維生素A定性檢驗(yàn)PPT課件

維生素A定性檢驗(yàn),陸嶸輝、方芳1502、1503班,1,脂溶性維生素的測(cè)定,1. 維生素、維生素的測(cè)定方法和原理,2. 維生素E、維生素K的檢測(cè)方法,3. 維生素的生理功能,4. 維生素測(cè)定未來的發(fā)展趨勢(shì),2,它是指某些能溶于脂肪和大部分有機(jī)溶劑，而不能溶于水的維生素。脂溶性維生素的種類： 維生素A、維生素D、維生素K、維生素E,脂溶性維生素的定義：,3,檢測(cè)的一般程序：,三氯化銻比色法,紫外分光光度法,熒光分析法,高效液相色譜法,分離富集,常用檢測(cè)方法：,樣品處理,排除干擾物質(zhì),檢測(cè),4,1維生素A測(cè)定原理 : 維生素A在三氯甲烷中與三氯化銻作用生成藍(lán)色物質(zhì)，其顏色深淺與溶液中的維生素含量成正比。該藍(lán)色物質(zhì)雖不穩(wěn)定，但在一定時(shí)間內(nèi)可用分光光度計(jì)于620nm波長(zhǎng)處測(cè)定。 VitA + SbCl3 藍(lán)色物質(zhì) max 618nm620nm2適用范圍 對(duì)于維生素A含量不高的使用皂化法處理樣品， 對(duì)于維生素A高的樣品使用研磨法處理樣品,5,3.使用儀器：,721-紫外分光光度計(jì),6,4.樣品處理樣品處理：根據(jù)樣品性質(zhì)，分為皂化法、研磨法。（1）皂化法（適用于每克樣品中Va510ug）研磨 提取 濃縮 研磨：精確稱25g樣品 放入盛有35倍質(zhì)量的無水Na2SO4研缽中 研磨至樣品中水分被完全吸收，并均勻質(zhì)化提?。盒⌒牡匕丫鶆蛸|(zhì)化樣品移入錐形瓶?jī)?nèi) 準(zhǔn)確加入50100ml乙醚 振搖抽提2min，使Va溶于乙醚中 使其自行澄清（大約12h），或離心澄清（乙醚易揮發(fā)，溫度高時(shí)應(yīng)在冷水浴中操作）濃縮：取澄清提取乙醚液25ml，至于比色管內(nèi) 在7080水浴上抽干 立即加入1ml三氯甲烷溶解，供比色使用,8,5.標(biāo)準(zhǔn)曲線制備： 準(zhǔn)確取一定量Va標(biāo)夜于45個(gè)容量瓶?jī)?nèi)，用三氯甲烷配置標(biāo)準(zhǔn)系列 再取相同數(shù)量比色管順次取1ml三氯甲烷和標(biāo)準(zhǔn)系列使用液1ml 各管加入乙酸酐1滴，制成標(biāo)準(zhǔn)比色系列 于620nm波長(zhǎng)處，以三氯甲烷調(diào)節(jié)吸光度至零點(diǎn) 將標(biāo)準(zhǔn)比色系列按照順序移入光路前，迅速加入9ml三氯化銻-三氯甲烷溶液 于6s內(nèi)測(cè)定吸光度 以吸光度為縱坐標(biāo)6.樣品測(cè)定 于一比色管中加入10ml三氯甲烷，加入一滴乙酸酐為空白液 另一管 加入1ml三氯甲烷，其他比色管分別加入1ml樣液及1滴乙酸酐 以下步驟同標(biāo)準(zhǔn)曲線制備注意事項(xiàng)（1）三氯化銻腐蝕性強(qiáng)，不能沾在手上，三氯化銻遇水生成白色沉淀因此用過的儀器要先用稀鹽酸浸泡后再清洗。（2）維生素A見光易分解，整個(gè)實(shí)驗(yàn)應(yīng)在暗處進(jìn)行，防止陽光照射，或采 用 棕色玻璃避光。,9,1,4,分子中僅含有碳、氫、氧三種元素,不溶于水，而溶于脂肪和大部分有機(jī)溶劑。,脂溶性維生素有相當(dāng)數(shù)量貯存在動(dòng)物機(jī)體的脂肪組織中，若動(dòng)物吸收得多，體內(nèi)貯存的也多,2,3,維生素K可在腸道內(nèi)經(jīng)微生物合成。動(dòng)物皮膚中的7脫氫膽固醇可經(jīng)紫外線照射轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素D3。動(dòng)物體內(nèi)不能合成維生素A和維生素E，故均需由飼料提供。,脂溶性維生素共同特點(diǎn),10,-VE主要用于預(yù)防習(xí)慣性流產(chǎn)，男婦不一一孕癥的輔助治療，延緩衰老，溶血性貧血，肌營養(yǎng)不良，動(dòng)脈硬化，急慢性肝炎、肝硬化，胃潰瘍，甲狀腺和腎上腺機(jī)能減退癥，痔，腦血管意外后遺癥、放射線損傷等。,VA具有促進(jìn)上皮細(xì)胞合成糖多糖，同時(shí)抑制角蛋白合成的作用，可維持上皮組織的正常結(jié)構(gòu)和功能；也參與視紫紅質(zhì)的合成，維持暗視覺。,-VD具有促進(jìn)骨鈣化作用。常與VA一起共存于動(dòng)物性食物中，如魚肝油、肝臟、蛋黃、牛奶等；人體皮下組織中的7-脫氫 一膽固醇受紫外線照射后可轉(zhuǎn)變?yōu)閂D3。,一一一-VK治療和預(yù)防骨質(zhì)疏松癥，維生素一一 K2生成骨蛋白質(zhì)，再與鈣共同生成骨質(zhì)，增加骨密度，防止骨折，治療維生素K2缺乏性出血癥，促進(jìn)凝血酶原的形成，加速凝血，維持正常的凝血時(shí)間。,功能,脂溶性維生素的功能：,11,脂溶性維生素測(cè)定未來發(fā)展趨勢(shì)：,維生素的測(cè)定方法的研究發(fā)展迅猛目前的分析方法就有十幾種，包括：分光度法、熒光法、高壓液相色譜法、雙電壓法、示波法、氣相色譜法等等。但一樣品用不同方法檢得到結(jié)果不盡相同給用者帶來一定分析困難，同時(shí)檢測(cè)時(shí)樣品的前處理過程過于繁瑣，分析時(shí)間過長(zhǎng)混合物有效成分提取困難，所以未來的檢測(cè)發(fā)展一定是朝著高靈敏度、高精密度、