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一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?. 學(xué)習(xí)蛙坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備2. 觀察坐骨神經(jīng)干的雙相動(dòng)作電位波形,并測(cè)定最大刺激強(qiáng)度3. 測(cè)定坐骨神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度4. 學(xué)習(xí)絕對(duì)不應(yīng)期和相對(duì)不應(yīng)期的測(cè)定方法5. 觀察機(jī)械損傷或局麻藥對(duì)神經(jīng)興奮和傳導(dǎo)的影響二、實(shí)驗(yàn)材料1. 實(shí)驗(yàn)對(duì)象:牛蛙2. 實(shí)驗(yàn)藥品和器材:任氏液,2%普魯卡因,各種帶USB接口或插頭的連接導(dǎo)線(xiàn),神經(jīng)屏蔽盒,蛙板,玻璃分針,粗剪刀,眼科剪,眼科鑷,培養(yǎng)皿,燒杯,滴管,蛙毀髓探針,BL-420N系統(tǒng)三、主要方法和步驟:1. 搗毀腦脊髓2. 分離坐骨神經(jīng)3. 安放引導(dǎo)電極4. 安放刺激電極5. 啟動(dòng)試驗(yàn)系統(tǒng)6. 觀察記錄7. 保存8. 編輯輸出四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論1. 觀察神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位引導(dǎo)(單通道,單刺激)如圖,觀察到一個(gè)雙相動(dòng)作電位波形。2. 神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度測(cè)定(雙通道,單刺激)(1) 選擇“神經(jīng)骨骼肌實(shí)驗(yàn)”“傳導(dǎo)速度測(cè)定”(2) 改變單刺激強(qiáng)度(3) 傳導(dǎo)速度 = 傳導(dǎo)距離(R1-R2-)/傳導(dǎo)時(shí)間(t2-t1)如圖所示,兩個(gè)波峰之間的傳導(dǎo)時(shí)間 t = (t2-t1) = 0.66ms實(shí)驗(yàn)中,我們?cè)O(shè)定在引導(dǎo)電極1和3之間的距離 R = (R1-R2-) = 1cm故傳導(dǎo)速度v = R/t = 1cm / 0.66ms = 15.2 m/s3. 神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位不應(yīng)期觀察由上圖可知,當(dāng)刺激間隔時(shí)間為4.61ms時(shí),兩雙相動(dòng)作電位開(kāi)始融合,此時(shí)為總不應(yīng)期;當(dāng)刺激間隔時(shí)間為1.05ms時(shí),雙相動(dòng)作電位完全融合,此時(shí)為絕對(duì)不應(yīng)期。故相對(duì)不應(yīng)期 = 總不應(yīng)期 絕對(duì)不應(yīng)期 = 4.61ms 1.05ms = 3.56ms4. 普魯卡因?qū)ι窠?jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)的阻滯作用如圖所示,在兩通道之間滴加普魯卡因后,兩雙相電位間的波峰間隔時(shí)間為1.03ms,由引導(dǎo)電極之間的間隔距離1cm,得此時(shí)傳導(dǎo)速度:V1 = 1cm/1.03ms = 9.71 m/s5. 機(jī)械損傷對(duì)坐骨神經(jīng)干雙向動(dòng)作電位的影響由圖可知,當(dāng)剪斷兩引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)干時(shí),第二通道的雙相動(dòng)作電位消失。故機(jī)械損傷對(duì)神經(jīng)動(dòng)作電位傳導(dǎo)的阻滯作用比局麻藥強(qiáng)。6. 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)a) 牛蛙腓腸肌后的神經(jīng)干分支較難找,可以適當(dāng)剪開(kāi)周?chē)浗M織輔助找到。b) 每隔一段時(shí)間,記得給神經(jīng)干(及未分離時(shí)的周?chē)浗M織)滴加任氏液以盡量保持組織的活性。c) 分離出的神經(jīng)要盡量長(zhǎng),以保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的完整性。d) 滴加普魯卡因時(shí),液滴可能會(huì)垂在神經(jīng)干上的兩個(gè)引導(dǎo)電極之間,此時(shí)可以
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