原料藥質(zhì)量研究(上海藥檢所_謝沐風(fēng)).ppt

謝沐風(fēng) 上海市食品藥品檢驗(yàn)所 ,原料藥注冊(cè)與生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)檢查培訓(xùn)班,請(qǐng)大家將手機(jī)調(diào)至“振動(dòng)”檔！ 謝謝您的配合！,工 作 簡(jiǎn) 歷, 1998年至今 在本所化學(xué)室工作。經(jīng)歷了 “1998年2002年的強(qiáng)仿期”和“20032006仿制藥瘋狂期” 2003年8月 2004年2月 赴日本國(guó)立醫(yī)藥品食品衛(wèi)生研究所藥品部（相當(dāng)于我國(guó)中檢所化藥室）進(jìn)修。 發(fā)表了多篇方法類、思路類文章，引起業(yè)內(nèi)矚目與同仁共鳴。 (1) 如何建立HPLC(TLC)法測(cè)定有關(guān)物質(zhì)方法； (2) 如何建立HPLC法測(cè)定含量方法；, 與企業(yè)和研發(fā)公司交流經(jīng)歷 走訪/核查過全國(guó)上百家制藥企業(yè)； 時(shí)常與同仁們相互交流、切磋； 深諳目前國(guó)內(nèi)制藥企業(yè)技術(shù)現(xiàn)狀與薄弱環(huán)節(jié)。 2009年伊始、在國(guó)內(nèi)知名藥學(xué)網(wǎng)站 丁香園“藥物制劑版”上創(chuàng)立“溶出度研究”子版，引起業(yè)內(nèi)矚目。,我們已經(jīng)走得太遠(yuǎn)，以至于忘記了為什么而出發(fā)。 黎巴嫩著名詩(shī)人紀(jì)伯倫（18831931）,工 作 感 悟,本 人 體 會(huì), 工作中一定要注重思考，帶著問題去學(xué)習(xí)、有的放矢地去攻讀，多觀察、多領(lǐng)會(huì)，日積月累、潛移默化之中就會(huì)水到渠成。 思維要開放、活躍，不要固步自封、按部就班，因循守舊。 一定要不斷思考，注意查詢文獻(xiàn)，收集各方面信息，培養(yǎng)自身的專業(yè)素養(yǎng)與專業(yè)敏感度，不要怕遇到問題，越是遇到問題、將其解決，就越能不斷提高與進(jìn)步。,注重培養(yǎng)個(gè)人的專業(yè)素養(yǎng)與敏感度,/ 國(guó)家新藥審評(píng)中心網(wǎng)站 / 國(guó)家局網(wǎng)站 / 國(guó)家藥典委員會(huì)網(wǎng)站 /index.htm 中國(guó)知網(wǎng) 維普數(shù)據(jù)庫(kù) 丁香園專業(yè)網(wǎng)站,切忌：閉門造車、悶頭蠻干！,很榮幸此次來到京城與各位同仁相互交流、學(xué)習(xí)！ 感謝國(guó)家藥監(jiān)局培訓(xùn)中心搭建平臺(tái)！, 寄望大家多思考、多提問！ 寄望能學(xué)以致用，為大家工作獻(xiàn)計(jì)獻(xiàn)策、呈上綿薄之力！,【溶解度】 會(huì)因結(jié)晶溶劑的不同導(dǎo)致結(jié)果的差異性，一般不做硬性規(guī)定，酌情處理。只是操作時(shí)樣品一定要研細(xì)后進(jìn)行。 【晶型】 如研究表明：各晶型具有相同表觀溶解度，或者各晶型皆易溶于水，此時(shí)各晶型一般不會(huì)影響藥物的體內(nèi)生物利用度，便無需擬定。 如各晶型具有不同表觀溶解度，即有屬于低溶解性的晶型，此時(shí)則應(yīng)在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中擬定晶型檢測(cè)。一般采用X-射線衍射法。有時(shí)亦能采用紅外予以明辨。 列舉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中已有擬訂的“阿德福韋酯”和“那格列奈”實(shí)例。（儀器校正）,【紅外鑒別】 觀測(cè)2500cm-1 - 400cm-1波數(shù)段間8大主峰波數(shù)。峰間高低可以不一。 個(gè)別小峰允許存在，是雜質(zhì)存在的體現(xiàn)。 【熒光分析法】 響應(yīng)值不穩(wěn)定，有時(shí)會(huì)波動(dòng)較大，不建議使用。,【熔點(diǎn)測(cè)定法】 試驗(yàn)結(jié)束后切勿立即切斷電源，設(shè)置為室溫，使其自然降溫，之后再關(guān)閉電源。 熔距越短或終熔點(diǎn)越接近高限、純度越高。 【紫外-可見分光光度法】 比色法測(cè)定時(shí)、一定要平行操作，測(cè)定時(shí)迅即完成，切忌等待吸收度值穩(wěn)定后再行記錄！,【旋光度測(cè)定法】 溫控尤為重要！先將溶劑置于該溫度水浴中，隨后采用該溶劑快速配制溶液，定容后立即測(cè)定。 【氧瓶燃燒法】 樣品一定要燃燒完全。若氧氣充滿、尚無法燃盡，可將樣品量減半，在其后的測(cè)定中再將濃度增加一倍，即可。,【溶液的澄清度與顏色、氯化物、硫酸鹽、重金屬檢查等】 建議配制梯度對(duì)照液，這樣可對(duì)樣品進(jìn)行一個(gè)全面、綜合分析。 【熾灼殘?jiān)鼨z查法】 熾灼后放置于干燥器內(nèi)的時(shí)間不得少于1小時(shí)，否則稱重不穩(wěn)。 【崩解時(shí)限】 膠囊劑有時(shí)會(huì)出現(xiàn)膠囊殼存留于網(wǎng)底的情況，可將囊殼取出，若其中無內(nèi)容物，亦可判斷為合格。,【干燥失重和水分】,(1) 一些緩慢降解的物質(zhì)、不易采用恒重，規(guī)定時(shí)間。一般105、3小時(shí)肯定已可以！ 典型案例鹽酸西布曲明，見下。 (2) 帶有結(jié)晶水的藥物，盡量采用卡氏法測(cè)定。,其中的環(huán)丁基較為“脆弱”，不斷緩慢分解。應(yīng)采用卡氏法測(cè)定。,殘留溶劑研究思路, 研究原則：合成過程中使用到的有機(jī)溶劑均需建立測(cè)定方法、并予以研究測(cè)定。 觀測(cè)樣品測(cè)定結(jié)果：申報(bào)3批樣品測(cè)定結(jié)果說明工藝穩(wěn)定性。 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)擬定原則：除第一類溶劑外、“未檢出的溶劑”可以不擬定，僅擬定最后一步重結(jié)晶溶劑。 測(cè)定方法：根據(jù)研究檢測(cè)結(jié)果，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方法完全可以與研究時(shí)方法不同。,殘留溶劑研究思路, 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)擬定原則：如僅殘留有重結(jié)晶溶劑、且為低沸點(diǎn)（如乙醇、丙酮等），完全可采用105干燥失重方法予以替代。從而省略掉氣相測(cè)定，且干燥失重限度可酌情放寬。 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是一個(gè)不斷完善的過程： 列舉“自套枷鎖”、“事倍功半”實(shí)例！ 列舉阿法骨化醇無需研究測(cè)定實(shí)例！,氣相色譜法測(cè)定時(shí)應(yīng)注意事項(xiàng)(1) 強(qiáng)烈建議男同志從事此項(xiàng)工作。 將對(duì)照品溶液濃度配制為限度點(diǎn)。 對(duì)于二氯甲烷、三氯甲烷采用氫火焰檢測(cè)器(FID)勉為其難、應(yīng)采用電子捕獲檢測(cè)器(ECD)。如要強(qiáng)行檢測(cè)，可采用的辦法有：直接進(jìn)樣、加大流速，使峰形便尖銳、從而提高峰面積積分精密度。 供試品溶液一定要全部溶解。 對(duì)于一些高沸點(diǎn)和低沸點(diǎn)的殘留溶劑，不推薦采用頂空法進(jìn)樣！ 盡可能建立內(nèi)標(biāo)法、而非外標(biāo)法。,氣相色譜法測(cè)定時(shí)應(yīng)注意事項(xiàng)(2) 對(duì)照品溶液配制法（引申至對(duì)照品為油狀時(shí)）。 直接進(jìn)樣法與頂空法的優(yōu)缺點(diǎn)比較。 定性時(shí)、多根色譜柱使用的意義。 色譜柱選擇的一定要遵循“極性相似”原理。 直接法進(jìn)樣樣品溶液后，進(jìn)樣針極易堵塞。自動(dòng)進(jìn)樣器時(shí)設(shè)定幾針溶劑，沖洗時(shí)多洗幾次。試驗(yàn)結(jié)束后用乙醇浸泡進(jìn)樣針。,容量分析法測(cè)定含量,(1) 滴定液的標(biāo)化與貯藏 氫氧化鈉滴定液標(biāo)化后一定要分成小塑料瓶、密閉包裝。使用時(shí)，酌情（針對(duì)放置時(shí)間和樣品之類）再標(biāo)化一份即可。因其極易吸收空氣中的二氧化碳，使校正因子降低，消耗過多滴定液，從而使結(jié)果偏高，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)高于101.0%情況。 高氯酸滴定液應(yīng)臨用現(xiàn)標(biāo)。使用當(dāng)天標(biāo)化三份，取均值即可。 不常用滴定液建議購(gòu)買，如甲醇鈉滴定液等。,容量分析法測(cè)定含量,(2) 滴定液的消耗體積 針對(duì)不同消耗體積采用不同規(guī)格滴定管(10/26/50ml) 對(duì)于消耗量小于誤差要求的最小體積時(shí)，可采用稀釋滴定液、增加消耗體積的辦法；或采用電位滴定儀。 (3) 指示劑使用注意點(diǎn) 部分指示液配制后，如放置時(shí)間過久，其變色會(huì)遲鈍，導(dǎo)致消耗體積過大，結(jié)果偏高；故配制后酌情放入冰箱中。,容量分析法測(cè)定含量,(4) 操作中的注意事項(xiàng) 對(duì)于采用指示劑法測(cè)定的操作，只要有空白試驗(yàn)，樣品變色后的色澤一定要與空白色澤一致，以消除系統(tǒng)誤差。 (5) 容量分析法與HPLC法介紹（引申至對(duì)照品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)） 容量分析法：專屬性差、人為因素較強(qiáng)；但省時(shí)省力。 HPLC法：專屬性強(qiáng)；但定量結(jié)果會(huì)因波長(zhǎng)不同存在較大偏差，因雜質(zhì)與主成分的響應(yīng)因子不同,電位滴定法測(cè)定含量, 對(duì)于指示劑變色難以辨明時(shí) 樣品溶液變色存在干擾（有輔料或沉淀存在等） 消耗體積很少、無法采用滴定管定量。 雜質(zhì)和主成分對(duì)照品的標(biāo)化方法。 設(shè)定的滴定參數(shù)應(yīng)使滴定曲線呈現(xiàn)平滑，以避免滴 定終點(diǎn)的誤判。即如何確定合適的“閾值”：先全程滴 定，根據(jù)突躍變化情況，確定閾值后再次滴定，尤其 是進(jìn)行兩個(gè)突躍點(diǎn)的滴定時(shí)（引申至新版藥典）。,高效液相色譜法應(yīng)用時(shí)經(jīng)常出現(xiàn)的問題, 柱溫箱一定要配制。試驗(yàn)溫度建議在30-50。清洗溫度可高于試驗(yàn)溫度5。 色譜柱清洗： 對(duì)于正相、實(shí)驗(yàn)結(jié)束用流動(dòng)相再?zèng)_洗半小時(shí)即可。 對(duì)于反相，除非流動(dòng)相采用單純的甲醇/乙腈-水，其他所有流動(dòng)相皆建議先用純水沖洗半小時(shí)（流速1.0ml/min），再改用20%甲醇沖洗半小時(shí)，隨后取下、兩頭密閉即可。絕不推薦, 液相色譜儀：絕不建議為節(jié)約乙腈/甲醇，而采用兩個(gè)泵，將水相與有機(jī)相分別注入混合的方式（即便配置了脫氣機(jī)）。一定要將兩相按比例混合后脫氣過濾，采用一個(gè)泵注入，且清洗時(shí)一定就清洗使用泵，不建議采用另一個(gè)泵將清洗液注入（重點(diǎn)講述?。?過濾膜一定要采用混相膜。 正相流動(dòng)相無需過濾、混合均勻后超聲即可。,高效液相色譜法應(yīng)用時(shí)經(jīng)常出現(xiàn)的問題, 梯度洗脫時(shí) 最理想方式： A相位高比例的水相兌低比例的有機(jī)相；B相為低比例的水相兌高比例的有機(jī)相； 其次：A相位高比例的水相兌低比例的有機(jī)相；B相皆為有機(jī)相。 絕不建議A相位純水相、B相位純有機(jī)相，即便質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)如此擬定，采用一元一次函數(shù)，將其轉(zhuǎn)換成第二種情況，否則極易出現(xiàn)基線飄動(dòng)、無法準(zhǔn)確積分的現(xiàn)象。,高效液相色譜法應(yīng)用時(shí)經(jīng)常出現(xiàn)的問題, 梯度洗脫時(shí)，必須先行測(cè)定空白溶劑峰，應(yīng)基線平穩(wěn)、溶劑峰出峰在前。確認(rèn)色譜柱內(nèi)清洗干凈后再測(cè)定樣品。 以確保有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)時(shí)，雜質(zhì)的準(zhǔn)確測(cè)定。,高效液相色譜法應(yīng)用時(shí)經(jīng)常出現(xiàn)的問題,高效液相色譜法測(cè)定含量,(1) 對(duì)照品溶液配制2份（2份粉末） 分別進(jìn)樣3針，計(jì)算校正因子f=C/A，隨后計(jì)算f的RSD，小于2.0%即認(rèn)為2份對(duì)照品溶液配制均無誤、且儀器已穩(wěn)定。取f均值測(cè)定樣品。 (2) 樣品溶液亦配制2份，每份進(jìn)樣一針，兩份百分含量差值在2.0%以內(nèi)即可。,高效液相色譜法測(cè)定含量,(3) 待全部樣品檢測(cè)結(jié)束后（無所謂n針，即便運(yùn)轉(zhuǎn)了一天、亦無須擔(dān)憂），任取一份對(duì)照溶液回進(jìn)一針，計(jì)算含量（濃度），應(yīng)在理論濃度偏差的2.0%以內(nèi)，便可確保檢測(cè)過程中儀器性能的穩(wěn)定。 (4) 如原方法為內(nèi)標(biāo)法，秉承藥審中心提出的“仿產(chǎn)品不是仿標(biāo)準(zhǔn)”理念，一定要改為外標(biāo)法！除非前處理極為繁瑣、較易損失時(shí)。,含量測(cè)定濃度和色譜條件如何建立 濃度不要與有關(guān)物質(zhì)濃度一致；一般為1/101/50。便于過濾（對(duì)于制劑）、雜質(zhì)干擾減少、積分準(zhǔn)確。 色譜條件可與有關(guān)物質(zhì)不一致（如有關(guān)物質(zhì)為梯度洗脫或保留時(shí)間很長(zhǎng)），更加科學(xué)化、人性化。 波長(zhǎng)不是最大吸收波長(zhǎng)亦可、選用末端吸收。 要注意樣品粉末占有一定體積時(shí)引起的誤差。,薄層色譜法測(cè)定有關(guān)物質(zhì),(1) 盡可能使用商品化薄層板、不建議自行鋪制。 (2) 設(shè)置梯度對(duì)照(1.0%、0.5%、0.2%和0.1%，通過點(diǎn)樣量來實(shí)現(xiàn)，方便快捷、事半功倍)；實(shí)現(xiàn)“半定量”。 (3) 0.1%斑點(diǎn)如顯現(xiàn)不出，加大點(diǎn)樣量。 (4) 主斑點(diǎn)如超載、“斷腰”，可適當(dāng)減小點(diǎn)樣量。 (5) 顯色劑盡可能新鮮配制。 (6) 觀測(cè)時(shí)，建議增加翻轉(zhuǎn)觀測(cè)，即透過玻璃面觀測(cè)。,高效液相色譜法測(cè)定有關(guān)物質(zhì),(1) 每批樣品配制1份，即可。 (2) 多批樣品同時(shí)檢測(cè)時(shí)，選用粉末量最少的樣品稀釋制成自身對(duì)照溶液即可，絕對(duì)無需每一樣品均稀釋成自身對(duì)照溶液。 (3) 對(duì)照溶液連續(xù)進(jìn)樣3針，計(jì)算主峰峰面積的RSD，小于2.0%即認(rèn)為儀器穩(wěn)定、積分無誤。取峰面積均值用于樣品雜質(zhì)峰比較。,高效液相色譜法測(cè)定有關(guān)物質(zhì),(4) 測(cè)定空白溶劑（梯度洗脫時(shí)一定要先行測(cè)定） (5) 每一樣品進(jìn)樣一針，對(duì)雜質(zhì)峰進(jìn)行積分。積分時(shí)注意事項(xiàng)： 最小峰面積：設(shè)定為對(duì)照溶液主峰面積的1/10-1/50（講述原理） 斜率與峰寬：與對(duì)照溶液積分參數(shù)相同。 技巧：對(duì)照溶液稀釋后，若主峰面積呈線性（一般均呈線性），歸一化法計(jì)算結(jié)果與自身對(duì)照法測(cè)定結(jié)果基本一致（相差在0.02%以內(nèi)），可用歸一化直接觀測(cè)。,方法學(xué)驗(yàn)證中各項(xiàng)指標(biāo)的深度剖析,一、線性試驗(yàn),主成分含量測(cè)定 以測(cè)定濃度為100% ，50%120%之間選取5個(gè)點(diǎn)即可。 溶出（釋放）度測(cè)定 以釋放量的10%120%間選取5個(gè)點(diǎn)即可。 雜質(zhì)含量用雜質(zhì)對(duì)照品準(zhǔn)確測(cè)定 以雜質(zhì)限度為100% ，50%120%之間選取5個(gè)點(diǎn)即可。,測(cè)定結(jié)果： 1）闡述如何看待截距和斜率、如何應(yīng)用。 2）誤差在哪里，應(yīng)用時(shí)的注意事項(xiàng)。 3）為什么沒有不成線性的？通常C、H、O、N結(jié)構(gòu)，紫外監(jiān)測(cè)器決定。 個(gè)別化學(xué)鍵所致。梯度洗脫時(shí)，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)不成線性。 4）都成線性、為何還要做？最小二乘法的原理知曉。何種情況不呈線性？,唑 來 磷 酸 結(jié) 構(gòu) 式,不呈線性情況： 1）分子結(jié)構(gòu)式怪異，如唑來膦酸。 2）梯度洗脫，所以此時(shí)規(guī)定柱效無意義。 3）主成分在色譜柱上幾乎無保留，保留時(shí)間為“死時(shí)間”（如氫溴酸右美沙芬的測(cè)定） 4）濃度過高時(shí)、檢測(cè)器或色譜柱超載。,引申使用： 1）有關(guān)物質(zhì)測(cè)定 歸一化法和自身對(duì)照法的相互妙用。 2）緩釋制劑溶出度測(cè)定，對(duì)照品濃度設(shè)定為中間濃度。舉例說明。 3）回收率試驗(yàn)為何做80%120%即可？亦及樣品濃度與對(duì)照品濃度接近到何等程度的理解。 4）國(guó)內(nèi)只注重相關(guān)系數(shù)，不注重截距。,二、精密度試驗(yàn),重復(fù)性試驗(yàn)：連續(xù)進(jìn)樣6次。 中間精密度試驗(yàn)和重現(xiàn)性試驗(yàn)通過“耐用性試驗(yàn)中的溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)”來體現(xiàn)。 濃度極低時(shí)才會(huì)不理想，加大進(jìn)樣量。 色譜峰形極為重要，對(duì)稱性、柱效等參數(shù)。加大柱溫、增加流動(dòng)相中有機(jī)相比例，使被測(cè)物質(zhì)峰盡快出峰。,三、準(zhǔn)確度試驗(yàn) 用回收率來衡量,作法：在80%120%間選擇3點(diǎn)或5點(diǎn)，原因是由外標(biāo)一點(diǎn)法決定的。 已知雜質(zhì)、且有雜質(zhì)對(duì)照品的，可采用加入法，即加樣回收率來評(píng)價(jià)。 一般情況下，只要空白輔料無干擾，回收率均是良好的！,四、專屬性,有關(guān)物質(zhì)為主，其他檢測(cè)項(xiàng)目（含量）基本上均參照有關(guān)物質(zhì)。 有關(guān)物質(zhì)的驗(yàn)證，采用中間體和降解產(chǎn)物（確認(rèn)結(jié)構(gòu)后人工合成）來驗(yàn)證與主成分的分離。 詳述強(qiáng)破壞試驗(yàn)的宗旨與內(nèi)涵！, 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用溶液配制法 在100濃度的主成分溶液中加入1%濃度的雜質(zhì)對(duì)照品，以模擬樣品中有可能存在的狀態(tài)。 介紹配制方法：先配制雜質(zhì)貯備液，再用供試品溶液（或濃的對(duì)照品溶液）來稀釋，簡(jiǎn)便、易行！ 存在問題：配制相同濃度，測(cè)定樣品時(shí)，主成分峰驟然加大，將雜質(zhì)峰覆蓋。,專屬性試驗(yàn)驗(yàn)證圖譜, 強(qiáng)破壞試驗(yàn)的目的 驗(yàn)證藥品在遭遇了極端的氣候環(huán)境條件下產(chǎn)生的雜質(zhì)，在所建立的色譜條件下是否能夠分離、測(cè)定。 破壞追求的目標(biāo)：可產(chǎn)生降解產(chǎn)物的條件下，主成分保留7080%量。 同時(shí)采用DAD 檢測(cè)主峰純度，驗(yàn)證其中不含雜質(zhì)峰。 保留時(shí)間的設(shè)定 經(jīng)過上述方法學(xué)認(rèn)證后，確定供試品溶液的保留時(shí)間，通常以洗脫出全部雜質(zhì)和經(jīng)強(qiáng)力破壞試驗(yàn)出的雜質(zhì)，規(guī)定至主成分保留時(shí)間的幾倍為止。, 強(qiáng)力破壞試驗(yàn)（世界衛(wèi)生組織公布的最新方法） 熱破壞 取原料，加溶劑配成1:1溶液后，在60放置 110天。 高濕破壞 取原料固體適量，放置在75%濕度下110天。 強(qiáng)酸破壞 取原料適量，用0.1mol/L鹽酸溶液配制成2:1 溶液后，放置1-10天。 強(qiáng)堿破壞 取原料適量，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液配制成 2:1溶液后，放置1-10天。 氧化破壞 取原料適量，用3%過氧化氫溶液配制成1:1溶 液后，放置1-3天。 光解破壞 取原料適量，置紫外燈下放置1-10天。 金屬離子破壞 加入0.05mol/LFe2+ 或Cu2+。,四、檢測(cè)限, 信噪比的三倍 純屬“紙上談兵”，實(shí)際測(cè)定中根本用不上。 是相對(duì)值，不是絕對(duì)值。是相對(duì)于供試品溶液濃度的多少分之一而言，一般至少要在5000倍以上。,(1)最大進(jìn)樣量 (2) 有關(guān)物質(zhì)測(cè)定供試品溶液濃度、 (3)含量測(cè)定濃度 (4)有關(guān)物質(zhì)測(cè)定自身稀釋對(duì)照溶液濃度 (5)最低檢出限 五者間的比例關(guān)系,檢測(cè)波長(zhǎng)的確定與雜質(zhì)校正因子的引入,原理：通常選取主成分最大吸收波長(zhǎng)。該波長(zhǎng)下，由 于各物質(zhì)結(jié)構(gòu)式不同，當(dāng)用峰面積表達(dá)含量或濃度時(shí) 會(huì)有偏差，故必須驗(yàn)證各雜質(zhì)的響應(yīng)校正因子。 驗(yàn)證法：取已知純度系數(shù)的雜質(zhì)對(duì)照品（無需很純） 與主成分對(duì)照品，均配制成1.0%濃度的混合對(duì)照溶 液，連續(xù)進(jìn)樣6針，取平均峰面積計(jì)算校正因子。 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中擬定法：該雜質(zhì)的定位強(qiáng)烈建議采用固定 型號(hào)與規(guī)格的色譜柱（即研究用色譜柱）進(jìn)行，雜質(zhì) 含量引入校正因子即可。列舉實(shí)例！,方法學(xué)認(rèn)證中的耐受性試驗(yàn) 是指更換試驗(yàn)因素，如不同人員、不同儀器，不同色譜柱型號(hào)、廠家，不同試劑等因素。這一點(diǎn)才是真正至關(guān)重要的！認(rèn)證時(shí)不可能面面俱到。通過質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中系統(tǒng)適用性來完成。 申報(bào)資料中以溶液穩(wěn)定性來作為該項(xiàng)驗(yàn)證的主要內(nèi)容即可。,溶液穩(wěn)定性的全面判定 不能單從主成分入手！ 還要注意所有組分的百分比變化，絕對(duì)值變化！,對(duì)照品的使用與管理, 稱量：固體/ 采用的稱量紙一定要小，一般為購(gòu)買來的硫酸紙1/4即可。如稱過量，可取回。液體/ 采用倒稱法，將吸管或藥勺同對(duì)照品一并稱量。 對(duì)于價(jià)格昂貴或量極少的對(duì)照品，可考慮將配制好的對(duì)照品溶液貯藏于冰箱內(nèi)放置，在一定時(shí)間內(nèi)使用。但該時(shí)間段必須經(jīng)過驗(yàn)證。,對(duì)照品溶液貯藏時(shí)間驗(yàn)證方法, 0天配制時(shí)，取濃度高的溶液（最好不低于有關(guān)物質(zhì)測(cè)定時(shí)的供試品溶液濃度）進(jìn)樣測(cè)定，觀測(cè)雜質(zhì)與主成分情況（用歸一化法）。 每隔一段時(shí)間再取濃度高的溶液測(cè)定，依法觀察。 在三或六個(gè)月節(jié)點(diǎn)，另配制一份對(duì)照品溶液，測(cè)定前兩份對(duì)照品含量，如在2.0%以內(nèi)，則證明對(duì)照品溶液濃度沒有改變，可在該時(shí)間段內(nèi)使用。,質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中制訂有關(guān)物質(zhì)的原則 原料藥必須擬定，即便14號(hào)資料穩(wěn)定性考核結(jié)果極其良好，雜質(zhì)沒有任何變化。 固體制劑酌情擬定、重點(diǎn)關(guān)注降解雜質(zhì)。如果原料制成制劑和制劑有效期內(nèi)雜質(zhì)沒有增加，即可不制訂。 注射劑迫于目前形勢(shì)，一定要擬定！即便14號(hào)資料中雜質(zhì)沒有任何變化、也要擬定！否則極易被“發(fā)補(bǔ)”。,質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)如何擬定 柱效2500即可，沒必要更高，否則作繭自縛。 采用雜質(zhì)對(duì)照品驗(yàn)證分離度，如該雜質(zhì)僅用于定位、則無需純度很高；該雜質(zhì)的選擇一者可為目標(biāo)降解物，分離度要求根據(jù)研究時(shí)的具體情況擬定；二者選用與主成分峰最難分離雜質(zhì)。 采用強(qiáng)破壞試驗(yàn)驗(yàn)證，通過對(duì)比破壞前產(chǎn)生的雜質(zhì)峰與主成分峰的分離情況。,質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)如何擬定 如：國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-350)-2004Z注射用奧美拉唑鈉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定：取供試品溶液，加3%過氧化氫溶液3ml，放置10分鐘后，再加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為系統(tǒng)適用性驗(yàn)證用溶液。色譜圖中與主成分峰相鄰的氧化降解產(chǎn)物峰與主成分峰的分離度應(yīng)符合規(guī)定。, 典 型 圖 譜 分 析,復(fù)方制劑雜質(zhì)制訂原則與技巧 切勿采用自身對(duì)照法、用對(duì)照溶液主成分峰面積和與供試品溶液中雜質(zhì)峰面積和進(jìn)行比較，因無法進(jìn)行雜質(zhì)準(zhǔn)確歸屬，導(dǎo)致誤判。 通過查詢各組分單方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，知曉目標(biāo)降解雜質(zhì)，如氫氯噻嗪。 重點(diǎn)關(guān)注降解雜質(zhì)，通過 14號(hào)穩(wěn)定性考核資料得以知曉。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中最好采用雜質(zhì)對(duì)照品法予以定量測(cè)定，或針對(duì)主成分歸屬、采用自身對(duì)照法（有時(shí)需加入校正因子）。 14號(hào)穩(wěn)定性考核資料中未有變化的雜質(zhì)或雜質(zhì)譜通過各時(shí)間段圖譜的比較說明，以及與參比制劑圖譜的比較說明，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可不擬定。,制劑檢測(cè)時(shí)如有輔料峰存在如何處理？ 輔料峰保留時(shí)間均較短，如在溶劑峰前，可在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定：“扣除溶劑峰與溶劑峰前的輔料峰” 。 如輔料峰在溶劑峰后、但也較為靠前，在第一個(gè)雜質(zhì)峰前，可通過設(shè)定“扣除主峰保留時(shí)間X倍前的輔料峰”。 “X倍”的確定一者建議至少測(cè)試市場(chǎng)上3個(gè)主流品牌；二者在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中指定色譜柱具體型號(hào)與規(guī)格（推薦后者）。 如輔料峰夾雜在各峰間。探明為何輔料后，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中如下擬定：取X輔料適量，用溶劑配制成一定濃度后進(jìn)樣測(cè)定，供試品溶液中扣除該峰。, 分析人員工作的最高境界, 分析人員的最高境界不是做得越多越好，而是采用最少的人力、物力和財(cái)力獲得的數(shù)據(jù)在工作要求的誤差范圍內(nèi)即可，即“事半功倍”之效。, 新藥申報(bào)資料中的注意事項(xiàng) (1) 首要時(shí)清晰、明了。代表了一個(gè)企業(yè)技術(shù)水準(zhǔn)與形象。 (2) 為他人著想，是給評(píng)審老師看的，不是給自己看的。現(xiàn)在藥檢所和審評(píng)中心將有時(shí)間和精力來看了。 (3) 10號(hào)資料中關(guān)鍵圖譜一定要附上。含量測(cè)定、有關(guān)物質(zhì)、溶出度紫外掃描圖譜等、參考文獻(xiàn)等。 (4) 11號(hào)資料中的參考文獻(xiàn)，起草說明，一定要詳細(xì)闡述。文字撰寫一定要清楚，不要怕寫得多，要清楚詳細(xì)，讓他人一幕了然、清晰明了。 (5) 12號(hào)資料中的具體數(shù)值。 (6) 14號(hào)資料中，需檢測(cè)的項(xiàng)目不要遺漏調(diào)，不同的劑型一定要深入研究。,作為企業(yè)的思考！ 如何從全國(guó)眾多的仿制藥企業(yè)中脫穎而出？ 市場(chǎng)銷售的切入點(diǎn)？是以價(jià)格取勝，還是以技術(shù)取勝？（與其他各廠家產(chǎn)品的比較） 介紹以色列和印度的作法；扎扎實(shí)實(shí)地做好仿制藥、做好“普藥”?。▏?guó)內(nèi)有廠家在進(jìn)行中）,對(duì)于企業(yè)界寄語(yǔ)（如何脫穎而出？） 第一步：每一產(chǎn)品/劑型皆有其核心與靈魂性評(píng)價(jià)指標(biāo)。企業(yè)可通過對(duì)比現(xiàn)行國(guó)內(nèi)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中這些指標(biāo)與國(guó)外同品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)找到差距，且必須購(gòu)買來原研產(chǎn)品，針對(duì)以上各關(guān)鍵性評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比研究，發(fā)現(xiàn)自身產(chǎn)品內(nèi)在品質(zhì)上存在的不足，隨后有的放矢地進(jìn)行“二