石榴皮中黃酮的提取研究

石榴皮中黃酮類化合物的提取摘要此文獻(xiàn)綜述總結(jié)了石榴皮黃酮類化合物提取方法, 黃酮的提取方法有微波提取法、有機(jī)溶劑提取法、超臨界萃取法、超聲波輔助提取法等?，F(xiàn)代研究證明, 黃酮類化合物是重要的抗氧化劑, 其生理作用是多種多樣的, 超臨界萃取法速度快、操作簡(jiǎn)單, 產(chǎn)品無(wú)溶劑殘留; 超聲波輔助提取無(wú)需加熱, 對(duì)有效成分具有保護(hù)作用。在提取某些黃酮類成分時(shí), 可以將二者合理地結(jié)合利用。對(duì)黃酮類化合物的提取方法進(jìn)行研究, 為開發(fā)利用黃酮類化合物提供了一定的科學(xué)借鑒依據(jù)。 【關(guān)鍵詞】 石榴皮；黃酮類化合物；提取方法 前言石榴（Punica grunatum L. ）屬安石榴科植物，中國(guó)各地均有分布，種質(zhì)資源豐富。石榴皮性溫、澀，具止瀉、止血、殺菌、驅(qū)蟲等功能。近年來(lái)報(bào)道，石榴皮具有抑制細(xì)胞內(nèi)病毒增殖、抑制體外淋球菌生長(zhǎng)、直接殺死病毒和阻止病毒吸附細(xì)胞等作用1 2。此外，近來(lái)研究還發(fā)現(xiàn)石榴皮具有一定的抗氧化性。其內(nèi)含多種化學(xué)成分，黃酮是其中一類較為重要的化合物3。黃酮類化合物廣泛存在于植物界，幾乎分布于所有的綠色植物中4。黃酮類化合物的生理活性較廣泛，具有抗腫瘤，延緩衰老，增強(qiáng)心血管功能，增強(qiáng)免疫力，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)，抗炎，抗過(guò)敏，抗病毒等功能。近年來(lái)對(duì)其研究較多，然而對(duì)石榴中黃酮物質(zhì)的研究較少。目前，黃酮類化合物的提取方法很多，本文主要選取常用的提取方法來(lái)提取石榴皮中黃酮類物質(zhì)，比較了不同提取方法對(duì)石榴皮總黃酮含量測(cè)定的影響，為更好的開發(fā)石榴皮總黃酮奠定了基礎(chǔ)。主題1.1黃酮類化合物的提取方法黃酮類化合物種類多，性質(zhì)差異較大，在植物體內(nèi)因存在部位不同，結(jié)合狀態(tài)也不同，在花、果和葉等組織中一般以苷的形式存在，而在木部堅(jiān)硬組織中，則以游離狀態(tài)存在，在皮、根莖、根等部位也曾發(fā)現(xiàn)有苷的結(jié)合形式5，所以要根據(jù)其存在部位、結(jié)合形式等來(lái)選擇適合的提取方法。1.1.1微波提取法微波加熱是透入內(nèi)部的能量被物料吸收置換成熱能對(duì)物料的加熱, 形成獨(dú)特的物料受熱方式, 具有均勻性的特點(diǎn), 同時(shí)具有反應(yīng)高效性和強(qiáng)選擇性等特點(diǎn), 而且具有操作簡(jiǎn)便、副產(chǎn)物少、提取率高等優(yōu)點(diǎn)。本法多用在藥材的浸出, 在黃酮類化合物的提取上取得了良好的效果。李姣娟等人對(duì)微波法提取川桂葉總黃酮工藝條件進(jìn)行研究6, 以65 %乙醇按照固液比120, 在85 條件下提取9 min, 連續(xù)提取2 次, 總黃酮得率為22.36 mg/g。此外, 張瑞菊采用單因子及正交實(shí)驗(yàn),考察了乙醇濃度、微波時(shí)間、微波功率及固液比對(duì)苦參黃酮類化合物提取量的影響規(guī)律7。1.1.2有機(jī)溶劑提取法甲醇和乙醇是最常用的黃酮類化合物提取溶劑,高濃度的醇( 如90 %左右) 適宜于提取苷元, 60 %左右濃度的乙醇或甲醇水溶液適宜于提取苷類。歐美國(guó)家采用的主要溶劑法工藝有: 醇(酮)浸提- 鹵代烴萃取-酮/銨鹽萃取法、酮浸提-氨水沉淀- 混合酮萃取法、酮浸提- 鹵代烴萃取- 鉛化物沉淀法和醇(酮)浸提- 甲苯/丁醇萃取樹脂法8。該工藝采用中等溫度50 60 浸泡, 雜質(zhì)較少,經(jīng)濃縮、水析可除去烷基酚等脂溶性物質(zhì), 用CCl4 等非極性溶劑萃取除去蠟質(zhì)、葉綠素等脂溶性雜質(zhì); 調(diào)節(jié)pH89 或Pb( OH) 2 沉降, 可除去原花青素、蛋白質(zhì)、高分子單寧等雜質(zhì), 有利于C4- C6 酮和醇萃取有效成分和減少乳化現(xiàn)象, 改善分層, 提高有效成分的萃取率9。1.1.3超臨界萃取法超臨界流體萃取是利用超臨界流體在臨界壓力和臨界溫度附近具有的特殊性能作為溶劑進(jìn)行萃取的一門科學(xué), 最常用的超臨界流體為CO2。應(yīng)用CO2- SPE 技術(shù)提取分離黃酮類物質(zhì), 具有萃取速度快, 效率高, 操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn), 產(chǎn)品中沒(méi)有殘留有機(jī)溶劑, 與傳統(tǒng)的萃取分離工藝相比優(yōu)勢(shì)是明顯的。此外, 超臨界CO2 萃取較易與其它先進(jìn)技術(shù)聯(lián)用, 成為新型而有效的分離分析技術(shù)。余希成通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)研究,對(duì)超臨界CO2 流體萃取海金沙黃酮類化合物的工藝進(jìn)行了優(yōu)化設(shè)計(jì)10。 魏強(qiáng)華等11通過(guò)水提除蠟工藝獲得除蠟蜂膠, 然后對(duì)除蠟蜂膠以乙醇濃度75 %、液固比101、微波處理4 min、室溫浸提3 d 的條件進(jìn)行提取。該工藝可以顯著縮短提取時(shí)間, 提高提取率。1.1.4超聲波輔助提取法用超聲波法提取黃酮類物質(zhì), 是目前比較新的方法。其原理主要是利用超聲波在液體中的空化作用加速植物有效成份的浸出。王立升采用超聲波提取工藝,以乙醇為溶劑提取小葉榕葉中的黃酮類物質(zhì), 工藝上增加對(duì)脂溶性成分的處理。通過(guò)單因素試驗(yàn)研究了各因素對(duì)提取率的影響, 正交試驗(yàn)表明影響黃酮提取率的因素主次順序是: 液固比提取時(shí)間乙醇濃度超聲功率12。小葉榕葉提取黃酮類成分的最佳條件為: 乙醇濃度60 %, 液固比130, 每次提取時(shí)間20 min, 功率為240 W, 最佳條件下小葉榕葉中總黃酮的提取率達(dá)到4.38 %?？偨Y(jié)黃酮類化合物具有降壓、降血脂、鎮(zhèn)痛、抑制血小板聚集、抗骨質(zhì)舒松、抗心律失常、抗過(guò)敏及抗缺氧等多種保健作用, 特別是具有抗自由基及抗癌、防癌的作用, 使其在醫(yī)藥、食品領(lǐng)域的應(yīng)用具有廣闊的前景。大部分毒理學(xué)研究提示黃酮類化合物一般無(wú)毒,由于黃酮類化合物可能存在幾種不同的作用機(jī)制與合成途徑, 研究者們對(duì)其實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋可能仍然存在不足之處?；诖? 還需要考慮其活性成分的穩(wěn)定性以及加工和貯藏過(guò)程中活性成分與藥物中其它成分的交互作用。此綜述對(duì)石榴皮黃酮類化合物的提取方法作了初步說(shuō)明。通過(guò)這幾種不同提取方法的比較，我認(rèn)為微波輔助法比較適用，它具有操作簡(jiǎn)便、副產(chǎn)物少、提取率高等優(yōu)點(diǎn)。雖然石榴皮具有很高的藥用價(jià)值，但是我國(guó)對(duì)于石榴皮的研究并不是相當(dāng)重視，造成石榴皮大量浪費(fèi)，因此加強(qiáng)石榴皮的研究是十分必要的。參考文獻(xiàn)1 張 杰,姚學(xué)軍等.中藥石榴皮鞣質(zhì)類成分抗生殖器皰疹病毒作用J.中國(guó)中藥雜志，1995，20（9）：556 558.2 張 杰，周江橋等.中藥石榴皮對(duì)淋球菌的體外抑制作用J.中國(guó)皮膚病學(xué)雜志，1996，10（2）：75 76.3 許宗運(yùn)，蔣慧等.石榴皮和石榴渣總黃酮含量的測(cè)定J.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003，19：72 75.4 葉 春，聶開慧等.對(duì)40種新鮮蔬菜中總黃酮含量的測(cè)定J.山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào)，2000，19（2）：121 124.5 張繼杰 中藥化學(xué)M . 北京：人民衛(wèi)生出版社，1994.6 李姣娟, 黃克瀛, 龔建良, 等.微波法提取川桂葉總黃酮工藝條件的研究J.食品研究與開發(fā), 2007( 8) : 71- 747 張瑞菊, 張國(guó)英, 孫海波, 等.微波輔助提取苦參總黃酮J.食品研究與開發(fā), 2007( 9) : 43- 468 馮曉萍, 查忠勇, 王槐三.銀杏葉黃酮提取工藝研究現(xiàn)狀M.四川化工與腐蝕控制, 2002, 2( 5) : 13- 169 王成章, 郁青, 沈兆邦.銀杏葉提取物( GBE) 質(zhì)量和制備工藝M.林業(yè)科技通訊, 1999( 8) : 4- 610 余希成, 盧俊.超臨界CO2 萃取海金沙中黃酮的研究J