法 首先測(cè)定單劑及混劑對(duì)靶標(biāo)雜草的防效 再通過單劑的實(shí)測(cè)防效計(jì)算出混劑的理論防效 將其與混劑的實(shí)測(cè)防效相比來評(píng)價(jià)聯(lián)合作用類型 理論防效計(jì)算公式為 E0 X Y XY 100X 用量為P時(shí)A的雜草防效 Y 用量為Q時(shí)B的雜草防效 E0 用量為 P Q 時(shí)A B的理論防效 E 各處理的實(shí)測(cè)防效 當(dāng)E E0 10 時(shí) 說明混配產(chǎn)生增效作用 當(dāng)E E0 10 時(shí) 說明混配產(chǎn)生拮抗作用 當(dāng)E E0值介于 10 時(shí) 說明混配產(chǎn)生加成作用 該方法試驗(yàn)設(shè)計(jì)和數(shù)據(jù)處理簡(jiǎn)單 尤其適合評(píng)價(jià)殺草譜互補(bǔ)型除草劑的聯(lián)合作用類型 明確配比的合理性 但僅能對(duì)兩種除草劑的混用進(jìn)行配比的合理評(píng)價(jià) 除草劑混合使用配比篩選及評(píng)價(jià)方法 混用聯(lián)合作用類型的評(píng)價(jià)方法 Colby法 Colby 1976 法是Gowing法的公式變形 其理論防效計(jì)算公式為E0 XY 100 式中 X 用量為P時(shí)A的雜草存活率 Y 用量為Q時(shí)B的雜草存活率 E0 用量為 P Q 時(shí)A B的理論雜草存活率 E 表示各處理的實(shí)際雜草存活率 當(dāng)E0 E 10 時(shí) 說明產(chǎn)生增效作用 當(dāng)E0 E 10 時(shí) 說明產(chǎn)生拮抗作用 當(dāng)E0 E值介于 10 時(shí) 說明產(chǎn)生加成作用 Colby法是評(píng)價(jià)除草劑混用效果的快速而實(shí)用的方法 尤其適合評(píng)價(jià)殺草譜互補(bǔ)型除草劑的聯(lián)合作用類型 明確配比的合理性 且2種以上除草劑的混用測(cè)定也可應(yīng)用該法進(jìn)行評(píng)價(jià) 理論值計(jì)算公式為E0 X Y Z n 100 n 1 除草劑混合使用配比篩選及評(píng)價(jià)方法 混用聯(lián)合作用類型的評(píng)價(jià)方法 等效線法 千版法 1 分別求出兩個(gè)單劑的ED50 或ED90 2 連線兩軸上ED50 或ED90 作為理論上兩種除草劑混用的等效線 3 求出各混用的ED50 或ED90 4 在坐標(biāo)圖中標(biāo)出混用的ED50 或ED90 的各點(diǎn) 若混用后ED50 或ED90 各點(diǎn)均在A B線之下 則為增效作用 在其上則為拮抗作用 接近與等效線則為相加作用 除草劑混合使用配比篩選及評(píng)價(jià)方法 混用聯(lián)合作用類型的評(píng)價(jià)方法 本法比較準(zhǔn)確 適于室內(nèi)測(cè)定 不僅能評(píng)價(jià)二元除草劑混劑的聯(lián)合作用類型 還能確定最適宜的配比 但該法試驗(yàn)規(guī)模較大 且只能對(duì)二元除草劑混用進(jìn)行測(cè)定 同時(shí)要求被測(cè)定的組成混劑的各個(gè)單劑對(duì)同一靶標(biāo)雜草均有較好的活性 否則會(huì)產(chǎn)生單邊效應(yīng) 不適于評(píng)價(jià)殺草譜互補(bǔ)型的除草劑混配 辛酰溴苯腈與2 4 D丁酯混用配方篩選 測(cè)定辛酰溴苯腈與2 4 D丁酯對(duì)鴨跖草的鮮重防效 最佳配比以辛酰溴苯腈在100 220gai ha的劑量下遞增 與2 4 D丁酯在1200 440gai h的劑量下遞減的范圍內(nèi)相互混用增效作用較大 即二者混用以2 4 D丁酯 辛酰溴苯腈 2 10 1的范圍內(nèi)選擇配比效果較好 注 1為相加作用效應(yīng)AB線 2為以辛酰溴苯腈為基準(zhǔn)的ED90等效線 3為以2 4 D丁酯為基準(zhǔn)的ED90等效線 除草劑混合使用配比篩選及評(píng)價(jià)方法 混用聯(lián)合作用類型的評(píng)價(jià)方法 孫云沛的共毒系數(shù)法是經(jīng)典的殺蟲劑混配聯(lián)合毒力評(píng)價(jià)方法 先以常規(guī)方法測(cè)定組成混劑的各單劑及混劑的ED50 或ED90 值 再以其中的某個(gè)單劑為標(biāo)準(zhǔn)藥劑計(jì)算各單劑的毒力指數(shù) 標(biāo)準(zhǔn)藥劑的毒力指數(shù)為100 混劑的實(shí)測(cè)毒力指數(shù)及理論毒力指數(shù) 最后計(jì)算共毒系數(shù) 判斷標(biāo)準(zhǔn)為共毒系數(shù)在80 120之間時(shí)為相加作用 明顯120時(shí)為增效作用 可對(duì)二元及多元除草劑混用后的不同混用配比進(jìn)行篩選 結(jié)果較為準(zhǔn)確 可靠 但該方法的試驗(yàn)處理較多 規(guī)模較大 且需要在正式試驗(yàn)進(jìn)行各單劑設(shè)計(jì)3 5個(gè)劑量的預(yù)試驗(yàn) 再以此為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)合理的劑量范圍進(jìn)行配方篩選測(cè)定 除草劑混合使用配比篩選及評(píng)價(jià)方法 混用聯(lián)合作用類型的評(píng)價(jià)方法 交互作用圖解法 先確定組分A或組分B單用時(shí)防效為50 或90 的劑量 然后假設(shè)2種藥劑表現(xiàn)為相加作用 則A的劑量增減可以通過B的劑量來彌補(bǔ) 如可采用A 1 4A 3 4B 1 2A 1 2B 3 4A 1 4B B等不同配比處理 AB直線為2劑相加作用的準(zhǔn)線 若混用后防效各點(diǎn)均在準(zhǔn)線之上 表示增效 反之即為減效 此法的優(yōu)點(diǎn)是在田間或室內(nèi)易于進(jìn)行 設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單 最少用3個(gè)處理就可看出結(jié)果 但此法對(duì)2種藥劑的增效減效不能因其比例的不同而變化 除草劑混用配方篩選試驗(yàn)及評(píng)價(jià)方法的具體應(yīng)用 確定混劑配比篩選評(píng)價(jià)方法的原則 殺草譜相近型 原則上介紹的5種評(píng)價(jià)方法均可 但以等效線法和共毒系數(shù)法較好 即能測(cè)定出混用后的聯(lián)合作用類型 還可篩選出相對(duì)較好的混用配比 但需要的試驗(yàn)處理較多 試驗(yàn)規(guī)模較大 Gowing法 Colby法和交互作用圖解法以較少的處理即可評(píng)價(jià)混用的聯(lián)合作用類型 但這三種方法不同混配組合的變化較少 用來篩選最佳混用配比效果會(huì)略差 但能有效評(píng)判已知配方的合理性 若為三元除草劑的混用則可采用共毒系數(shù)法或Colby法進(jìn)行測(cè)定 殺草譜互補(bǔ)型 原則上不宜采用等效線法和交互作用圖解法 試驗(yàn)時(shí)可以選擇至少2種代表雜草分別進(jìn)行混用聯(lián)合作用的評(píng)價(jià) 應(yīng)用Gowing法或Colby法多劑量組合處理進(jìn)行評(píng)價(jià)比較有效 若為三元混用則用Colby法較好 除草劑混用配方篩選試驗(yàn)及評(píng)價(jià)方法的具體應(yīng)用 確定混劑配比篩選評(píng)價(jià)方法的原則 值得注意的是 現(xiàn)在很多除草劑混劑基本上是市場(chǎng)上大量應(yīng)
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