GB 13092-1991 飼料中霉菌的檢驗方法.pdf

中華 人 民共 和 國 國家 標(biāo) 準(zhǔn) 飼 料 中 霉 菌 檢 驗 方 法G B 1 3 0 9 2 一 9 1 M e t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f Mo l d s i n f e e d s ， 主腸內(nèi)容與適用范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中霉菌的檢驗方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料中霉菌的檢驗。 2 原理 根據(jù)霉菌生理特性， 選擇適宜于霉菌生長而不適宜于細(xì)菌生長的培養(yǎng)基， 采用平皿計數(shù)方法， 測定 霉菌數(shù)。 3 設(shè)備及材料 3 . 1 天平: 感量1 g , 最大秤量1 0 0 0 g , 3 . 2 顯微鏡: 1 5 0 O X。 3 . 3 溫箱: 2 5 一2 8 士1 C。 3 . 4 冰箱: 普通冰箱。 3 . 5 高壓滅菌器: 2 . 5 k g . 3 . 6 干燥箱: 5 0 - 2 5 0 士I C a 17 水浴鍋: 4 5 -7 7 士1 0C。 I8 振蕩器: 往復(fù)式。 3 . 9 微型混合器: 2 9 0 0 r / m i n , 3 . 1 0 電爐。 3 . 1 1 酒精燈。 11 2 接種棒: 鎳鉻絲。 3 . 1 3 溫度計: 1 0 0 士I C。 11 4 載玻片。 11 5 蓋玻片。 3 . 1 6 乳缽。 11 7 試管架。 11 8 玻璃三角瓶: 2 5 0 , 5 0 0 m I 。 11 9 試管: 1 5 X1 5 0 m mo 3 . 2 0 平皿: 直徑9 C m, 3 . 2 1 吸管: 1 , 1 0 m L , 3 . 2 2 玻珠: 直徑5 m m. 國家技術(shù)監(jiān)督局1 9 9 1 一 0 7 一 1 6 批準(zhǔn)1 9 9 2 一 0 4 一 0 1 實施 免費標(biāo)準(zhǔn)下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 免費標(biāo)準(zhǔn)下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無需注冊 即可下載 G B 1 3 0 9 2 一 9 1 3 . 2 3 廣口瓶: 1 0 0 , 5 0 0 M L , 3 . 2 4 金屬勺、 刀等。 3 . 2 5 橡皮乳頭。 4 培養(yǎng)基和稀釋液 高鹽察氏培養(yǎng)基。 稀釋液。 試驗室常用消毒藥品。 414243 5 檢驗程序 霉菌檢驗程序如下: 6 操作步驟 6 . 1 采樣 采樣時必須特別注意樣品的代表性和避免采樣時的污染。 首先準(zhǔn)備好滅菌容器和采樣工具， 如滅菌 牛皮紙袋或廣口瓶， 金屬勺和刀， 在衛(wèi)生學(xué)調(diào)查基礎(chǔ)上， 采取有代表性的樣品， 樣品采集后應(yīng)盡快檢驗， 免費標(biāo)準(zhǔn)下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 免費標(biāo)準(zhǔn)下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無需注冊 即可下載 G B 1 3 0 9 2 一 9 1 否則應(yīng)將樣品放在低溫干燥處。 根據(jù)飼料倉庫、 飼料垛的大小和類型， 分層定點采樣， 一般可分三層五點或分層隨機采樣， 不同點的 樣品， 合。 充分混合后， 取5 0 0 g 左右送檢， 小量存貯的飼料可使用金屬小勺采取上、 中、 下各部位的樣品混 海運進(jìn)口 飼料采樣: 每一船倉采取表層、 上層、 中層及下層四個樣品， 每層從五點取樣混合， 如船倉 盛 飼料超過1 0 0 0 0 t , 則應(yīng)加采一個樣品。 必要時采取有疑問的樣品送檢。 6 . 2 以 無菌操作稱取樣品2 5 g ( 或2 5 m L ) ， 放入含有2 2 5 m L 滅菌稀釋液的 玻塞三角瓶中， 置振蕩器上， 振搖3 0 m i n ， 即為1 : 1 0 的稀釋液。 6 . 3 用滅菌吸管吸取1 : 1 0 稀釋液1 0 m L ， 注入帶玻璃珠的試管中， 置微型混合器上混合3 m i n ， 或注入 試管中， 另用帶橡皮乳頭的1 m L滅菌吸管反復(fù)吹吸5 0 次， 使霉菌抱子分散開。 6 . 4 取1 m L 1 : 1 0 稀釋液， 注入含有9 m L滅菌稀釋液試管中， 另換一支吸管吹吸5 次， 此液為1 : 1 0 0 稀釋 液。 6 . 5 按上述操作順序作1 。 倍遞增稀釋液， 每稀釋一次， 換用一支1 m L滅菌吸管， 根據(jù)對樣品污染情況 的估計， 選擇三個合適稀釋度， 分別在作1 0 倍稀釋的同時， 吸取1 m L 稀釋液于滅菌平皿中， 每個稀釋度 作兩個平皿， 然后將涼至4 5 左右的高鹽察氏培養(yǎng)基注入平皿中， 充分混合， 待瓊脂授固后， 倒置于 2 5 - - 2 8 士I C 溫箱中， 培養(yǎng)3 d 后開始觀察， 應(yīng)培養(yǎng)觀察一周。 6 . 6 計算方法 通常選擇菌落數(shù)在3 0 - 1 0 0 個之間的平皿進(jìn)行計數(shù)， 同稀釋度的2 個平皿的菌落平均數(shù)乘以稀釋倍 數(shù)， 即為每克( 或每毫升) 檢樣中所含霉菌數(shù)。 6 . 7 報告 每克( 或每毫升) 飼料中含霉菌數(shù)以個/ 9 ( 個/ m L ) 表示。 免費標(biāo)準(zhǔn)下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 免費標(biāo)準(zhǔn)下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無需注冊 即可下載 G B 1 3 0 9 2 一 9 1 附錄A 培養(yǎng)墓和稀釋液制備 ( 補充件) 除特殊規(guī)定外， 本標(biāo)準(zhǔn)所用化學(xué)試劑為分析純或化學(xué)純; 生物制劑為細(xì)菌培養(yǎng)用; 水為蒸餾水。 A 1 高鹽察氏培養(yǎng)基 A l . 1 成分 硝酸鈉( G B 6 3 6 ) 2 g 磷酸二氫鉀( G B 1 2 7 4 ) 1 g 硫酸鎂( Mg S 0 4 - 7 H 2 0 , G B 6 7 1 ) 0 . 5 g 氯化鉀( G B 6 4 6 ) 0 . 5 g 硫酸亞鐵( G B 6 6 4 ) 0 . 0 1 g 氯化鈉( G B 1 2 6 6 ) 6 0 g 蔗糖( H G 3 -1 0 0 1 ) 3 0 g 瓊脂2 0 g 蒸餾水1 0 0 0 m L A 1 . 2 制法 加熱溶解， 分裝后， 1 1 5 高壓滅菌3 0 m i n 。 必要時， 可酌量增加瓊脂。 A 2 稀釋液 A 2 . 1 成分 氯化鈉( G B 1 2 6 6 ) 蒸餾水 A 2 . 2 制法 加熱溶解， 分裝后， 1 2 1 高壓滅菌3 0 m i n , ， 。 8.00 05 gm L 附加說明: 本標(biāo)準(zhǔn)由全國