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3.現(xiàn)代生物科技專題(A)1.下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,直線所示為BamH、Hind、Sma三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答下列問題:(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用_限制性核酸內(nèi)切酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含_的培養(yǎng)基上進(jìn)行。(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是_(填字母代號)。A.ampR B.啟動子C.終止子 D.復(fù)制原點(diǎn)(3)過程可采用的操作方法是_(填字母代號)。A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B.顯微注射C.大腸桿菌轉(zhuǎn)化 D.細(xì)胞融合(4)過程采用的生物技術(shù)是_。(5)對早期胚胎進(jìn)行切割,經(jīng)過程可獲得多個新個體,這利用了細(xì)胞的_性。(6)為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá),可采用_(填字母代號)技術(shù)。A.核酸分子雜交 B.基因序列分析C.PCR D.抗原抗體雜交答案(1)Hind和BamH氨芐青霉素(2)B(3)B(4)胚胎移植技術(shù)(5)全能(6)D2.(2018考前押寶卷)浙江某地家庭農(nóng)場模式簡圖如下,請回答下列與生態(tài)工程有關(guān)的問題:(1)農(nóng)場主將種植、養(yǎng)殖、旅游副業(yè)(采摘、垂釣)等進(jìn)行了合理優(yōu)化。還將農(nóng)業(yè)廢棄物和生活污水的轉(zhuǎn)化、再生及資源化等綜合起來,實(shí)現(xiàn)對能量的_。這種做法正是建立生態(tài)農(nóng)業(yè)發(fā)展循環(huán)經(jīng)濟(jì)的一種模式,遵循的基本技術(shù)是_和_。(2)由于果樹與幼苗之間空間很大,農(nóng)場主將甘薯、油菜_在果園中。打落菜籽以后,農(nóng)場把這些油菜秸稈置還果園地,覆蓋在果樹的根部上,又把榨油以后的菜籽餅施入果園,保持_,提高水果的品質(zhì),求得最大化的生態(tài)效益和_。該生態(tài)農(nóng)場能生產(chǎn)出無公害水果的原因是減少了_的使用量,減少對環(huán)境的污染。答案(1)多級利用物質(zhì)循環(huán)利用清潔及可再生能源(2)套種土壤肥力經(jīng)濟(jì)效益農(nóng)藥化肥解析(1)該生態(tài)農(nóng)業(yè)可以實(shí)現(xiàn)能量的多級利用,提高能量的利用率,遵循的基本技術(shù)有物質(zhì)循環(huán)利用、清潔及可再生能源。(2)由于果樹與幼苗之間空間很大,可以將甘薯、油菜套種在果園中,提高對光能等環(huán)境資源的利用率。將油菜秸稈置還果園地,覆蓋在果樹的根部上,又把榨油以后的菜籽餅施入果園,可以保持土壤肥力,這種做法不僅可以得到最大的生態(tài)效益,還可以通過提高水果的品質(zhì)而得到較大的經(jīng)濟(jì)效益。該生態(tài)農(nóng)場能生產(chǎn)出無公害水果的原因是減少了農(nóng)藥化肥的使用,從而減少對環(huán)境的污染。3.(2018溫州二模)請回答下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因的問題:利用圖示質(zhì)粒和目的基因培育轉(zhuǎn)基因醋化醋桿菌。圖中標(biāo)注了相關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列和酶切位點(diǎn),其中酶切位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。(1)利用圖示質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應(yīng)選用_兩種限制性核酸內(nèi)切酶切割。若用Sau3A、Bcl與許多圖示質(zhì)?;旌希總€質(zhì)粒將會有1個或多個位點(diǎn)被切開,最多可能獲得_種大小不同的DNA片段。在首次篩選轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的醋化醋桿菌時,可用_取0.1 mL醋化醋桿菌懸液,涂布在添加了_的培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選。配制該培養(yǎng)基時,通常加入_來調(diào)節(jié)滲透壓。當(dāng)成功選出所需菌種進(jìn)行醋酸發(fā)酵時,發(fā)酵瓶中的醋化醋桿菌通常用鋸末或刨花等材料進(jìn)行_化。(2)利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)(目的基因能1個或多個導(dǎo)入并整合到受體細(xì)胞染色體上)獲得抗蟲(E)抗除草劑(T)的大豆植株甲,若甲自交F1中抗蟲抗除草劑抗蟲不抗除草劑不抗蟲抗除草劑1141,則導(dǎo)入受體細(xì)胞的基因E和T分別至少有幾個?_。A.1、1 B.1、2 C.2、1 D.2、2答案(1)BamH、Hind(缺一不可)7移液器/移液管/取樣器四環(huán)素甘露醇固定(2)C4.在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作為標(biāo)記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答:(1)A過程需要的酶有_。(2)B過程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為載體必須具備的兩個條件是_。(3)C過程的培養(yǎng)基中除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外,還必須加入_。(4)在D過程中,抗蟲基因遺傳信息的傳遞過程是_。(5)如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進(jìn)行檢測,D過程應(yīng)該用_作為探針。(6)科學(xué)家在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)過程中,采用了兩種方案:一是將抗蟲基因?qū)腚x體的棉花葉片細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng);請你設(shè)想另外一種方案:可以將抗蟲基因?qū)胫参锏腳中再進(jìn)行培養(yǎng),導(dǎo)入成功的標(biāo)志是_。答案(1)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶(2)具有標(biāo)記基因;能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存(3)卡那霉素(4)抗蟲基因先轉(zhuǎn)錄成mRNA,再翻譯成蛋白質(zhì)(5)放射性同位素(或熒光分子)標(biāo)記的抗蟲基因(6)受精卵棉花有抗蟲性狀的表現(xiàn)解析(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒的過程需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶,連接時還需要DNA連接酶。(2)作為基因工程的載體,必須具備三個條件:在宿主細(xì)胞中能穩(wěn)定保存并能大量復(fù)制;有多個限制性核酸內(nèi)切酶切點(diǎn),而且每種酶的切點(diǎn)最好只有一個;有一定的標(biāo)記基因,便于篩選。題目中能體現(xiàn)的是。(3)由題可知,我們需要的植株是含有抗蟲基因的植株,因此要進(jìn)行篩選,含有抗蟲基因的植株也一定含有抗卡那霉素基因,所以要利用卡那霉素進(jìn)行篩選。(4)抗蟲基因最終要表現(xiàn)出抗蟲的性狀就必須表達(dá),即通過轉(zhuǎn)錄和翻譯來實(shí)現(xiàn)。(5)目的基因的檢測最關(guān)鍵是看受體細(xì)胞是否含有目的基因,常用DNA分子雜交技術(shù),以已知目的基因片段作為探針,利用堿基互補(bǔ)配對原則進(jìn)行檢測,可以用放射性同位素(或熒光分子等)標(biāo)記。(6)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,可以選用體細(xì)胞或受精卵,最后要進(jìn)行個體水平檢測,即看是否能抗蟲。5.(2018嘉興3月選考測試)回答下列與家蠶養(yǎng)殖有關(guān)的生態(tài)工程與基因工程的問題:(1)南方養(yǎng)蠶,常建立?;~塘。桑基魚塘的核心技術(shù)是_。A.物質(zhì)的良性循環(huán)技術(shù)B.立體養(yǎng)殖技術(shù)C.種殖業(yè)和畜牧業(yè)合理優(yōu)化技術(shù)D.生物防治技術(shù)(2)通過?;~塘等樸素的生態(tài)工程實(shí)踐,可歸納出的生態(tài)工程原理是_。(3)絲素蛋白是家蠶的一種分泌性復(fù)合蛋白,由絲素蛋白重鏈(FibH)、絲素蛋白輕鏈(Fibl)和p25糖蛋白組成。將Fibl基因?qū)氪竽c桿菌(不含質(zhì)粒A)并實(shí)現(xiàn)表達(dá)的過程如圖所示:構(gòu)建重組質(zhì)粒時要用到的工具酶是_。導(dǎo)入時,為了增加大腸桿菌的通透性,常用_處理大腸桿菌。接種在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上的大腸桿菌,有的不能形成菌落,原因是_。影印接種就是用絲絨做成與平板大小相近的印章,然后把長有菌落的母平板倒置在絲絨印章上,輕輕印一下,再把此印章在新的培養(yǎng)基平板上輕輕印一下。經(jīng)培養(yǎng)后,比較新平板上長出的菌落與母平板上的菌落位置,推測可能導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的菌落是_(用字母表示)。目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是_。答案(1)A(2)整體、協(xié)調(diào)、循環(huán)、再生原理(3)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶氯化鈣沒有導(dǎo)入質(zhì)粒b、c大腸桿菌合成絲素蛋白輕鏈(Fibl)6.世界首例轉(zhuǎn)乳糖酶基因奶牛的培育過程如下:從一頭黑白花奶牛(甲)懷孕45天的一個胎兒(乙)中提取成纖維細(xì)胞,然后把乳糖酶基因轉(zhuǎn)到該細(xì)胞中,接著再將該細(xì)胞的細(xì)胞核注入到去核的卵母細(xì)胞中,再在體外將該雜合細(xì)胞培養(yǎng)成早期胚胎,然后將胚胎移植到代孕母牛(丙)的子宮內(nèi),283天后,代孕母牛正常分娩。(1)本研究的目的基因是_,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前要先將其和載體連接成重組DNA,此過程用到的工具酶有_和_。(2)用于移植的胚胎通常應(yīng)培養(yǎng)到_階段再進(jìn)行移植;為了使胚胎數(shù)量增加還可運(yùn)用_技術(shù)。(3)關(guān)于代孕母牛(丙)的條件,下列敘述正確的是_。A.代孕母牛必須是優(yōu)良品種B.胚胎移植前必須經(jīng)過配種C.胚胎移植前需同期發(fā)情D.胚胎移植前進(jìn)行超數(shù)排卵答案(1)乳糖酶基因限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶(2)囊胚胚胎分割(3)C7.(2018金華十校期末調(diào)研)纖維素分子不能進(jìn)入酵母細(xì)胞,為了使酵母菌能夠利用環(huán)境中的纖維素為原料生產(chǎn)乙醇,構(gòu)建了含3種不同基因片段的重組質(zhì)粒,下面是酵母菌轉(zhuǎn)化及纖維素酶在工程菌內(nèi)合成與運(yùn)輸?shù)氖疽鈭D。請回答下列問題:(1)大腸桿菌的質(zhì)粒是基因工程常用的載體,其通常含有抗生素的抗性基因和_的基因。(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時需要用到限制性核酸內(nèi)切酶,某DNA被下圖中的兩種酶切割后形成的粘性末端_(填“相同”或“不相同”)。(3)在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上分別培養(yǎng)以上四種菌株,不能存活的菌株有_種。A.1 B.2 C.3 D.4(4)菌株的對照作用是驗(yàn)證了_不攜帶纖維素酶基因。(5)在利用纖維素生產(chǎn)乙醇時,和兩種菌株中_(填“”或“”)更具有優(yōu)勢。(6)在獲得基因A時,需要從植物體中提取A基因的mRNA,提取mRNA過程中,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是_。答案(1)控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移(2)相同(3)B(4)質(zhì)粒和酵母菌的基因組(5)(6)防止RNA降解8.小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)、皮膚細(xì)胞誘導(dǎo)出多種細(xì)胞及制備單克隆抗體的操作流程如下:(1)操作流程中過程可用_處理獲得一個胚胎干細(xì)胞;過程所采用的技術(shù)是_;過程的核心步驟是_。(2)甲細(xì)胞與乙細(xì)胞融合形成丙細(xì)胞,采用的生物融合劑是_,丙細(xì)胞的特點(diǎn)是_;單克隆抗體的應(yīng)用中,利用_反應(yīng),可以診斷和防治多種疾病,可以研究相應(yīng)抗原的結(jié)構(gòu)、_及其功能。答案(1)胰蛋白酶克隆培養(yǎng)法(細(xì)胞克隆)重組DNA的構(gòu)建(2)滅活的仙臺病毒或聚乙二醇既能無限增殖,又能產(chǎn)生特異抗體抗原抗體雜交細(xì)胞學(xué)分布解析(1)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)是一群胚胎干細(xì)胞,要
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