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粗糙脈孢菌順序四分子分析,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解粗糙脈孢菌的生活周期及特性 學(xué)習(xí)順序四分子的遺傳學(xué)分析方法 計(jì)算基因與著絲點(diǎn)之間的距離,粗糙脈孢菌,粗糙脈孢霉(Neurospora.crassa)屬于球殼目(Sphaeriales)的一種真菌,菌絲多核,附有分生孢子。野生型可分離出營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株,有性生殖形成梨形的子囊果,產(chǎn)生包含8個(gè)子囊孢子的子囊。子囊孢子為黑色,直線排列。主要在土壤中和禾本料植物上,尤其在玉米芯和棉籽殼上,是食用菌菌種最大的危害之一。 1927年BODodge 研究其生活史和孢子的形成 1932年CCLindegren 把它用做遺傳材料,用于分離交配型因子的研究 1941年GWBeadle和ELTatum分離出突變株,開展以基因與酶假說為基礎(chǔ)的研究。 后來分離出很多突變株,制作出與n=7的染色體數(shù)相對(duì)應(yīng)的連鎖圖,被應(yīng)用于突變機(jī)制、重組機(jī)制、基因的微細(xì)結(jié)構(gòu)、互補(bǔ)性等的研究,為遺傳學(xué)發(fā)展做了重要貢獻(xiàn)。,粗糙脈孢菌作為遺傳材料的優(yōu)勢(shì) 后代多,樣本大,統(tǒng)計(jì)分析誤差小 生活周期短 易培養(yǎng),易篩選突變型 單倍體,不存在顯隱問題 孢子按順序排列在子囊中,粗糙脈孢菌的生活周期,第一次分裂分離子囊,+ + + + - - - -,非重組型子囊:目的基因與著絲粒之間未發(fā)生重組,+,+,+,+,+,+,+,+,_,_,_,_,_,_,_,_,MI MII Mt,順序四分子分析用于著絲粒作圖,+ + - - + + - - - - + + - - + + - + + + + - - + + - - - - + +,重組型子囊:目的基因與著絲粒之間發(fā)生重組,第二次分裂分離子囊,+,_,+,+,+,+,+,+,+,_,_,_,_,_,_,_,_,+,+ + - - - - + +,例子,基因與著絲點(diǎn)間距離的計(jì)算,其它分離子囊,基因轉(zhuǎn)換:一個(gè)基因在聯(lián)會(huì)過程中受到等位基因的影響而發(fā)生變化,基因轉(zhuǎn)換總是伴隨著染色體之間的交換。,實(shí)驗(yàn)材料,粗糙脈孢菌(Neurospora crassa) 野生型菌株,Lys+,接合型為A,分生孢子呈粉紅色 缺陷型菌株, Lys-,接合型為a,分生孢子呈白色,實(shí)驗(yàn)步驟,1、雜交接種與培養(yǎng): 野生型菌株(Lys+,A) 缺陷型(Lys-,a) 2、壓片觀察子囊:(注意觀察時(shí)期) 1)將附有子囊果的濾紙放入裝有來蘇爾溶液的培養(yǎng)皿中 2)取一張載玻片,滴1-2滴來蘇爾,用接種針將子囊果挑出,放在載玻片上 3)蓋上另一張載玻片,用手指壓片,將子囊果壓破 4)顯微鏡觀察,統(tǒng)計(jì)各種類型子囊的數(shù)量,每人統(tǒng)計(jì)200個(gè)左右的子囊,一個(gè)子囊果中散出30-40個(gè)子囊,實(shí)驗(yàn)報(bào)告,品系,性狀,思考,假
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