影響淀粉酶酶活性的因素.doc

影響淀粉酶酶活性的因素一、 目的 了解淀粉在水解過程中遇碘后溶液顏色的變化。觀察溫度、pH、激活劑與抑制劑對淀粉酶活性的影響。二、 原理人唾液中淀粉酶為淀粉，在唾液腺細胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉水解，經過一系列被稱為糊精的中間產物，最后生成麥芽糖和葡萄糖。淀粉紫色糊精紅色糊精麥芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、紅色糊精遇碘后分別呈藍色、紫色與紅色，麥芽糖、葡萄糖遇碘不變色。唾液淀粉酶的最適溫度為3740，最適pH為6.8。偏離此最適環(huán)境時，酶的活性減弱。低濃度的氯離子能增加淀粉酶的活性，是它的激活劑。銅離子等金屬離子能降低該酶的活性，是它的抑制劑。三、 試劑和儀器 1 碘液：稱取2g碘化鉀溶于5ml蒸餾水中，再加1g碘。待碘完全溶解后，加蒸餾水295ml，混合均勻后貯存于棕色瓶內。21淀粉溶液：稱取1克可溶性淀粉放入小燒杯中，加少量蒸餾水做成懸浮液。然后在攪拌下注入沸騰的蒸餾水中，繼續(xù)煮沸1分鐘，冷后再加蒸餾水定容至100ml。30.4的鹽酸溶液40.1的乳酸溶液。51的碳酸鈉溶液。6 的氯化鈉溶液。7 的硫酸銅溶液。 8儀器：試管 試管架 吸管 玻璃棒 白磁板 燒杯 漏斗 恒溫水浴 量筒 冰浴四、 操作步驟1淀粉酶液的制備：實驗者先用蒸餾水嗽口，然后含一口蒸餾水于口中，輕嗽一、二分鐘，吐入小燒杯中，用脫脂棉過濾，除去稀釋液中可能含有的食物殘渣。最后將數(shù)人的稀釋液混合在一起，再進行過濾，以避免個體差異。2pH對酶活性的影響取4支試管，分別加入0.4%鹽酸（pH1），0.1乳酸（pH5），蒸餾水（pH7），與1碳酸鈉（pH9）各2毫升，再向以上四支試管中各加入2毫升淀粉溶液及淀粉酶液?；旌蠐u勻后置于37水浴中保溫。2分鐘后，從蒸餾水試管中取出一滴溶液，置于白磁板上，用碘液檢查淀粉的水解程度，待蒸餾水試管內的溶液遇碘不再變色后，取出所有的試管，各加碘液2滴，觀察溶液顏色的變化。根據(jù)觀察結果說明pH對酶活性的影響。3溫度對酶活性的影響取3支試管各加入3毫升2淀粉溶液 ，另取三支試管，各加入1毫升淀粉酶液。將6支試管分為三組，每組中盛放淀粉溶液與淀粉酶液的試管各1支。三組試管分別置于0、 37、70的水浴中，5分鐘后將各組中的淀粉溶液到入淀粉酶液中，繼續(xù)保溫。2分鐘后從37試管中取出一滴溶液，置于白磁板上，用碘液檢查淀粉的水解程度，待37試管內的溶液遇碘不再變色后，取出所有的試管，各加碘液2滴，觀察溶液顏色的變化。根據(jù)觀察結果說明溫度對酶活性的影響。4激活劑與抑制劑對酶活性的影響取3支試管按下表的規(guī)定加入各種試劑?；靹蚝笾糜?7的水浴中保溫，1分鐘后從1號試管中取出一滴溶液，置于白磁板上，用碘液檢查淀粉的水解程度，待一號試管內的溶液遇碘不再變色后，取出所有的試管，各加碘液2滴，觀察溶液顏色的變化。根據(jù)觀察結果說明激活劑與抑制劑對酶活性的影響。 管號1231氯化鈉（ml）1%硫酸銅（ml）蒸餾水（ml）淀粉酶液（ml）1淀粉液（ml）123123123五、實驗結果：pH值對酶的活力的影響項目顏色水（pH=7）（pH=9）（pH=1）乳酸（pH=5）淡黃色深紫色藍色淺藍色結果分析：由于淀粉水解，經過一系列被稱為糊精的中間產物，最后生成麥芽糖和葡萄糖。淀粉紫色糊精紅色糊精麥芽糖、葡萄糖，并且淀粉、紫色糊精、紅色糊精遇碘后分別呈藍色、紫色與紅色，麥芽糖、葡萄糖遇碘不變色。于是從上圖的結果可以看出pH為7這個pH段的時候，淀粉酶的活力最強?？梢姡矸勖赣幸粋€最適的酸堿度。這是因為在過酸和過堿的環(huán)境下，溶液中的氫離子或者氫氧根例子會進攻酶蛋白分子，使其維持高級結構的化學鍵（例如氫鍵，范德華力）破壞，高級結構無法維持穩(wěn)定，于是解構，最終是蛋白質分子失去活性，活力減弱。激活劑對酶的影響激活劑顏色水淡色明藍深紫色不變結果分析：從上面結果可以看出，在有鈉離子存在的情況下淀粉有一點的水解，在有銅離子存在的情況下完全沒有水解，在純水的環(huán)境中，酶將淀粉完全水解。同時，結合資料，水為對照組可以了解到鈉離子對酶有一點的抑制作用，銅離子就將酶完全一致了，可見此淀粉酶為金屬依賴性的酶，不同的離子對酶的活性中心有抑制的作用，改變其構象影響了活性。溫度對酶的影響溫度顏色0攝氏度37攝氏度70攝氏度深紫色黃色深紫結果分析：從上表可以看出，在37攝氏度的時候，酶水解淀粉的能力最強。由于溫度體系中隨著溫度的升高，酶蛋白分子中維持構象的鍵由于分子間的碰撞和分子內離子的熱運動由于能量的升高而掙脫互