（動物學專業(yè)論文）不同生理狀態(tài)下草叢土毛蟲的細胞結構及大核dna多態(tài)性研究.pdf

e a s tc h i n an o r m a l u n i v e r s i t y s t u d i e so nc e l ls t r u c t u r ea n dp o l y m o r p h i c m a c r o n u c l e a rd n ai n 乃蒯c h as t r a m e n t i c o l a ( c i l i o p h o r a ：h y p o t r i c h i d a ) u n d e r d i f f e r e n t p h y s i o l o g i c a ls t a t u s s c h o o la n dd e p a r t m e n t ：s c h o o lo f l i f es c i e n c e t u t o r ： 魚墜墅堅k 壘墜g d o c t o rc a n d i d a t e ： 苧塾竺墜g 塾墜望 a p r i l ，2 0 1 0 華東師范大學學位論文原創(chuàng)性聲明 鄭重聲明：本人呈交的學位論文不同生理狀態(tài)下草叢土毛蟲的細胞結構及大核 d n a 多態(tài)性研究，是在華東師范大學攻讀碩士博士( 請勾選) 學位期間，在導師的 指導下進行的研究工作及取得的研究成果。除文中已經注明引用的內容外，本論文不包 含其他個人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體， 均已在文中作了明確說明并表示謝意。 作者簽名： 華東師范大學學位論文著作權使用聲明 不同生理狀態(tài)下草叢土毛蟲的細胞結構及大核d n a 多態(tài)性研究系本人在華東 師范大學攻讀學位期間在導師指導下完成的碩士博士( 請勾選) 學位論文，本論文的 研究成果歸華東師范大學所有。本人同意華東師范大學根據(jù)相關規(guī)定保留和使用此學位 論文，并向主管部門和相關機構如國家圖書館、中信所和“知網送交學位論文的印刷 版和電子版；允許學位論文進入華東師范大學圖書館及數(shù)據(jù)庫被查閱、借閱；同意學校 將學位論文加入全國博士、碩士學位論文共建單位數(shù)據(jù)庫進行檢索，將學位論文的標題 和摘要匯編出版，采用影印、縮印或者其它方式合理復制學位論文。 本學位論文屬于( 請勾選) () 1 經華東師范大學相關部門審查核定的“內部 或“涉密 學位論文幸， 于年月日解密，解密后適用上述授權。 ( u2 不保密，適用上述授權。 新簽名一 桃名絲叁 撕年j 6 具7 日 “涉密”學位論文應是已經華東師范大學學位評定委員會辦公室或保密委員會審定過的學位 論文( 需附獲批的華東師范大學研究生申請學位論文“涉密”審批表方為有效) ，未經上 述部門審定的學位論文均為公開學位論文。此聲明欄不填寫的，默認為公開學位論文，均適用 上述授權) 。 盛索博士學位論文答辯委員會成員名單 姓名職稱單位備注 喬中東教授上海交通大學主席 朱振勤教授華東師范大學委員 中國農科院 黃兵研究員委員 上海獸醫(yī)研究所 李利珍教授上海師范大學委員 王蓮蕓教授上海交通大學委員 吳自榮教授華東師范大學委員 侯連生教授華東師范大學委員 摘要 不同生理狀態(tài)下草叢土毛蟲的細胞結構及 大核d n a 多態(tài)性研究 摘要 原生動物是動物界中最簡單、最低等的單細胞真核生物。土壤原生動物作為 原生動物中的一個類群，在土壤生態(tài)系統(tǒng)中起著至關重要的作用，土壤原生動物 與水生原生動物之間既相互聯(lián)系又區(qū)別明顯。土壤纖毛蟲具有特有的生活狀態(tài)以 及與土壤生活相適應的形態(tài)結構跟生理機能，尤其是土壤纖毛蟲所擁有的隨著土 壤顆粒及干濕度的變化發(fā)生形成包囊和脫包囊的生活史，是細胞對特殊環(huán)境條件 的一種適應性特征。到目前為止，諸多學者已經對水生纖毛蟲形態(tài)結構及其包囊 做了比較多的研究，但是對于土壤纖毛蟲的研究還甚少，僅限于生態(tài)功能、群落 特征和物種分布等幾個方面。作者對土壤纖毛蟲的細胞形態(tài)、皮層結構模式、細 胞質的細胞器以及核器等超微結構的研究是想進一步了解土壤纖毛蟲是如何適 應土壤生境的，以及土壤纖毛蟲與淡水纖毛蟲之間的親緣關系，還想更深入的了 解土壤纖毛蟲包囊的發(fā)生及包囊的形態(tài)、細胞結構特征等，此研究對于進一步揭 示土壤纖毛蟲細胞結構的分化、細胞模式的形成、種群的分類以及探索其在系統(tǒng) 發(fā)生過程中的演化地位等都有極為重要的生物學意義。本文對國內外有關土壤纖 毛蟲的研究做了充分調研，以作者所在實驗室在浙江溫州所采集到的一種大型的 腹毛類土壤纖毛蟲草叢土毛蟲( t e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l a ) 為研究材料，分別 用正常生理狀態(tài)的營養(yǎng)期細胞與經過人工誘導后產生的休眠階段的包囊，對其進 行f l u t a x 熒光標記、抗q 一微管蛋白免疫熒光標記，以及掃描電鏡術和透射 電鏡術等多種技術手段的應用，系統(tǒng)的比較觀察了其營養(yǎng)細胞與休眠包囊的形 態(tài)、皮層細胞質及其各種胞器的結構；應用r a p d 方法，分別對草叢土毛蟲的 營養(yǎng)細胞與休眠細胞的大核d n a 進行了探索。結果如下： 1 細胞皮層微管胞器的熒光標記 應用f l u t a x 直接熒光和抗q 一微管蛋白抗體免疫熒光標記顯示，草叢土毛 蟲細胞皮層含有口圍帶、波動膜、額腹橫棘毛、左右緣棘毛、背觸毛等纖毛器及 摘要 其纖毛器骨架、纖毛器基部附屬微管和其他皮層非纖毛器微管骨架等組成的微管 胞器。其中：口圍帶和波動膜基部形成小膜托架、小膜附屬微管及波動膜骨架； 波動膜由數(shù)量眾多的的細小微管相互交織組成的密集微管網構成；額腹橫棘毛基 部和左右緣棘毛基部由前縱微管束、后縱微管束和橫微管束三部分微管組成；背 觸毛基部含前縱微管束和后縱微管束。所得結果中，其橫棘毛基部具有較發(fā)達的 橫微管束，這在其他纖毛蟲中未見報道；并且，細胞皮層纖毛器在其表膜下形成 的纖毛器基部微管骨架，較尖毛科的水生纖毛蟲同種結構發(fā)達。據(jù)此推測，土毛 蟲細胞皮層微管胞器的形態(tài)特征可能與細胞在土壤中的生命活動相適應，其發(fā)達 的纖毛器基部微管為其表面纖毛器的運動提供了有力的支撐，有利于纖毛蟲在土 壤團粒間的運動和取食，這也是細胞與環(huán)境問長期相互作用的結果。 2 營養(yǎng)細胞和休眠包囊的掃描電鏡觀察 掃描電鏡觀察顯示，草叢土毛蟲的營養(yǎng)細胞中，腹皮層口圍帶含小膜5 5 7 0 片，波動膜2 片，額腹橫棘毛和左右緣棘毛在細胞腹面按8 - 9 7 模式分布，背觸 毛8 列。該纖毛蟲的腹皮層纖毛器較發(fā)達，除口圍帶和波動膜外，其纖毛器的發(fā) 達程度按額棘毛、橫棘毛、腹棘毛、緣棘毛逐漸遞減。此外，在細胞的額區(qū)前表 面呈棘突樣，在其他纖毛器附近的皮層表面呈波紋樣。據(jù)所得結果推測，該纖毛 蟲發(fā)達的皮層纖毛器及特殊的皮層表面，可能是細胞在土壤顆粒間隙水中運動及 其與環(huán)境相互作用的結果。 纖毛蟲的休眠包囊為球形或者扁球形，直徑7 0 8 0 l m ：包囊壁的背面由無 數(shù)六邊形的鱗片緊密排列而成，呈蛇皮狀；包囊壁的腹面內凹，中央有包囊孔。 據(jù)纖毛蟲包囊壁背面的形態(tài)分析，該包囊壁可能是土壤纖毛蟲形成包囊后細胞抵 御干燥環(huán)境、延長水分散失的特殊結構；據(jù)纖毛蟲包囊形成過程中細胞緊貼下部 基質及分泌物質形成包囊壁的現(xiàn)象認為，包囊孔與周圍的壁結構一起，可能具有 使包囊細胞固定在土壤基質表面的作用。結果表明，土毛蟲的休眠包囊是細胞在 土壤環(huán)境中形成的一中特殊型包囊。 3 營養(yǎng)細胞和休眠包囊的透射電鏡觀察 透射電鏡結果顯示，在草叢土毛蟲的營養(yǎng)細胞中，除纖毛器結構外，皮層由 表膜和表膜下表質層構成，表質層由一層微管對其加固；由微管聚集而成的微管 玎 摘要 束或者微管帶集中存在于皮層纖毛器和腹面棘毛區(qū)的皮層表膜下；細胞質內含有 極其豐富的線粒體、食物泡等胞器結構；核孔呈虛線狀分布于大核中，阿米巴樣 的囊泡結構附著在核膜外，核仁和染色質聚集成大、小不等的團塊分散分布其中， 部分染色質與核內膜緊密相連。所得結果充分表明，纖毛蟲的營養(yǎng)期細胞具有對 土壤環(huán)境的適應性細胞結構，此結構更加有利于其運動與取食；纖毛蟲的細胞質 胞器及核器是細胞進行新陳代謝生命活動的明顯特征。 形成包囊后的纖毛蟲，其細胞皮層纖毛器及與其相聯(lián)系的微管類骨架徹底消 失。通過觀察發(fā)現(xiàn)，草叢土毛蟲的包囊壁結構較特殊，由兩層結構組成，其中大 小相近的長方形小室相互聚集排列形成外層壁，而較厚的、透明的、緊貼在表膜 上的內層壁與外層壁緊密相連，成為表膜向包囊壁過渡的結構物質；休眠細胞內 含有大量的線粒體以及吞噬許多細胞器的自噬泡，其具有不同消化階段的結構特 點；大核核膜與核外細胞質之間分界明顯，其核內染色質呈均一狀分布，巨大型 中央核仁位于大核中央，呈低電子密度狀態(tài)。據(jù)此推測，纖毛蟲形成包囊過程中 皮層纖毛結構及微管結構全部瓦解或被細胞吸收，因此該纖毛蟲所形成的“毛基 體吸收型包囊”具有典型的尖毛科纖毛蟲模式；相較之水生纖毛蟲休眠包囊的壁 結構，草叢土毛蟲休眠包囊所具有特殊的包囊壁結構，為細胞形成包囊后便于 在干燥環(huán)境中儲備較多的水分、維持其特殊生理狀態(tài)下的生命活動提供了必要的 條件；同時，在休眠細胞內清晰可見自噬泡類細胞器，而其他細胞器數(shù)目銳減， 并且與調節(jié)細胞代謝活動相關的營養(yǎng)期大核的結構形態(tài)在休眠細胞中也變化顯 著，說明存在于不同營養(yǎng)細胞的生命活動過程中的自噬泡結構可能是食物泡的另 一種特殊的結構狀態(tài)，它的作用可能為休眠細胞提供基本的營養(yǎng)和能量來源。 4 營養(yǎng)細胞和休眠細胞的大核d n a 多態(tài)性 作者用r a p d 方法分別對草叢土毛蟲的營養(yǎng)細胞和休h 民細胞的大核d n a 進行 了比較研究，實驗共選用隨機引物3 2 條，其中3 0 條引物能夠擴增出1 3 4 條片段， 用營養(yǎng)細胞大核d n a 為模板可以擴增出5 4 條片段，而以休眠細胞大核d n a 為模 板則擴增出8 0 條片段，營養(yǎng)細胞于休眠細胞大核d n a 之間共有2 0 條共享片段， 其共享度為3 0 。由此得出，同種纖毛蟲的營養(yǎng)細胞大核d n a 和休眠細胞大核d n a 的差異明顯。據(jù)此推斷，在形成包囊時，大核d n a 的結構可能發(fā)生了劇烈的變化， 而這些變化與細胞在包囊形成過程中結構和代謝的變化以及生理活動的改變息 n i 形成包囊時，土壤纖 種淡水纖毛蟲( 游仆 蟲和急纖蟲) 的r a p d 數(shù)據(jù)與草叢土毛蟲的實驗結果相比較后發(fā)現(xiàn)，草叢土毛蟲 的營養(yǎng)細胞與休眠細胞的共享度與形成“毛基體吸收型包囊”的水生纖毛蟲相比， 要明顯低的多，推測這可能與該土壤纖毛蟲形成包囊時細胞對纖毛器和其他微管 類胞器的的吸收更為徹底、細胞分泌物質形成特殊的包囊壁等有關，也有可能是 細胞形成包囊時的調控機制與淡水纖毛蟲不盡相同；此外，其營養(yǎng)細胞與休眠細 胞的共享片段的強弱也有所差異，以上數(shù)據(jù)說明即使是共有的d n a 片段，在營 養(yǎng)狀念與休眠狀態(tài)下的含量也是不完全一致的。 關鍵詞：土壤纖毛蟲；草叢土毛蟲；營養(yǎng)細胞；休眠包囊； 微管胞器； 超 微結構：大核d n a 。 i v 摘要 s t u d i e so nc e l ls t r u c t u r ea n d p o l y m o r p h i c m a c r o n u c l e a rd n ai ut e 蒯c h as t r a m e n t i c o l a ( c i l i o p h o r a ：h y p o t r i c h i d a ) u n d e rd i f f e r e n t p h y s i o l o g i c a ls t a t u s a b s t r a c t ： s o i lp r o t o z o a na sal a r g ea s s e m b l a g eo fp r o t o z o ap l a y sa ni m p o r t a n tr o l ei nt h e s o i le c o s y s t e m t h e r ea r es i m i l a r i t i e sa n dd i f f e r e n c eb e t w e e ns o i l p r o t o z o aa n d a q u a t i cp r o t o z o a e s p e c i a l l y , s o i lc i l i a t e s ，t h e i ru n i q u el i v i n gc o n d i t i o n s ，c e l l s t r u c t u r e sa n dp h y s i o l o g i c a lc h a r a c t e r sc o u l da d a p tt ot h es o i l l i f e e n c y s t m e n ta n d e x c y s t m e n ta r eo n ep a r to ft h es o i lp r o t o z o al i f eh i s t o r y , w h i c ht a k e sa ni m p o r t a n t e f f e c to ni t ss u r v i v a l a tp r e s e n tt h es c i e n t i s t si nm a n yf i e l d sf o c u so nc i l i a t e sl i v e d i nw a t e r b u tt h e r ea r en om o r es t u d i e so ns o i lc i l i a t e s m o s ts t u d i e so nt h ec i l i a t e s r e m a i n e di nt h e e c o l o g i c a lf u n c t i o n s ，c o m m u n i t yc h a r a c t e r i s t i c sa n ds p e c i e s d i s t r i b u t i o n ，e t c ，o n l yaf e ws m a l lc i l i a t e sw e r eo b s e r v e do np h y s i c a lc h a r a c t e r i s t i c s a n di t si n t e r n a l s t r u c t u r e b ym e a n so fs t u d y i n gc o r t i c a ls t r u c t u r ea n dm o d eo f c y t o p l a s m ，o r g a n e l l e sa n dn u c l e a ru l t r a s t r u c t u r e ，e t c w ew a n tt ok n o wh o wt h e ya d a p t t ot h es o i le n v i r o n m e n ta n du n d e r s t a n dt h er e l a t i o n g s h i pb e t w e e ns o i lc i l i a t e sa n d f r e s h w a t e rc i l i a t e s i no u re x p e r i m e n t s ，t h eo c c u r r e n c eo fr e s t i n gc y s t sw a sf o u n d t h i s k i n do f r e s t i n gc y s t sh a ds p e c i a lc y s tw a l l ，w h i c hc o u l da d a p tt h ed r ys o i le n v i r o n m e n t t h i si st of u r t h e rr e v e a lt h ec e l ls t r u c t u r eo fg e n e t i cc h a n g e so fs o i lc i l i a t e s ，t h e e s t a b l i s h m e n to fc e l l m o d e l ，s p e c i e sc l a s s i f i c a t i o n ，a n d w ec a nh a v em o r e u n d e r s t a n d i n g so ft h e i rp l a c ei nt h es y s t e m s t u d y i n gs o i lc i l i a t e sa n dt h es t a t u so ft h e p r o c e s so fe v o l u t i o nh a si m p o r t a n tb i o l o g i c a ls i g n i f i c a n c e i nt h i ss t u d y , w eu s e d t e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l aa st h ee x p e r i m e n t a lm a t e r i a lo fs o i l c i l i a t e s ，a p p l y i n g f l u o r e s c e n c e l a b e l i n gm e t h o d ( f l u t a x ) ，a n t i - a t u b u l i n a n t i b o d y f l u o r e s c e n c e l a b e l i n g ，s c a n n i n ge l e c t r o nm i c r o s c o p y ( s e m ) ，t r a n s m i s s i o ne l e c t r o nm i c r o s c o p y ( t e m ) a sw e l la st h er a p dt e c h n o l o g y , n o t o n l y i n t h e m i c r o s c o p i c l e v e la n d s u b m i c r o s c o p i cl e v e l ，t oo b s e r v ea n dc o m p a r et h es t r u c t u r ea n du l t r a s t r u c t u r eo ft h e v 摘要 e x t e r n a lm o r p h o l o g yo ft h en o r m a lc e l l sa n dr e s t i n gc y s t s ，t h ec i l i a t ec o r t e x ，t h e c y t o p l a s ma n di t sv a r i o u so r g a n e l l eo ft e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l a ，b u ta l s o ，f r o mg e n e l e v e l ，t h em a c r o n u c l e a rd n a so ft h en o r m a lc e l la n dr e s t i n gc y s to ft e r r i t r i c h a s t r a m e n t i c o l aw e r ec o m p a r e da n ds t u d i e d t h er e s u l t sa r ea sf o l l o w s ： 1 m o r p h o l o g yo fm i c r o t u b u l a ro r g a n e l l ei nt e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l a t h em i c r o t u b u l a r o r g a n e l l e si n t h ec o r t i c a lc i l i a t u r eo ft h es o i lc i l i a t ez s t r a m e n t i c o l aw e r ev i s u a l i z e d b yd i r e c t f l u o r e s c e n tl a b e l i n go ff l u t a xa n d i m m u n o f l u o r e s c e n tl a b e l i n gu s i n ga n t i - - at u b u l i na n t i b o d y t h ed i s t r i b u t i o np a t t e r no f b a s e a s s o c i a t e dm i c r o t u b u l e sw e r ef o u n dt ob ei na c c o r d a n c ew i t ht h a to fa d o r a lz o n e m e m b r a n e l l e s ( a z m ) ，u n d u l a t i n gm e m b r a n e s ( u m ) ，f r o n t a l v e n t r a l t r a n s v e r s ec i r r i ( f v t c ) ，l e f t - r i g h tm a r g i n a lc i r r i ( l - r m c ) a n dd o r s a lk i n e t i e s ( d k ) t h ec y t o s k e l e t o n o fa z ma n du mw a sc o m p o s e do fm e m b r a n e l l eb r a c k e t s ，m e m b r a n e l l e - a s s o c i a t e d m i c r o t u b u l e sa n dt h es k e l e t o no fu m t h ea n t e r i o rl o n g i t u d i n a lm i c r o t u b u l e s ( a l m ) ， p o s t e r i o rl o n g i t u d i n a lm i c r o t u b u l e s ( p l m ) a n dt r a n s v e r s em i c r o t u b u l e s ( t m ) w e r e l o c a t e di nt h eb a s a lp a r to fn 廠1 a l m ，p l m ，t ma n ds p r o u t e dm i c r o t u b u l e s ( s m ) w e r es i t u a t e di nt h eb a s a lp a r t so fl m ca n dr m c a l ma n dp l mw e r ev i s u a l i z e di n t h eb a s a lp a r to fd k t h eb a s eo ft r a n s v e r s ec i r r i ( t c ) c o n t a i n e dc o m p a r a t i v e l y d e v e l o p e db u n d l e so ft m t h eo c c u r e n c eo fs ma n dt h el o c a t i o no ft m i nt h eb a s a l p a r t so fl - r m cm i g h tb eo fs p e c i e ss p e c i f i c i t y t h em i c r o t u b u l e sa n dal a y e ro f m i c r o t u b u l eb e l l o wc e l l sc o r t e xc o u l db eu s e dt oc o m b i n et h em i c r o t u b u l a r c y t o s k e l e t o nn e t w o r kw i t hc e l l sv a r i o u sc i l i a t u r e su s e df o rm o v e m e n t t h ep r e s e n c e o ft h e s em i c r o t u b u l a rs t r u c t u r e sm i g h tb eo n eo ft h ec e l l sa d a p t i v ec h a r a c t e r i s t i c st o s o i le n v i r o n m e n t 2t h es u r f a c eu l t r a s t r u c t u r eo ft h en o r m a lc e l la n dr e s t i n gc y s to ft e r r i t r i c h a s t r a m e n t i c o l a t h es u r f a c eu l t r a s t r u c t u r eo ft h eh y p o t r i c h i d ac i l i a t et e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l ai s o b s e r v e db yu s i n gs c a n n i n ge l e c t r o nm i c r o s c o p y t h er e s u l t ss h o wt h a tt h es t r u c t u r a l m o d eo ft h e f r o n t a lc i r r io ft e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l aw a ss i m i l a rt ot h a to f o x y t r i c h i d s t h em i d v e n t r a lc i r r u sl i n e ，c o n s i s t i n go f8z i g z a g d i s t r i b u t e dv e n t r a lc i r r i ， w a sl o c a t e di nt h em i d d l eo ft h ev e n t r a ls u r f a c e d u r i n gt h em o r p h o g e n e s i so f c i l i a t u r e ，t h eo l dc i l i ae x p e r i e n c e dt h ep r o c e s so fg r a d u a ld e g e n e r a t i o nw h e nt h en e w s t r u c t u r eb e g a nt oo c o l r ea n dd e v e l o p e as t u d yo fr e s t i n gc y s t si nt e r r i t r i c h a s t r a m e n t i c o l ah a sb e e nm a d eb yu s i n gs c a n n i n ge l e c t r o nm i c r o s c o p y i ti sr e v e a l e d v i 摘要 t h a tt h ec y s tw a l lo ft e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l ai sc o m p o s e do ft w ol a y e r sn a m e df r o m o u t s i d et oi n s i d e ：e c t o e y s t ( e c ) a n de n d o e y s t ( e n ) t h ee ci s c o m p o s e do fm a n y b a m b o o l i k et r a n s p a r e n ts q u a r ef i b r o u ss t r u c t u r e s t h e ya r et h i na n dr e g u l a r b u tt h e e ni st h i c ka n dt r a n s p a r e n t t h er e s u l t si n d i c a t et h a tt h eo l dc i l i ap l a y sa ni m p o r t a n t r o l en o to n l yi nt h eo c c u r r e n c eo ft h ec i l i a t u r ep r i m o r d i a ，b u ta l s oi nt h es t r u c t u r a l d e v e l o p m e n to fn e w c i l i a t h e r ea r eal o to f s p i n e - l i k es t r u c t u r e sa tt h et e r m i n a lp a r t o ff r o n t a ls u r f a c er e g i o nw h e r en oc i l i u mi sp r e s e n t a tt h er e m a i n i n gn o n - c i l i a t e d s u r f a c er e g i o no ft e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l a , t h e r ed i s t r i b u t e dal a r g en u m b e ro f u n e v e n l ya r r a n g e ds h a l l o wp i t s t h e s em o r p h o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c sm i g h tb et h e a d a p t i v ec h a n g et ot h ei n t e r a c t i o nb e t w e e nt h ec i l i a t ea n dt h es o i le n v i r o n m e n t t h e f o r m a t i o no ft h er e s t i n gc e l l si sa l s oar e s u l tt oa d a p tt ot h es o i le n v i r o n m e n t 3t h ei n t e r n a lu l t r a s t r u c t u r eo ft h en o r m a lc e l la n dr e s t i n gc y s to ft e r r i t r i c h a s t r a m e n t i c o l a t h ei n t e r n a lu l t r a s t r u c t u r eo ft e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l aw a so b s e r v e db yu s i n g t r a n s m i s s i o ne l e c t r o nm i c r o s c o p y w ef o u n dt h a ti t ss u r f a c em e m b r a n ew a sc o m p o s e d o ft h ep l a s m am e m b r a n ea n dt h ec e l lm e m b r a n e w ea l s oo b s e r v e dt h a tt h e r ew a s d e n s ef i b e rb u n d l e sc l o s et ov e n t r a ls u r f a c em e m b r a n ei nt h et e r r i t r i c h a s t r a m e n t i c o l a i t sl i p s ，v e n t r a lc i r r ia n dm o u t hc o r t e xs u r f a c em e m b r a n eg a t h e r e d u n d e rt h ef o r m a t i o no ft h i c kf i b e rb u n d l eo rf i b e rt a p e t h e s ef i b e rb u n d l es t r u c t u r e s a l l o w e dt e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l a s u r f a c em e m b r a n et ob er e i n f o r c e dc a t e r p i l l a rt o a d a p ti t sc r a w l i n gl i f ei nt h es o i l t h ec y s to ft e r r i t r i c h as t r a m e n t i c o l ac o n t a i n e dl a r g e a m o u n t so fm i t o c h o n d r i ac y s tc a t e r p i l l a r sa n df o o db u b b l e s ，w h i c hm i g h tb er e l a t e dt o f o o dd i g e s t i o na n de n e r g ys t o r a g e l a r g e s tn u c l e a re l o n g a t e dc y l i n d r i c a l ，n u c l e a r m e m b r a n ew a sn o ts m o o t h ，s h o w i n gw a v y c h r o m a t i ng r a n u l e ss c a t t e r e di n l a r g e n u c l e i ，a r r a n g e dr a t h e rs l o p p y , a n ds o m ef a m i l yr e u n i o n i n t oah i g he l e c t r o nd e n s i t yo f t h es i z e so ft h ec l u m p s ，n u c l e o l u sh i g hn u m b e ro fs c a t t e r e dl a r g en u c l e u s ；m e m b r a n e w a sd i v i d e di n t ot w ol a y e r s ，i n n e rn u c l e a rm e m b r a n ea n do u t e rn u c l e a rm e m b r a n e i n n e rn u c l e a rm e m b r a n ew a st h i c k e r , b u to u t e rn u c l e a rm e m b r a n ew a sv e r yt h i n t h e n u c l e a rp o r e l i k es t r u c t u r em a d et h en u c l e a rm e m b r a n ei n t ot h ed o t t e dl i n e a f t e rt h e f o r m a t i o no fc y s t s ，c y s tw a l lb e c a m et w ol a y e r s t h i sk i n do fs t r u c t u r eh a dn o tb e e n f o u n di no t h e rc i l i a t e s m e m b r a n ec o n s i s t so ft w ol a y e r so fi t sc o m p o s i t i o n d u r i n g v 摘要 h o l l o wa r e a ，o fw h i c ht h e r ew e r em a n ys m a l lm e m b r a n es e p a r a t i o n ，w a st h e i ru n i f o r m s q u a r ec h a m b e r t h e ya r r a n g e di nn e a tr o w sl i k eas q u a r ew i t hac i r c l ec i r c u i ti nc e l l s p e r i p h e r a l c y s t sh a v et w oa u t o p h a g i cv a c u o l e s ：o r g a n e l l ea u t o p h a g i cv a c u o l e s ，a n d c y t o p l a s m i ca u t o p h a g i cv a c u o l e s 4t h e c o m p a r i s o no fm a c r o n u c l e a rd n af r o mn o r m a lc e l l sa n dr e s t i n gc y s t so f t h em a c r o n u c l e a rd n af r o mn o r m a lc e l l sa n d r e s t i n gc y s t so ft e r r i t r i c h a s t r a m e n t i c o l aw a sc o m p a r a t i v e l ya n a l y z e db yu s i n gr a p d t e c h n o l o g yi nt h ep a p e r t h er e s u l t ss h o w e dt h a tn of r a g m e n t sp r o d u c e du s i n g2r a n d o mp r i m e r s ，1 3 4 f r a g m e n t sw e r ea m p l i f i e df r o m m a c r o n u c l e a rd n a so ft h en o r m a lc e l l sa n dt h e r e s t i n gc y s t su s i n